Name: implantation of engineered tissue in the rat heart
Uploaded: 2009-06-24T00:00:00
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<p class="jove_content"> Este trabalho é suportado por verbas de pesquisa dos Institutos Nacionais de Saúde (HL068915; HL088206) e contribuições para o Fundo de Condução Cardíaca do Hospital Infantil de Boston. </p>

<p class="jove_title"> Parte 1: Indução de anestesia geral </p><ol><li> A 200-250 g de ratos Lewis é anestesiados com ketamina 50 mg / kg e 4 Xilazina mg / kg injetado com uma agulha G 30 na cavidade intraperitoneal. Parte superior do abdômen e no peito direito são recortados para remover os pêlos eo local da incisão cuidadosamente limpos com álcool 70% e, em seguida, um iodopovidona solução anti-séptica tópica. </li><li> O animal é entubado endotraqueal usando um cateter 16 G intravenosa conectado a um respirador para pequenos ani...

<ol>
	<li>Choi, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+conduction+through+engineered+tissue.">Cardiac conduction through engineered tissue.</a> <em style='font-style: italic'>Am J Pathol</em>. <b>169</b>, 72-85 (2006).</li><li>Shin, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low-dose+systemic+bupivacaine+prevents+the+development+of+allodynia+after+thoracotomy+in+rats.+Anesth+Analg.">Low-dose systemic bupivacaine prevents the development of allodynia after thoracotomy in rats. Anesth Analg.</a> <b>107</b>, 1587-1591 (2008).</li><li>Horstick, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+procedure+affects+physiological+parameters+in+rat+myocardial+ischemia:+need+for+mechanical+ventilation.">Surgical procedure affects physiological parameters in rat myocardial ischemia: need for mechanical ventilation.</a> <em style='font-style: italic'>Am J Physiol</em>. <b>276</b>, H472-H479 (1999).</li></ol>

<p class="jove_content"> Para um resultado favorável ao procedimento cirúrgico, é fundamental à adequada entubar e ventilar o animal invasiva. Se o rato é simplesmente sedado e permitiu a respirar espontaneamente, ambos os pulmões, inevitavelmente, colapso, enquanto o tórax é aberto devido a pleura comuns em roedores. Antes de fechar o tórax, pneumotórax qualquer precisa ser completamente eliminada e os pulmões completamente expandido para reduzir a atelectasia. Caso contrário, o desmame do respirador e recuperação será mal suced...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>7x4 Thermo Pad 4/box</td>
<td>Equipment</td>
<td>Hood Thermo-Pad, Summerland, BC Canada</td>
<td>MODEL 704R</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Inspira ASV Ventilator</td>
<td>Equipment</td>
<td>Harvard Apparatus, Holliston, MA 01746 USA</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Handheld Pulse Oximeter</td>
<td>Equipment</td>
<td>Nellcor, Boulder, CO 80301 USA </td>
<td>N20PA</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Retractor</td>
<td>Equipment</td>
<td>Roboz, Gaithersburg, MD 20898 USA</td>
<td>RS-6514</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Isoflurane (Forane)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Baxter</td>
<td>1001936040</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Ketamine HCl</td>
<td>Reagent</td>
<td>HOSPIRA Inc., Lake Forest, IL 60045</td>
<td>RL-0065</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Xylazine (AnaSed)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Lloyd</td>
<td>LB15705A</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Buprenorphine HCL Inject</td>
<td>Reagent</td>
<td>Bedford Labs, Bedford, OH 44146 USA</td>
<td>Div-BUP-P00</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Bupivacaine 0.25%</td>
<td>Reagent</td>
<td>HOSPIRA Inc., Lake Forest, IL 60045</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

implantation of engineered tissue in the rat heart

<p class="jove_content">Cirurgia de roedores é muitas vezes um componente importante na avaliação da utilidade de tecidos artificiais. Uma grande variedade de procedimentos cirúrgicos podem ser realizados em ratos de laboratório comum ou ratos e estes muito freqüentemente serve como um passo intermediário entre a bancada experimentos e testes em animais grandes ou testes em humanos. Dado que os roedores fornecer um sistema modelo estabelecido, o custo-benefício, e fisiologicamente relevantes em que para testar novas combinações de materiais de andaime e células, elas são particularmente bem adequada para estudos de engenharia de tecidos cardiovasculares. Atualmente, descrevemos um procedimento de coração aberto cirúrgico para implante de engenharia de tecidos que contêm células progenitoras miogênica no atrioventricular (AV) sulco de um coração de rato. Estes implantes têm a intenção de criar um conduto elétrico entre o átrio direito eo ventrículo direito com o objetivo final de oferecer um tratamento alternativo para implante de marcapasso convencional em pacientes pediátricos com bloqueio cardíaco completo [1]. A engenharia de tecidos é implantado na AV-groove por meio de uma toracotomia. Para nossos propósitos, ratos Lewis são anestesiados e ventilados invasiva para manter a pressão positiva nas vias aéreas durante o procedimento cirúrgico estéril. A abordagem do coração é realizada por uma toracotomia direita através de uma incisão ântero-lateral na 5<sup&gt; Th</sup&gt; Espaço intercostal. A construção do tecido é fixada no sulco AV usando uma sutura Prolene 7-0 única e posicionado entre o ventrículo direito e átrio na porção ventral do coração. O epicárdio é parcialmente removido para permitir o contato direto entre as células receptoras do miocárdio e os contidos na engenharia de tecidos. Após a implantação, a parede torácica é fechada em camadas, qualquer pneumotórax é evacuado, e que o animal é extubado e tratada com analgésicos.</p>

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Implantation of Engineered Tissue in the Rat Heart

<p class="jove_content">Aqui, descrevemos um procedimento de cirurgia cardíaca para implante de engenharia de tecidos na atrioventricular (AV)-groove de um rato Lewis adulto.</p>

Implantação de engenharia de tecidos no coração de ratos

Rodent surgery is often an important component in assessing the utility of engineered tissues. A wide variety of surgical procedures can be performed in ...

Research

JoVE Journal

Biology

Fabrication of Myogenic Engineered Tissue Constructs

Fabricação de Miogênica Constrói engenharia de tecidos

Despite the fact that electronic pacemakers are life-saving medical devices, their long-term performance in pediatric patients can be problematic owing to ...

Biologia

Primary Culture of Adult Rat Heart Myocytes

Cultura primária de Miócitos Coração Adulto Rat

Cultured primary adult rodent heart cells are an important model system for cardiovascular research.  Nevertheless, establishment of robust, viable ...

Visualizing the Beating Heart in <em>Drosophila</em>

Visualizing the Beating Heart in Drosophila

Visualizar o coração batendo no<em> Drosophila</em

The Drosophila heart has recently emerged as a good model system for examining the genetic, cellular, and molecular mechanisms underlying function in ...

Preparation of embryos for Electron Microscopy of the <em>Drosophila</em> embryonic heart tube

Preparation of embryos for Electron Microscopy of the Drosophila embryonic heart tube

Preparação de embriões de Microscopia Eletrônica do<em> Drosophila</em> Tubo cardíaco embrionário

The morphogenesis of the Drosophila  embryonic heart tube has emerged as a valuable model system for studying cell migration, cell-cell adhesion and cell ...

Quantification of &gamma;H2AX Foci in Response to Ionising Radiation

Quantification of ÃƒÅ½Ã‚Â³H2AX Foci in Response to Ionising Radiation

Quantificação de γH2AX Focos em resposta à radiação ionizante

DNA double-strand breaks (DSBs), which are induced by either endogenous metabolic processes or by exogenous sources, are one of the most critical DNA ...

Quantitation of &gamma;H2AX Foci in Tissue Samples

Quantitation of ÃƒÅ½Ã‚Â³H2AX Foci in Tissue Samples

Quantificação de γH2AX Focos em amostras de tecido

DNA double-strand breaks (DSBs) are particularly lethal and genotoxic lesions, that can arise either by endogenous (physiological or pathological) ...

Preparation of Highly Coupled Rat Heart Mitochondria

Preparação de coração de rato altamente acoplado mitocôndrias

The function of mitochondria in generation of cellular ATP in the process of oxidative phosphorylation is widely recognised. During the past decades there ...

Evaluation of the Spatial Distribution of &gamma;H2AX following Ionizing Radiation

Evaluation of the Spatial Distribution of ÃƒÅ½Ã‚Â³H2AX following Ionizing Radiation

Avaliação da Distribuição Espacial da γH2AX seguintes Radiação Ionizante

An early molecular response to DNA double-strand breaks (DSBs) is phosphorylation of the Ser-139 residue within the terminal SQEY motif of the histone ...

Clonogenic Assay: Adherent Cells

Clonogênica Ensaio: células aderentes

The clonogenic (or colony forming) assay has been established for more than 50 years; the original paper describing the technique was published in 19561. ...

Mouse Sperm Cryopreservation and Recovery using the I&middot;Cryo Kit

Mouse Sperm Cryopreservation and Recovery using the IÃƒâ€šÃ‚Â·Cryo Kit

Criopreservação do mouse Sperm and Recovery utilizando o I · Cryo Kit

Thousands of new genetically modified (GM) strains of mice have been created since the advent of transgenesis and knockout technologies.  Many of these ...