Name: implantation of engineered tissue in the rat heart
Uploaded: 2009-06-24T00:00:00
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<p class="jove_content"> Este trabajo es apoyado por becas de investigación de los Institutos Nacionales de Salud (HL068915; HL088206) y las contribuciones al Fondo de conducción cardiaca en el Hospital de Niños de Boston. </p>

<p class="jove_title"> Parte 1: La inducción de la anestesia general </p><ol><li> A 200-250 g de ratas Lewis es anestesiados con 50 mg / kg de ketamina y 4 mg / kg de xilazina inyecta con una aguja de 30 G en la cavidad intraperitoneal. La parte superior del abdomen y el pecho derecho se recorta para eliminar el vello y la zona de la incisión limpiado a fondo con el 70% de etanol y una solución de yodo-povidona antiséptico tópico. </li><li> El animal está intubado por vía endotraqueal utilizando un catéter de 16 G por vía intravenosa c...

<ol>
	<li>Choi, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+conduction+through+engineered+tissue.">Cardiac conduction through engineered tissue.</a> <em style='font-style: italic'>Am J Pathol</em>. <b>169</b>, 72-85 (2006).</li><li>Shin, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low-dose+systemic+bupivacaine+prevents+the+development+of+allodynia+after+thoracotomy+in+rats.+Anesth+Analg.">Low-dose systemic bupivacaine prevents the development of allodynia after thoracotomy in rats. Anesth Analg.</a> <b>107</b>, 1587-1591 (2008).</li><li>Horstick, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+procedure+affects+physiological+parameters+in+rat+myocardial+ischemia:+need+for+mechanical+ventilation.">Surgical procedure affects physiological parameters in rat myocardial ischemia: need for mechanical ventilation.</a> <em style='font-style: italic'>Am J Physiol</em>. <b>276</b>, H472-H479 (1999).</li></ol>

<p class="jove_content"> Para obtener un resultado favorable a la intervención quirúrgica, es fundamental para intubar correctamente y invasiva ventilar el animal. Si la rata es simplemente sedado para permitir que respire de forma espontánea, los dos pulmones se derrumbará inevitablemente, mientras que el tórax se abre debido a la pleura común en roedores. Antes de cerrar el pecho, cualquier neumotórax debe ser eliminado por completo y los pulmones totalmente expandida para reducir la atelectasia. De lo contrario, el destete del respira...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>7x4 Thermo Pad 4/box</td>
<td>Equipment</td>
<td>Hood Thermo-Pad, Summerland, BC Canada</td>
<td>MODEL 704R</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Inspira ASV Ventilator</td>
<td>Equipment</td>
<td>Harvard Apparatus, Holliston, MA 01746 USA</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Handheld Pulse Oximeter</td>
<td>Equipment</td>
<td>Nellcor, Boulder, CO 80301 USA </td>
<td>N20PA</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Retractor</td>
<td>Equipment</td>
<td>Roboz, Gaithersburg, MD 20898 USA</td>
<td>RS-6514</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Isoflurane (Forane)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Baxter</td>
<td>1001936040</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Ketamine HCl</td>
<td>Reagent</td>
<td>HOSPIRA Inc., Lake Forest, IL 60045</td>
<td>RL-0065</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Xylazine (AnaSed)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Lloyd</td>
<td>LB15705A</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Buprenorphine HCL Inject</td>
<td>Reagent</td>
<td>Bedford Labs, Bedford, OH 44146 USA</td>
<td>Div-BUP-P00</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Bupivacaine 0.25%</td>
<td>Reagent</td>
<td>HOSPIRA Inc., Lake Forest, IL 60045</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

implantation of engineered tissue in the rat heart

<p class="jove_content">La cirugía de roedores es a menudo un componente importante en la evaluación de la utilidad de los tejidos de ingeniería. Una amplia variedad de procedimientos quirúrgicos pueden ser realizados en ratas o ratones de laboratorio común y estas muy a menudo sirven como un paso intermedio entre el de sobremesa experimentos y pruebas con animales grandes o los ensayos en humanos. Teniendo en cuenta que los roedores disponer de un sistema modelo establecido, rentable, y fisiológicamente relevantes en los que probar nuevas combinaciones de materiales del armazón y las células, que son especialmente adecuados para los estudios de ingeniería de tejidos cardiovasculares. En la actualidad, se describe un procedimiento quirúrgico de corazón abierto para la implantación de la ingeniería tisular con células miogénicas progenitoras en el auriculoventricular (AV) ranura de un corazón de rata. Estos implantes tienen la intención de crear un conducto eléctrico entre la aurícula y el ventrículo derecho, con el objetivo último de proporcionar un tratamiento alternativo a la implantación de un marcapasos convencional en pacientes pediátricos con bloqueo cardíaco completo [1]. La ingeniería tisular se implanta en la AV-surco por medio de una toracotomía. Para nuestros propósitos, las ratas Lewis son anestesiados y ventilados invasiva para mantener la presión positiva de aire durante el procedimiento quirúrgico estéril. El enfoque hacia el corazón se realiza una toracotomía derecha a través de una incisión antero-lateral en el 5<sup&gt; °</sup&gt; Espacio intercostal. La construcción de tejido se fija en el surco AV con una sola sutura de Prolene 7-0 y se coloca entre el ventrículo derecho y el atrio en la parte ventral del corazón. El epicardio es parcialmente removido para permitir el contacto directo entre las células receptoras de miocardio y los contenidos en la ingeniería tisular. Tras el implante, la pared torácica se cierra por planos, cualquier neumotórax es evacuado, y el animal es extubado y se tratan con analgésicos.</p>

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Implantation of Engineered Tissue in the Rat Heart

<p class="jove_content">Aquí se describe un procedimiento de cirugía cardiaca para implantar la ingeniería tisular en el auriculoventricular (AV) con ranura de un adulto de rata Lewis.</p>

Implantación de la ingeniería tisular en el corazón de rata

Rodent surgery is often an important component in assessing the utility of engineered tissues. A wide variety of surgical procedures can be performed in ...

Research

JoVE Journal

Biology

Fabrication of Myogenic Engineered Tissue Constructs

Fabricación de construcciones de ingeniería tisular miogénica

Despite the fact that electronic pacemakers are life-saving medical devices, their long-term performance in pediatric patients can be problematic owing to ...

Investigación

Biología

Primary Culture of Adult Rat Heart Myocytes

Cultivo primario de miocitos adultos de corazón de rata

Cultured primary adult rodent heart cells are an important model system for cardiovascular research.  Nevertheless, establishment of robust, viable ...

Visualizing the Beating Heart in <em>Drosophila</em>

Visualizing the Beating Heart in Drosophila

Visualizar el corazón latiendo en<em> Drosophila</em

The Drosophila heart has recently emerged as a good model system for examining the genetic, cellular, and molecular mechanisms underlying function in ...

Preparation of embryos for Electron Microscopy of the <em>Drosophila</em> embryonic heart tube

Preparation of embryos for Electron Microscopy of the Drosophila embryonic heart tube

Preparación de embriones para Microscopía Electrónica de la<em> Drosophila</em> Tubo cardíaco embrionario

The morphogenesis of the Drosophila  embryonic heart tube has emerged as a valuable model system for studying cell migration, cell-cell adhesion and cell ...

Quantification of &gamma;H2AX Foci in Response to Ionising Radiation

Quantification of ÃƒÅ½Ã‚Â³H2AX Foci in Response to Ionising Radiation

La cuantificación de γH2AX focos en respuesta a la radiación ionizante

DNA double-strand breaks (DSBs), which are induced by either endogenous metabolic processes or by exogenous sources, are one of the most critical DNA ...

Quantitation of &gamma;H2AX Foci in Tissue Samples

Quantitation of ÃƒÅ½Ã‚Â³H2AX Foci in Tissue Samples

La cuantificación de γH2AX focos en muestras de tejido

DNA double-strand breaks (DSBs) are particularly lethal and genotoxic lesions, that can arise either by endogenous (physiological or pathological) ...

Preparation of Highly Coupled Rat Heart Mitochondria

Preparación de corazón de rata altamente acoplado mitocondrias

The function of mitochondria in generation of cellular ATP in the process of oxidative phosphorylation is widely recognised. During the past decades there ...

Evaluation of the Spatial Distribution of &gamma;H2AX following Ionizing Radiation

Evaluation of the Spatial Distribution of ÃƒÅ½Ã‚Â³H2AX following Ionizing Radiation

Evaluación de la distribución espacial de la radiación ionizante γH2AX siguientes

An early molecular response to DNA double-strand breaks (DSBs) is phosphorylation of the Ser-139 residue within the terminal SQEY motif of the histone ...

Clonogenic Assay: Adherent Cells

Ensayo clonigénicas: las células adherentes

The clonogenic (or colony forming) assay has been established for more than 50 years; the original paper describing the technique was published in 19561. ...

Mouse Sperm Cryopreservation and Recovery using the I&middot;Cryo Kit

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Criopreservación de espermatozoides de ratón y de recuperación con el I · Kit de Cryo

Thousands of new genetically modified (GM) strains of mice have been created since the advent of transgenesis and knockout technologies.  Many of these ...