Name: cellular toxicity of nanogenomedicine in mcf-7 cell line: mtt assay
Uploaded: 2009-04-03T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Cellular Toxicity of Nanogenomedicine in MCF-7 Cell Line: MTT assay at JoVE.com

<p class="jove_content"> Die Autoren bedanken sich bei Stem Cell Technology und Shahid Ghazi Tabriz Unternehmen bzw. anerkennen, für die Bereitstellung von DMEM ohne Phenolrot und steriles Wasser zur Injektion als Geschenk. </p>

<p class="jove_title"> MCF-7 Aussaat in 96-Well-Platte: </p><p class="jove_content"> MCF-7-Zellen wurden in 25 t-Kolben auf ein Medium mit Dulbecco modifiziertem Eagle-Medium (DMEM), 10% FBS, 100 U / ml Penicillin und 100 ug / ml Streptomycin bei 37 ° C mit 5% CO <sub>2,</sub> 95% Luft und Feuchtigkeit abgeschlossen. Einmal erreicht ~ 90% Konfluenz wurden sie getrennt mit 0,05% Trypsin / EDTA und gezählt mittels Trypanblau und Zählkammer. Diese Zellen wurden dann in einer Konzentration von 4 × 10 <sup>4</sup> Zellen / cm <sup>2</sup> resusp...

<ol>
	<li>Plumb, J. A., Milroy, R., Kaye, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+the+pH+Dependence+of+3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium+Bromide-Formazan+Absorption+on+Chemosensitivity+Determined+by+a+Novel+Tetrazolium-based+Assay.">Effects of the pH Dependence of 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium Bromide-Formazan Absorption on Chemosensitivity Determined by a Novel Tetrazolium-based Assay.</a> <em style='font-style: italic'>Cancer Research</em>. <b>49</b>, 4435-4435 (1989).</li><li>Mosmann, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+Colorimetric+Assay+for+Cellular+Growth+and+Survival:+Application+to+Proliferation+and+Cytotoxicity+Assays.">Rapid Colorimetric Assay for Cellular Growth and Survival: Application to Proliferation and Cytotoxicity Assays.</a> <em style='font-style: italic'>Journal of Lmmunological Methods</em>. <b>65</b>, 55-55 (1983).</li><li>Yang, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Energy+and+Redox+States+in+the+C6+Glioma+Cells+Following+Acute+Exposure+to+Zn,+Se++4+,+and+Se++6+and+the+Correlation+with+Apoptosis.">Energy and Redox States in the C6 Glioma Cells Following Acute Exposure to Zn, Se +4 , and Se +6 and the Correlation with Apoptosis.</a> <em style='font-style: italic'>Toxicology Mechanisms and Methods</em>. <b>16</b> (1), 13-13 (2006).</li><li>Spinner, D. M., Bartlett, J. M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> <em style='font-style: italic'>MTT Growth Assays in Ovarian Cancer, in Ovarian Cancer: Methods and Protocols</em>. , 175-177 (2000).</li></ol>

<p class="jove_content"> Der MTT-Test gilt als eine vielseitige Methode werden und dementsprechend die Lebensfähigkeit der Zellen könnte auf verschiedene Behandlungen ausgewertet werden. Die Produktion von resultierende Formazan zu sein scheint proportional zum Füllstand des Energiestoffwechsels in den Zellen. Daher ist es möglich, die metabolisch aktivierten Zellen auch in Abwesenheit der Zellproliferation zu messen. Die Höhe der Formazan ist proportional zur Höhe des MTT in das Inkubationsmedium. Während produzierte die Konzentration v...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>25 t-flask</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Orange Scientific</td>
<td>5510100</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PBS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>P3813</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dulbecco&#x2019;s Modified Eagle&#x2019;s Medium - high glucose</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>D5671</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>MTT</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>M2128</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>FBS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>F2442</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Penicillin 200,000 u/ml</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>CinnaGen</td>
<td>CR7913</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Streptomycin 200 mg/ml</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>CinnaGen</td>
<td>CR7912</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>trypsin/EDTA</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>T3924</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>trypan blue</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>T8154</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Superfect</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Qiagen</td>
<td>301105</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Polyfect</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Qiagen</td>
<td>301305</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>EGFR antisense</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>MWG biotech</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Scrambled antisense</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>MWG biotech</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>DMEM without phenol red</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Gibco</td>
<td>11880</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Glycine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>G8898</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>hemocytometer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>HBG </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>8-channel pipette</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>TreffLab Transferpette</td>
<td>96.9918.10.1</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Disposable syringe filter </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>IWAKI</td>
<td>2052-025</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Plate reader equipped with 570 nm &630 nm filters </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Biotek ELx808</td>
<td>ELX808</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>96-well plate with lid (flat bottom)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>IWAKI</td>
<td>3860-096</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Laminar flow hood</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Esco class II Biosafety Cabinet</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>CO<sub>2</sub> Incubator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>ASTEC</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

cellular toxicity of nanogenomedicine in mcf-7 cell line: mtt assay

<p class="jove_content">Zytotoxizität der futuristischen nanogenomedicine (zB short interfering RNA und antisense) behindern können ihre klinischen Entwicklung. Von diesen kann das Gen-basierten Medizin und / oder seinem Träger zu entlocken Zelltoxizität. Für die Beurteilung eines solchen Zytotoxizität, ist eine gemeinsame Methodik weitgehend abhängig von Nutzung der 3 - (4, 5-Dimethyl-2-Thiazolyl) -2, 5-diphenyl-2H-Tetrazolium Bromid (MTT) bestimmt, der weithin als genutzt eine kolorimetrische Ansatz bezogen auf die Aktivität der mitochondrialen Dehydrogenase-Enzyme in den Zellen. In dieser Untersuchung wurden MCF-7-Zellen in 96-Well-Platte angeimpft und bei 50% Konfluenz wurden sie mit verschiedenen nanopolyplexes behandelt und dem Test nach 24 Stunden MTT. Wasserlösliche gelben MTT wird durch die metabolisch aktive Zellen, die in Wasser unlöslichen violetten Formazan, die weiter in Dimethylsulfoxid und Sornson s-Puffer pH 10,5 gelöst metabolisiert. Das resultierende Produkt kann durch Spektrophotometrie mit einem Platten-Lesegerät bei 570 nm quantifiziert werden.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Cellular Toxicity of Nanogenomedicine in MCF-7 Cell Line: MTT assay at JoVE.com

Cellular Toxicity of Nanogenomedicine in MCF-7 Cell Line: MTT assay

<p class="jove_content">Der MTT-Test ist eine einfache und reproduzierbare Farbtestverfahren zur Beurteilung der Lebensfähigkeit der Zellen basiert auf Reduktion der gelben MTT und Produktion von wasserunlöslichen Formazan lila. Hier hat sich die Rentabilität der MCF-7 Zellen nach Behandlung von nanogenomedicine ausgewertet worden.</p>

Zelluläre Toxizität von Nanogenomedicine in MCF-7 Zelllinie: MTT-Assay

Cytotoxicity of the futuristic nanogenomedicine (e.g., short interfering RNA and antisense) may hamper its clinical development. Of these, the gene-based ...

Research

JoVE Journal

Biology

Proboscis Extension Response (PER) Assay in Drosophila

Proboscis Extension Response PER Assay in Drosophila

Proboscis Erweiterung Response (PER) Assay in Drosophila

Proboscis extension response (PER) is a taste behavior assay that has been used in flies as well as in honeybees.
On the surface of the fly's mouth ...

Forschung

Biologie

Multiplex PCR and Reverse Line Blot Hybridization Assay (mPCR/RLB)

Multiplex PCR and Reverse Line Blot Hybridization Assay mPCR/RLB

Multiplex PCR und Reverse-Line-Blot-Hybridisierung Assay (MPCR / RLB)

Multiplex PCR/Reverse Line Blot Hybridization assay allows the detection of up to 43 molecular targets in 43 samples using one multiplex PCR reaction ...

Long-term Lethal Toxicity Test with the Crustacean <em>Artemia franciscana</em>

Long-term Lethal Toxicity Test with the Crustacean Artemia franciscana

Langfristige letale Toxizität Test mit dem Krustentier<em> Artemia franciscana</em

Our research activities target the use of biological methods for the evaluation of environmental quality, with particular reference to saltwater/brackish ...

Measurement of Cellular Chemotaxis with ECIS/Taxis

Messung zellulärer Chemotaxis mit ECIS / Taxis

Cellular movement in response to external stimuli is fundamental to many cellular processes including wound healing, inflammation and the response to ...

Organelle Transport in Cultured <em>Drosophila</em> Cells: S2 Cell Line and Primary Neurons.

Organelle Transport in Cultured Drosophila Cells: S2 Cell Line and Primary Neurons.

Organell-Transport in kultivierten<em&gt; Drosophila</em&gt; Zellen: S2-Zelllinie und primären Neuronen.

Drosophila S2 cells plated on a coverslip in the presence of any actin-depolymerizing drug form long unbranched processes filled with uniformly polarized ...

An Assay for Lateral Line Regeneration in Adult Zebrafish

Ein Test für Laterallinie Regeneration im erwachsenen Zebrafisch

Due to the clinical importance of hearing and balance disorders in man, model organisms such as the zebrafish have been used to study lateral line ...

One-channel Cell-attached Patch-clamp Recording

Ein-Kanal-Cell-Attached-Patch-Clamp-Aufnahme

Ion channel proteins are universal devices for fast communication across biological membranes. The temporal signature of the ionic flux they generate ...

Generating a &#34;Humanized&#34; <em>Drosophila</em> S2 Cell Line Sensitive to Pharmacological Inhibition of Kinesin-5

Generating a "Humanized" Drosophila S2 Cell Line Sensitive to Pharmacological Inhibition of Kinesin-5

Erzeugen eines &quot;humanisierte&quot;<em&gt; Drosophila</em&gt; S2-Zelllinie Sensitive pharmakologische Hemmung der Kinesin-5

Kinetochores are large protein-based structures that assemble on centromeres during cell division and link chromosomes to spindle microtubules. Proper ...

A Simple Fluorescence-based Reporter Assay to Identify Cellular Components Required for Ricin Toxin A Chain (RTA) Trafficking in Yeast

A Simple Fluorescence-based Reporter Assay to Identify Cellular Components Required for Ricin Toxin A Chain RTA Trafficking in Yeast

Ein einfache Fluoreszenz basierende Reporter Assay zelluläre Komponenten identifizieren erforderlich für Ricin Toxin eine Kette (RTA) Handel mit Hefe

Bacterial and plant A/B toxins exploit the natural trafficking pathways in eukaryotic cells to reach their intracellular target(s) in the cytosol and to ...

Effect of Fluorescent Proteins on Fusion Partners Using Polyglutamine Toxicity Assays in Yeast

Wirkung von fluoreszierenden Proteinen auf Fusion Partner mit Trinukleotiderkrankungen Toxizität Assays in Hefe

For the investigation of protein localization and trafficking using live cell imaging, researchers often rely on fusing their protein of interest to a ...