Name: non-radioactive in situ hybridization protocol applicable for norway spruce and a range of plant species
Uploaded: 2009-04-17T00:00:00
Duration: 11 min 56 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Non-radioactive in situ Hybridization Protocol Applicable for Norway Spruce and a Range of Plant Species at JoVE.com

نحن ممتنون جدا لبوفين اندرس الذين قدموا للموسيقى لفيلم لدينا مخزون ومايكل إليوت للعمل التطوعي ليكون صوت المتكلم. وقدم الدعم من قبل مؤسسة كارل Trygger ، وبرنامج البحوث الاستراتيجية الجينوميات الوظيفية الزراعية (AgriFunGen) في الجامعة السويدية للعلوم الزراعية ، ومجلس الأبحاث السويدي (VR) ، ومجلس الأبحاث السويدي لشؤون البيئة ، العلوم الزراعية ، والتخطيط المكاني (FORMAS ).

<ol>
	<li>Carr, S. M., Irish, V. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Floral+homeotic+gene+expression+defines+developmental+arrest+stages+in+Brassica+oleracea+L.+vars.+botrytis+and+italica.">Floral homeotic gene expression defines developmental arrest stages in Brassica oleracea L. vars. botrytis and italica.</a> Planta. 201 (2), 179-188 (1997).</li><li>Coen, E. S., Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+war+of+the+whorls:+genetic+interactions+controlling+flower+development.">The war of the whorls: genetic interactions controlling flower development.</a> Nature. 353 (6339), 31-37 (1991).</li><li>Jackson, D., Gurr, S. J., McPherson, M. J., Bowles, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+situ+hybridization+in+plants.">In situ hybridization in plants.</a> Molecular Plant Patology: a practical approach. , (1991).</li><li>Leitch, A. R., Schwarzacher, T., Jackson, D., Leitch, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> In situ hybridization: a practical guide. , (1994).</li><li>Smyth, D. R., Bowman, J. L., Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+flower+development+in+Arabidopsis.">Early flower development in Arabidopsis.</a> Plant Cell. 2 (8), 755-767 (1990).</li><li>Azevedo, H., Lino-Neto, T., Tavares, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+method+for+high-quality+RNA+isolation+from+needles+of+adult+maritime+pine+trees.">An improved method for high-quality RNA isolation from needles of adult maritime pine trees.</a> Plant Molecular Biology Reporter. , 333-338 (2003).</li><li>Sundstrom, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MADS-box+genes+active+in+developing+pollen+cones+of+Norway+spruce+(Picea+abies)+are+homologous+to+the+B-class+floral+homeotic+genes+in+angiosperms.">MADS-box genes active in developing pollen cones of Norway spruce (Picea abies) are homologous to the B-class floral homeotic genes in angiosperms.</a> Dev Genet. 25 (3), 253-266 (1999).</li><li>Tandre, K., Svenson, M., Svensson, M. E., Engstrom, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conservation+of+gene+structure+and+activity+in+the+regulation+of+reproductive+organ+development+of+conifers+and+angiosperms.">Conservation of gene structure and activity in the regulation of reproductive organ development of conifers and angiosperms.</a> Plant J. 15 (5), 615-623 (1998).</li><li>Winter, K. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MADS-box+genes+reveal+that+gnetophytes+are+more+closely+related+to+conifers+than+to+flowering+plants.">MADS-box genes reveal that gnetophytes are more closely related to conifers than to flowering plants.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 96 (13), 7342-7347 (1999).</li><li>Savard, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chloroplast+and+nuclear+gene+sequences+indicate+late+Pennsylvanian+time+for+the+last+common+ancestor+of+extant+seed+plants.">Chloroplast and nuclear gene sequences indicate late Pennsylvanian time for the last common ancestor of extant seed plants.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 91 (11), 5163-5167 (1994).</li><li>Jack, T., Brockman, L. L., Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+homeotic+gene+APETALA3+of+Arabidopsis+thaliana+encodes+a+MADS+box+and+is+expressed+in+petals+and+stamens.">The homeotic gene APETALA3 of Arabidopsis thaliana encodes a MADS box and is expressed in petals and stamens.</a> Cell. 68 (4), 683-697 (1992).</li><li>Bowman, J. L., Smyth, D. R., Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genes+directing+flower+development+in+Arabidopsis.">Genes directing flower development in Arabidopsis.</a> Plant Cell. 1 (1), 37-52 (1989).</li><li>Kramer, E. M., Irish, V. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolution+of+genetic+mechanisms+controlling+petal+development.">Evolution of genetic mechanisms controlling petal development.</a> Nature. 399 (6732), 144-148 (1999).</li><li>Sundstrom, J., Engstrom, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conifer+reproductive+development+involves+B-type+MADS-box+genes+with+distinct+and+different+activities+in+male+organ+primordia.">Conifer reproductive development involves B-type MADS-box genes with distinct and different activities in male organ primordia.</a> Plant J. 31 (2), 161-169 (2002).</li><li>Carlsson, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microarray+analysis+reveals+altered+expression+of+a+large+number+of+nuclear+genes+in+developing+cytoplasmic+male+sterile+Brassica+napus+flowers.">Microarray analysis reveals altered expression of a large number of nuclear genes in developing cytoplasmic male sterile Brassica napus flowers.</a> Plant J. 49 (3), 452-462 (2007).</li><li>Teixeira, R. T., Farbos, I., Glimelius, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+levels+of+meristem+identity+and+homeotic+genes+are+modified+by+nuclear-mitochondrial+interactions+in+alloplasmic+male-sterile+lines+of+Brassica+napus.">Expression levels of meristem identity and homeotic genes are modified by nuclear-mitochondrial interactions in alloplasmic male-sterile lines of Brassica napus.</a> Plant J. 42 (5), 731-742 (2005).</li><li>Ying, S., Kay, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+technique+of+in+situ+hybridization.">The technique of in situ hybridization.</a> Methods in Molecular Medicine. 56, 263-283 (2001).</li></ol>

الكتاب ليس لديهم ما تكشف.

جانبين من جوانب P. وكان محسن abies بروتوكول بالمقارنة مع ألف thaliana / B. napus البروتوكول ، ريبونوكلياز المعالجة وتركيز بروتين K. وريبونوكلياز يزيل الاشارات الخلفية ، وبالتالي يزيد من خصوصية 17 إشارة. هناك حاجة لعلاج K بروتين لpermeabilize الأنسجة بحيث يمكن أن تدخل في التحقيق وهجن إلى تجمع RNA من الفائدة. أعطى العقاقير DAL13 تحقيق أعلى دون إشارة ريبونوكلياز المعاملة (الشكل 3C ، E ، G) مقارنة المقاطع تعامل مع ريبونوكلياز لمدة 30 دقيقة (الشكل 2D ، F و H). منذ ريبونوكلياز المعاملة لم تعزز إشارة تمت إزالته من البروتوكول. وجرى اختبار العلاج على ثلاثة بروتيناز K تركيزات مختلفة ؛ 1 و 3 و 5 ميكروغرام / مل. في حالة P. ولوحظ abies إشارة منخفضة أو لا تستخدم 1 ميكروغرام / مل K بروتين (الشكل 3C - D). تم الحصول على إشارة قوية مع كل من 3 ميكروغرام / لتر (الشكل 3E - F) و 5 ميكروغرام / لتر (الشكل 3G - H) بروتين كاف نظرا لعدم والفرق واضح في قوة الإشارة وعثر عند استخدام 5 ميكروغرام / مل K بروتيناز اخترنا مقارنة ب 3 ميكروغرام / لتر ، لاستخدام 3 ميكروغرام / مل في بروتوكول لدينا. فمن المحتمل أن تحتاج إلى تركيز بروتين كاف في أعلى P. المخاريط abies الذكور مقارنة A. thaliana وباء. البراعم الزهرية napus ومن المقرر أن الأنسجة أكثر إحكاما مع مستويات أعلى من الفينول والسكريات. خلال التثبيت ، وتضمين بعض الاختلافات بين A. thaliana / B. napus البروتوكول وعلى P. abies البروتوكول واضحة. يتم إصلاح الأنسجة الاهتمام لتوفير الاحتفاظ RNA وهذا هو خطوة حاسمة منذ مواد ثابتة سيئة قد تعطي إشارة منخفضة أو لا يمكن الكشف عنها حتى ولو مرنا وفيرة للغاية. النسيج هو المجففة ، والتي تم تطهيرها وجزءا لا يتجزأ من الشمع في تغييرات تدريجية لتجنب تلف الأنسجة ، وكلوريد الصوديوم في بعض البروتوكولات 0.85 ٪ يضاف إلى الايثانول في جفاف لتجنب المزيد من الانكماش وتورم في خلايا 3. يمكن تنفيذ الخطوة الجفاف خلال تضمين على الجليد للحفاظ على الحد الأدنى من النشاط في ريبونوكلياز. في P. abies بروتوكول الإصلاح بارافورمالدهيد 4 ٪ محلول يحتوي غلوتارالدهيد 0.25 ٪ ، والتي يفترض أن تعطي أفضل الاحتفاظ RNA 17 على الرغم من أن البعض يقول أنه جعل الأرجح ، أي اختلاف 3. بعد sectioning المواد غير الثابتة على الشرائح وسابقة التجهيز (أي dewaxed ، ممهى ، permeabilized ومعالجتها للحد من المنظمات غير محددة وملزمة لجنة التحقيق أخيرا والمجففة) ، قبل ان التهجين. في البروتوكول المقدمة هنا لا يمكن أن يؤديها إجراء كشف كامل في مختبرات عادية ، إشارة يتطور عادة خلال 1-3 أيام ، ويمكن رصدها بشكل مستمر النسبة بين اكثر من اشارة تكون الخلفية. نائب المفتش العام المسمى تحقيقات عادة ما تعطي إشارة أكثر وضوحا بالمقارنة مع المشعة تحقيقات المسمى ، هي أكثر استقرارا ، ويمكن استخدامها في تجارب متتالية. من ناحية أخرى ، يتم تقليل حساسية مقارنة تحقيقات المشعة 17 في التهجين الموقع بالكشف عن التعبير باستخدام المسبار المسمى محددة لمرنا معينة. راديو وضع العلامات هي طريقة وضع العلامات القوية والحساسة لكنه يتطلب معالجة الإشعاع ويستغرق عدة أسابيع قبل أن يتم الكشف عن النتائج. مستضد المسمى تحقيقات من ناحية أخرى ، هي أكثر استقرارا وأقل خطورة وتتطلب التعرض لكشف المتوسطة لبضعة أيام فقط 17. وهكذا ، وضع العلامات مستضد الأساليب هي المهيمنة حاليا. الخطوة الأهم بغض النظر عن البروتوكول هو تصميم المسبار. وينبغي توخي الحذر للتأكد من تحقيق نوعية عالية لديها ، والمسمى مع UTPs ذات جودة عالية. درجة الحرارة في بعض الأحيان التهجين و / أو طول رد فعل يجب أن تعدل لتحقيقات معينة. سيكون لدينا بروتوكول تعديل على أساس DIG المسمى تحقيقات تسهيل توطين التعبير مرنا في نفس الوقت في الأنواع التي تتراوح بين ألف thaliana لP. abies ، وينبغي مع تعديلات طفيفة يمكن استخدامها في الأنواع النباتية الأخرى. البروتوكول وبجانب المخاريط من الذكور ، كما تم اختبارها على مراحل مختلفة من البراعم الخضرية والأجنة في لاقحي والجسدية على حد سواء من P. abies مع نتائج جيدة (نتائج غير منشورة ؛ Karlgren وآخرون).

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Acetic anhydride</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>A6404-200ml</td>
<td>minimum 98%</td>
</tr>
<tr>
<td>Acrylamide, linear</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Ambion</td>
<td>9520</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Anti-DIG-antibodies</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Roche Applied Science</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Blocking reagent</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Roche Applied Science</td>
<td>11 175 041 910 or 11 096 176 001</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Bovine serum albumin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>A7030-50g</td>
<td>minimum 98%</td>
</tr>
<tr>
<td>Deionized formamide</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Denhardts solution</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>D2532-5ml</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>DEPC, diethylpyrocarbonate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dextran sulfate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>DIG RNA Labeling Kit (SP6/T7)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Roche Applied Science</td>
<td>11175025910</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Glutaraldehyde (25%)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Histolab products AB</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Glycogen</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Ambion</td>
<td>9510G</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Histoclear II</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Histolab products AB</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>You may use Tissue-clear, Histoclear II, xylen or something similar when embedding your tissue.</td>
</tr>
<tr>
<td>Histowax</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Histolab products AB</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Histowax or Paraplast can be used for embedding.</td>
</tr>
<tr>
<td>Paraformaldehyde</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>P6148-500g</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Paraplast plus</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>P3683-1kg</td>
<td>Histowax or Paraplast can be used for embedding.</td>
</tr>
<tr>
<td>Phusion&#x2122; High-Fidility DNA Polymerase</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Finnzymes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Probe-on Plus slides</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fischer Scientific</td>
<td>22-230-900</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Proteinase K</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>P2308-5mg</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>RNase A</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>R5503-100mg</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Tissue-clear</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sakura Finetek Europ&#233; BV</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>You may use Tissue-clear, Histoclear II, xylen or something similar when embedding your tissue.</td>
</tr>
<tr>
<td>Triethanolamine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>T1377-100ml</td>
<td>minimum 98%</td>
</tr>
<tr>
<td>Triton X-100</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>use your standard product in the lab</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Use one or both of Triton X-100 and Tween-20.</td>
</tr>
<tr>
<td>tRNA</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>83853-100mg</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Tween-20</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>use your standard product in the lab</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Use one or both of Triton X-100 and Tween-20.</td>
</tr>
<tr>
<td>Western Blue</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Promega Corp.</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

non-radioactive in situ hybridization protocol applicable for norway spruce and a range of plant species

تحليل التعبير التكنولوجيات الفائقة الإنتاجية المتاحة اليوم للعلماء تجاوز ملامح التعبير ، لكن القرار من حيث التعبير أنسجة معينة محدودة بسبب مشاكل في تشريح الأنسجة الفردية. بيانات التعبير تحتاج إلى تأكيد وتستكمل مع أنماط التعبير على سبيل المثال باستخدام التهجين في الموقع ، وهي تقنية تستخدم لتوطين خلية التعبير مرنا محددة. في الوضع الطبيعي في أسلوب التهجين وشاقة وتستغرق وقتا طويلا وغالبا ما يتطلب التحسين واسعة اعتمادا على النوع والأنسجة ، وفي الموضع التجارب نسبيا أكثر صعوبة في أداء الأنواع الخشبية مثل شجرة التنوب الصنوبرية النرويج (Picea abies). هنا نقدم DIG تعديلها في البروتوكول الموقع التهجين ، وهو سريع ويمكن تطبيقها على مجموعة واسعة من الأنواع النباتية بما في ذلك P. abies. مع تعديلات قليلة ، بما في ذلك العلاج ريبونوكلياز تغيير وتركيز بروتين كاف ، فإننا لا يمكن استخدام البروتوكول لدراسة أنسجة معينة من التعبير عن جينات متماثلة في الأجهزة التناسلية للذكور واحدة عارية البذور والأنواع كاسية البذور اثنين ؛ P. abies ، thaliana Arabidopsis napus والكرنب. عملت ايضا على قدم المساواة بروتوكول لدراسة الأنواع والجينات. شوهدت AtAP3 وBnAP3 في الأجهزة الثاني والثالث من الزهور دوارة في A. thaliana وباء. وnapus DAL13 في microsporophylls من المخاريط من الذكور P. abies. لP. abies تركيز بروتين كاف ، وتستخدم لpermeablize الأنسجة ، كان لا بد من زيادة إلى 3 جم / مل بدلا من 1 غرام / لتر ، ربما يعود ذلك إلى الأنسجة أكثر إحكاما ومستويات أعلى من الفينول والسكريات. بالنسبة لجميع الأنواع وإزالة العلاج ريبونوكلياز بسبب انخفاض قوة الإشارة دون زيادة مماثلة في خصوصية. ويمكن تطبيق ذلك بمقارنة أنماط محددة من الأنسجة تعبير جينات متماثلة من النباتات المزهرة على حد سواء وشجرة الصنوبرية نظهر أن DIG في البروتوكول الموقع المعروضة هنا ، مع تعديلات دقيقة فقط ، على مجموعة واسعة من الأنواع النباتية. وبالتالي ، فإن البروتوكول يتجنب كل من الأنواع واسعة النطاق الأمثل محددة ، واستخدام شاقة تحقيقات المسمى بالإشعاع لصالح تحقيقات DIG المسمى. لقد اخترنا لتوضيح الخطوات تطالب تقنيا للبروتوكول في فيلمنا. ساهمت آنا Karlgren كارلسون وجيني لهذه الدراسة بالتساوي. كتاب المناظر : آنا Karlgren في Anna.Karlgren @ ebc.uu.se وسوندستروم ينس واو في Jens.Sundstrom @ vbsg.slu.se

Watch this Scientific Journal Video about Non-radioactive in situ Hybridization Protocol Applicable for Norway Spruce and a Range of Plant Species at JoVE.com

Non-radioactive in situ Hybridization Protocol Applicable for Norway Spruce and a Range of Plant Species

نحن تصف تعديل DIG<em&gt; في الموقع</em&gt; بروتوكول التهجين ، وهو سريع ويمكن تطبيقها على مجموعة واسعة من الأنواع النباتية بما في ذلك النرويج شجرة التنوب. مع تعديلات قليلة ، بما في ذلك العلاج ريبونوكلياز تغيير وتركيز بروتين كاف ، يمكن استخدام البروتوكول في دراسات الأنسجة المختلفة والأنواع.

غير المشعة في الموقع تطبيق بروتوكول لتهجين شجرة التنوب النرويج ومجموعة من الأنواع النباتية

The high-throughput expression analysis technologies available today give scientists an overflow of expression profiles but their resolution in terms of ...

Research

JoVE Journal

Biology

Non-radioactive in situ Hybridization Protocol Applicable for Norway Spruce and a Range of Plant Species

Double Whole Mount in situ Hybridization of Early Chick Embryos

الجامعة جبل مزدوجة في الموقع التهجين لافراخ الدجاج في وقت مبكر

The chick embryo is a valuable tool in the study of early embryonic development. Its transparency, accessibility and ease of manipulation, make it an ...

Zebrafish Whole Mount High-Resolution Double Fluorescent In Situ Hybridization

Zebrafish Whole Mount High-Resolution Double Fluorescent In Situ Hybridization

الزرد الجامع جبل الرفيع قرار مزدوج نيون في الموقع التهجين

Whole mount in situ hybridization is one of the most widely used techniques in developmental biology.  Here, we present a high-resolution double ...

Fluorescence in situ hybridization (FISH) Protocol in Human Sperm

Fluorescence in situ hybridization FISH Protocol in Human Sperm

مضان في الموقع التهجين (FISH) البروتوكول في الحيوانات المنوية البشرية

Aneuploidies are the most frequent chromosomal abnormalities in humans. Most of these abnormalities result from meiotic errors during the gametogenic ...

A Noninvasive Hair Sampling Technique to Obtain High Quality DNA from Elusive Small Mammals

عينات الشعر نونينفاسيفي تقنيات الحمض النووي للحصول على ارتفاع الجودة من الثدييات الصغيرة المراوغ

Noninvasive genetic sampling approaches are becoming increasingly important to study wildlife populations. A number of studies have reported using ...

Detection of Viral RNA by Fluorescence in situ Hybridization (FISH)

Detection of Viral RNA by Fluorescence in situ Hybridization FISH

الكشف عن الحمض النووي الريبي الفيروسي بواسطة الإسفار<em&gt; في الموقع</em&gt; التهجين (FISH)

Viruses  that infect cells elicit specific changes to normal cell functions which serve  to divert energy and resources for viral replication. Many ...

RNA In situ Hybridization in Whole Mount Embryos and Cell Histology Adapted for Marine Elasmobranchs

RNA In situ Hybridization in Whole Mount Embryos and Cell Histology Adapted for Marine Elasmobranchs

RNA<em&gt; في الموقع</em&gt; التهجين في الأجنة جبل الجامعة وعلم الأنسجة الخلية مقتبس عن Elasmobranchs البحرية

Marine  elasmobranchs are valued animal models for biomedical and genomic studies as  they are the most primitive vertebrates to have adaptive immunity ...

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

التصور والتحليل من جزيئات الرنا المرسال عن طريق الإسفار<em&gt; في الموضع</em&gt; التهجين في<em&gt; خميرة الخباز</em

The Fluorescence in situ Hybridization (FISH) method allows one to detect nucleic acids in the native cellular environment. Here we provide a protocol for ...

MicroRNA In situ Hybridization for Formalin Fixed Kidney Tissues

MicroRNA In situ Hybridization for Formalin Fixed Kidney Tissues

الرنا الميكروي<em&gt; في الوضع الطبيعي</em&gt; التهجين للأنسجة الكلى الفورمالين الثابتة

In this article we describe a method for colorimetric detection of miRNA in the kidney through in situ hybridization with digoxigenin tagged microRNA ...

Flat Mount Preparation for Observation and Analysis of Zebrafish Embryo Specimens Stained by Whole Mount In situ Hybridization

Flat Mount Preparation for Observation and Analysis of Zebrafish Embryo Specimens Stained by Whole Mount In situ Hybridization

إعداد جبل مسطح لمراقبة وتحليل الأجنة الزرد عينات الملون بواسطة جبل الجامعة<em&gt; في الوضع الطبيعي</em&gt; التهجين

The zebrafish embryo is now commonly used for basic and biomedical research to investigate the genetic control of developmental processes and to model ...

Quick Fluorescent In Situ Hybridization Protocol for Xist RNA Combined with Immunofluorescence of Histone Modification in X-chromosome Inactivation

Quick Fluorescent In Situ Hybridization Protocol for Xist RNA Combined with Immunofluorescence of Histone Modification in X-chromosome Inactivation

خيارات نيون<em&gt; في الموقع</em&gt; بروتوكول التهجين لXist RNA جنبا إلى جنب مع المناعي من هيستون تعديل في كروموسوم X-التعطيل

Combining RNA fluorescent in situ hybridization (FISH) with immunofluorescence (immuno-FISH) creates a technique that can be employed at the single cell ...