Name: drosophila larval nmj dissection
Uploaded: 2009-02-04T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Drosophila Larval NMJ Dissection at JoVE.com

Antes de empezar <ol><li> Todas las culturas deben ser cultivadas a 25 ° C. </li><li> HL3.1 buffer disección puede ser preparado de antemano. Tomar una alícuota de 50 ml de HL3.1 y mantener en hielo. </li><li> Prepare 15 ml de formaldehído fresco 3,5% en HL3.1. Mantenga en hielo. </li></ol> Disección de larvas <ol><li> Ponga una gota de frío HL3.1 en la placa de disección. Esto evitará que el animal se seque y aturdir al animal por lo que es más fácil trabajar con. </li><li> Usando ...

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	<li>Jan, L. Y., Jan, Y. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Properties+of+the+larval+neuromuscular+junction+in+Drosophila+Melanogaster.">Properties of the larval neuromuscular junction in Drosophila Melanogaster.</a> J. Physiol. 262, 189-214 (1976).</li><li>Johansen, J., Halpern, M. E., Johansen, K. M., Keshishian, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stereotypic+morphology+of+glutamatergic+synapses+on+identified+muscle+cells+of+Drosophila+larvae.">Stereotypic morphology of glutamatergic synapses on identified muscle cells of Drosophila larvae.</a> J Neurosci. 9, 710-725 (1989).</li><li>Kesheshian, H., Broadie, K., Chiba, A., Bate, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Drosophila+neuromuscular+junction:+a+model+system+for+studying+synaptic+development+and+function.">The Drosophila neuromuscular junction: a model system for studying synaptic development and function.</a> Annu Rev Neurosci. 19, 545-575 (1996).</li><li>Vactor, D. V., Sink, H., Fambrough, D., Tsoo, R., Goodman, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genes+that+control+neuromuscular+specificity+in+Drosophila.">Genes that control neuromuscular specificity in Drosophila.</a> Cell. , 73-1137 (1993).</li><li>Feng, . <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+modified+minimal+hemolymph-like+solution,+HL3.1,+for+physiological+recordings+at+the+neuromuscular+junctions+of+normal+and+mutant+Drosophila+larvae.">A modified minimal hemolymph-like solution, HL3.1, for physiological recordings at the neuromuscular junctions of normal and mutant Drosophila larvae.</a> J Neurogenet. 18 (2), 377-402 (2004).</li></ol>

La técnica de disección se demuestra en este vídeo se puede utilizar para preparar a las larvas de Drosophila para una variedad de técnicas experimentales. Si las etiquetas fluorescentes de proteínas están presentes, las larvas pueden ser montados y la imagen de inmediato. De lo contrario, la inmunotinción se puede realizar con el fin de marca específica compartimentos sináptica. Además, la electrofisiología se puede realizar fácilmente en las larvas disecados para evaluar el funcionamiento de la ne...

HL3 disección Buffer: (en mm) 70 NaCl, 5 KCl, CaCl2 0,2, MgCl2 20, 10 NaHCO3, 5 trehalosa, sacarosa 115, y HEPES 5, pH 7,3.<br /<br /&gt; Sylgard disección de la placa: Mezclar suavemente (para evitar burbujas) de 10:1 en un vaso de precipitados. Vierta la mezcla en placa de Petri (de cualquier tamaño). Permitir Sylgard curar toda la noche en 37 ° C incubadora.

drosophila larval nmj dissection

La<em&gt; Drosophila</em&gt; Unión neuromuscular (UNM) es un sistema modelo establecido utilizado para el estudio del desarrollo sináptico y su plasticidad. El uso generalizado de la<em&gt; Drosophila</em&gt; Motor del sistema se debe a su gran accesibilidad. Se puede analizar con una sola célula de resolución. Hay 30 músculos por hemisegment cuya disposición dentro de la pared del cuerpo periférico se conocen. Un total de 35 neuronas motoras se adhieren a estos músculos en un patrón que tiene una alta fidelidad. Utilizando la biología molecular y la genética, se puede crear animales transgénicos o mutantes. Entonces, se puede estudiar las consecuencias del desarrollo sobre la morfología y función de la UNM. Para acceder a la UNM para el estudio, es necesario analizar cuidadosamente cada larva. En este artículo se muestra cómo analizar adecuadamente<em&gt; Drosophila</em&gt; Larvas para el estudio de la UNM mediante la eliminación de todos los órganos internos, dejando intacta la pared del cuerpo. Esta técnica es adecuada para preparar a las larvas de la imagen, la inmunohistoquímica, o electrofisiología.

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Drosophila Larval NMJ Dissection

Este protocolo muestra cómo diseccionar<em&gt; Drosophila</em&gt; Larvas en la preparación de inmunohistoquímica y / o imágenes de la unión neuromuscular.

Drosophila larval NMJ Disección

The Drosophila neuromuscular junction (NMJ) is an established model system used for the study of synaptic development and plasticity. The widespread use ...

Research

JoVE Journal

Biology

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Investigación

Biología

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