Name: non-radioactive in situ hybridization protocol applicable for norway spruce and a range of plant species
Uploaded: 2009-04-17T00:00:00
Duration: 11 min 56 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Non-radioactive in situ Hybridization Protocol Applicable for Norway Spruce and a Range of Plant Species at JoVE.com

אנו מודים מאוד אנדרס Bovin שסיפק את המוזיקה לסרט שלנו על מניות מייקל אליוט להתנדבות להיות הקול הדובר. תמיכה סופק על ידי קרל Trygger קרן, תוכנית אסטרטגית המחקר Genomics פונקציונלית חקלאי (AgriFunGen) באוניברסיטת שוודית למדעי החקלאות, מועצת המחקר השוודי (VR), ומועצת המחקר השוודי לאיכות הסביבה, למדעי החקלאות, תכנון מרחבי (FORMAS ).

<ol>
	<li>Carr, S. M., Irish, V. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Floral+homeotic+gene+expression+defines+developmental+arrest+stages+in+Brassica+oleracea+L.+vars.+botrytis+and+italica.">Floral homeotic gene expression defines developmental arrest stages in Brassica oleracea L. vars. botrytis and italica.</a> Planta. 201 (2), 179-188 (1997).</li><li>Coen, E. S., Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+war+of+the+whorls:+genetic+interactions+controlling+flower+development.">The war of the whorls: genetic interactions controlling flower development.</a> Nature. 353 (6339), 31-37 (1991).</li><li>Jackson, D., Gurr, S. J., McPherson, M. J., Bowles, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+situ+hybridization+in+plants.">In situ hybridization in plants.</a> Molecular Plant Patology: a practical approach. , (1991).</li><li>Leitch, A. R., Schwarzacher, T., Jackson, D., Leitch, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> In situ hybridization: a practical guide. , (1994).</li><li>Smyth, D. R., Bowman, J. L., Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+flower+development+in+Arabidopsis.">Early flower development in Arabidopsis.</a> Plant Cell. 2 (8), 755-767 (1990).</li><li>Azevedo, H., Lino-Neto, T., Tavares, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+method+for+high-quality+RNA+isolation+from+needles+of+adult+maritime+pine+trees.">An improved method for high-quality RNA isolation from needles of adult maritime pine trees.</a> Plant Molecular Biology Reporter. , 333-338 (2003).</li><li>Sundstrom, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MADS-box+genes+active+in+developing+pollen+cones+of+Norway+spruce+(Picea+abies)+are+homologous+to+the+B-class+floral+homeotic+genes+in+angiosperms.">MADS-box genes active in developing pollen cones of Norway spruce (Picea abies) are homologous to the B-class floral homeotic genes in angiosperms.</a> Dev Genet. 25 (3), 253-266 (1999).</li><li>Tandre, K., Svenson, M., Svensson, M. E., Engstrom, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conservation+of+gene+structure+and+activity+in+the+regulation+of+reproductive+organ+development+of+conifers+and+angiosperms.">Conservation of gene structure and activity in the regulation of reproductive organ development of conifers and angiosperms.</a> Plant J. 15 (5), 615-623 (1998).</li><li>Winter, K. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MADS-box+genes+reveal+that+gnetophytes+are+more+closely+related+to+conifers+than+to+flowering+plants.">MADS-box genes reveal that gnetophytes are more closely related to conifers than to flowering plants.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 96 (13), 7342-7347 (1999).</li><li>Savard, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chloroplast+and+nuclear+gene+sequences+indicate+late+Pennsylvanian+time+for+the+last+common+ancestor+of+extant+seed+plants.">Chloroplast and nuclear gene sequences indicate late Pennsylvanian time for the last common ancestor of extant seed plants.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 91 (11), 5163-5167 (1994).</li><li>Jack, T., Brockman, L. L., Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+homeotic+gene+APETALA3+of+Arabidopsis+thaliana+encodes+a+MADS+box+and+is+expressed+in+petals+and+stamens.">The homeotic gene APETALA3 of Arabidopsis thaliana encodes a MADS box and is expressed in petals and stamens.</a> Cell. 68 (4), 683-697 (1992).</li><li>Bowman, J. L., Smyth, D. R., Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genes+directing+flower+development+in+Arabidopsis.">Genes directing flower development in Arabidopsis.</a> Plant Cell. 1 (1), 37-52 (1989).</li><li>Kramer, E. M., Irish, V. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolution+of+genetic+mechanisms+controlling+petal+development.">Evolution of genetic mechanisms controlling petal development.</a> Nature. 399 (6732), 144-148 (1999).</li><li>Sundstrom, J., Engstrom, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conifer+reproductive+development+involves+B-type+MADS-box+genes+with+distinct+and+different+activities+in+male+organ+primordia.">Conifer reproductive development involves B-type MADS-box genes with distinct and different activities in male organ primordia.</a> Plant J. 31 (2), 161-169 (2002).</li><li>Carlsson, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microarray+analysis+reveals+altered+expression+of+a+large+number+of+nuclear+genes+in+developing+cytoplasmic+male+sterile+Brassica+napus+flowers.">Microarray analysis reveals altered expression of a large number of nuclear genes in developing cytoplasmic male sterile Brassica napus flowers.</a> Plant J. 49 (3), 452-462 (2007).</li><li>Teixeira, R. T., Farbos, I., Glimelius, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+levels+of+meristem+identity+and+homeotic+genes+are+modified+by+nuclear-mitochondrial+interactions+in+alloplasmic+male-sterile+lines+of+Brassica+napus.">Expression levels of meristem identity and homeotic genes are modified by nuclear-mitochondrial interactions in alloplasmic male-sterile lines of Brassica napus.</a> Plant J. 42 (5), 731-742 (2005).</li><li>Ying, S., Kay, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+technique+of+in+situ+hybridization.">The technique of in situ hybridization.</a> Methods in Molecular Medicine. 56, 263-283 (2001).</li></ol>

שני היבטים של פ אשוח פרוטוקול היו אופטימיזציה לעומת A. thaliana / B. napus פרוטוקול, RNase טיפול וריכוז proteinase K. RNase מסיר אותות רקע ובכך מגביר את האות 17 סגוליות. הטיפול K proteinase יש צורך permeabilize הרקמות כך לחקור את יכולה להיכנס לבריכה להכליא RNA של עניין. Antisense DAL13 בדיקה נתן את האות גבוה ללא RNase הטיפול (איור 3C, E, G) לעומת סעיפים שטופלו RNase למשך 30 דקות (איור 2 ד, F ו-H). מאז RNase טיפול לא לשפר את האות הוא הוסר מן הפרוטוקול. הטיפול K proteinase נבדקו בשלושה ריכוזים שונים: 1, 3 ו - 5 מיקרוגרם / מ&quot;ל. במקרה של פ אשוח אות נמוך או לא נצפתה באמצעות 1 מיקרוגרם / מ&quot;ל proteinase K (איור 3C-D). איתות חזק הושג עם 3 מיקרוגרם הן / מ&quot;ל ​​(איור 3E-F) 5 ​​מיקרוגרם / מ&quot;ל ​​(איור 3G-H) proteinase ק מאז שום הבדל ניכר עוצמת האות נמצא בשימוש 5 מיקרוגרם / מ&quot;ל ​​proteinase K לעומת 3 מיקרוגרם / מ&quot;ל, בחרנו להשתמש 3 מיקרוגרם / מ&quot;ל ​​בפרוטוקול שלנו. סביר להניח כי הצורך של ריכוז גבוה proteinase K ב פ האצטרובלים הזכריים אשוח לעומת A. thaliana ו-B ניצנים napus פרחוני בשל רקמת יותר קומפקטי עם רמות גבוהות יותר של phenolics ופוליסכרידים. במהלך קיבעון והטבעה כמה הבדלים בין א &#39; thaliana / B. napus פרוטוקול פ אשוח פרוטוקול ניכרים. הרקמה עניין קבוע לספק שמירה רנ&quot;א זה הוא שלב קריטי שכן חומרים קבועים גרוע עשוי לתת אות נמוכה או בלתי מורגשת אף mRNA הוא נרחב ביותר. רקמה היא התייבשות, מפונה מוטבע שעווה שינויים הדרגתיים כדי למנוע נזק לרקמות, ובחלק NaCl פרוטוקולים 0.85% מתווסף אתנול של התייבשות נוספת למנוע הצטמקות ונפיחות של התאים 3. צעד התייבשות במהלך הטבעה יכול להתבצע על קרח כדי לשמור על פעילות RNase לפחות. ב פ אשוח פרוטוקול לתקן את 4% פתרון paraformaldehyde מכיל glutaraldehyde 0.25%, שאמור לתת שימור טוב יותר RNA 17 אף כי יש הטוענים כי זה כנראה לא ישנה 3. לאחר חתך את החומר הוא קבוע על גבי שקופיות pretreated (כלומר dewaxed, rehydrated, permeabilized, טיפול להפחתת הלא ספציפית מחייב בדיקה ומיובש סוף סוף) לפני הכלאה. בפרוטוקול המובא כאן הליך זיהוי כל יכול להתבצע במעבדות רגילות, אות מתפתחת בדרך כלל בתוך 1-3 ימים ואת היחס בין אות על רקע יכול להיות במעקב רציף. DIG שכותרתו בדיקות בדרך כלל לתת איתות מובהק יותר לעומת בדיקות שכותרתו רדיואקטיבי, יציבים יותר, וניתן לעשות בה שימוש חוזר בניסויים עוקבים. מצד שני, רגישות מופחתת לעומת בדיקות רדיואקטיבית 17. הכלאה In situ מזהה ביטוי באמצעות תוויות בדיקה ספציפית mRNA מסוים. רדיו תיוג היא שיטת תיוג חזקים רגיש אבל זה דורש טיפול של רדיואקטיביות וזה לוקח כמה שבועות לפני התוצאות ניתן לאתרם. Antigen שכותרתו בדיקות מצד שני, הם יציבים יותר, מסוכנים פחות דורשים חשיפה בינונית גילוי לכמה ימים רק 17. לפיכך, אנטיגן תיוג שיטות כרגע שולט. השלב הקריטי ביותר ללא תלות בפרוטוקול הוא העיצוב בדיקה. יש להקפיד על מנת לוודא בדיקה יש סגוליות גבוהה התווית UTPs באיכות גבוהה. לפעמים הטמפרטורה הכלאה ו / או אורך התגובה צריך להיות מותאם בדיקות ספציפיות. פרוטוקול שונה שלנו מבוסס על DIG שכותרתו בדיקות יקל לוקליזציה של ביטוי mRNA בו זמנית מינים החל א thaliana ל פ אשוח, ויש עם שינויים קלים להיות שמיש בכל מיני צמחים אחרים. יש פרוטוקול, ליד האצטרובלים הזכריים, גם נבדק על שלבים שונים של צמח יורה ועל שניהם עוברים zygotic ו סומטיים מ פ אשוח עם תוצאות טובות (תוצאות לא פורסם;. Karlgren ואח&#39;).

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Acetic anhydride</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>A6404-200ml</td>
<td>minimum 98%</td>
</tr>
<tr>
<td>Acrylamide, linear</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Ambion</td>
<td>9520</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Anti-DIG-antibodies</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Roche Applied Science</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Blocking reagent</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Roche Applied Science</td>
<td>11 175 041 910 or 11 096 176 001</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Bovine serum albumin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>A7030-50g</td>
<td>minimum 98%</td>
</tr>
<tr>
<td>Deionized formamide</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Denhardts solution</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>D2532-5ml</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>DEPC, diethylpyrocarbonate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dextran sulfate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>DIG RNA Labeling Kit (SP6/T7)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Roche Applied Science</td>
<td>11175025910</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Glutaraldehyde (25%)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Histolab products AB</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Glycogen</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Ambion</td>
<td>9510G</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Histoclear II</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Histolab products AB</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>You may use Tissue-clear, Histoclear II, xylen or something similar when embedding your tissue.</td>
</tr>
<tr>
<td>Histowax</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Histolab products AB</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Histowax or Paraplast can be used for embedding.</td>
</tr>
<tr>
<td>Paraformaldehyde</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>P6148-500g</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Paraplast plus</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>P3683-1kg</td>
<td>Histowax or Paraplast can be used for embedding.</td>
</tr>
<tr>
<td>Phusion&#x2122; High-Fidility DNA Polymerase</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Finnzymes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Probe-on Plus slides</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fischer Scientific</td>
<td>22-230-900</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Proteinase K</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>P2308-5mg</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>RNase A</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>R5503-100mg</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Tissue-clear</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sakura Finetek Europ&#233; BV</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>You may use Tissue-clear, Histoclear II, xylen or something similar when embedding your tissue.</td>
</tr>
<tr>
<td>Triethanolamine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>T1377-100ml</td>
<td>minimum 98%</td>
</tr>
<tr>
<td>Triton X-100</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>use your standard product in the lab</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Use one or both of Triton X-100 and Tween-20.</td>
</tr>
<tr>
<td>tRNA</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>83853-100mg</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Tween-20</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>use your standard product in the lab</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Use one or both of Triton X-100 and Tween-20.</td>
</tr>
<tr>
<td>Western Blue</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Promega Corp.</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

non-radioactive in situ hybridization protocol applicable for norway spruce and a range of plant species

תפוקה גבוהה ניתוח טכנולוגיות ביטוי הזמינים כיום לתת למדענים הצפת פרופילים הביטוי אך ההחלטה שלהם במונחים של הביטוי רקמות ספציפיות מוגבל בגלל בעיות לנתח רקמות הפרט. נתונים הביטוי צריך להיות אישר השלימו עם דפוסי ביטוי באמצעות למשל הכלאה באתרו, טכניקה המשמשת למקם mRNA התא ביטוי ספציפי. בשיטת הכלאה באתרו הוא מייגע, זמן רב ולעיתים קרובות דורש אופטימיזציה נרחב בהתאם מינים ורקמות. בניסויים באתרו יחסית קשה יותר לבצע מינים עציים, כגון נורווגיה כוניפאר אשוחית (Picea אשוח). כאן אנו מציגים DIG שונה בפרוטוקול הכלאה באתרו, אשר הוא מהיר החלים על מגוון רחב של מיני צמחים כולל פ אשוח. עם רק כמה התאמות, כולל שינה RNase טיפול וריכוז proteinase K, אנחנו יכולים להשתמש בפרוטוקול ללמוד ביטוי רקמות ספציפיות של גנים הומולוגיים איברי הרבייה הגברית gymnosperm אחד ושני מינים angiosperm: פ אשוח, thaliana ארבידופסיס ו Brassica napus. פרוטוקול עבדו באותה מידה עבור מינים גנים למד. AtAP3 ו BnAP3 נצפו השני והשלישי איברים פרחים במערבולת א &#39; thaliana ו-B napus ו DAL13 ב microsporophylls של האצטרובלים הזכריים מ פ אשוח. עבור פ אשוח K proteinase ריכוז, המשמש permeablize הרקמות, היה צריך להיות גדל ל 3 גרם / מ&quot;ל במקום 1 גרם / מ&quot;ל, ככל הנראה בשל רקמות יותר קומפקטי רמות גבוהות יותר של phenolics ופוליסכרידים. עבור כל המינים הטיפול RNase הוסר בשל עוצמת האות מופחת ללא גידול מקביל סגוליות. על ידי השוואת ספציפיים רקמות ביטוי דפוסים של גנים הומולוגיים משני הצמחים ועץ מחטניים אנו מראים כי ה-DIG בפרוטוקול באתרו שהוצגו כאן, רק עם שינויים מזעריים, ניתן ליישם במגוון רחב של מיני צמחים. לפיכך, פרוטוקול נמנע גם אופטימיזציה של מינים ספציפיים נרחב ושימוש מייגע של בדיקות שכותרתו רדיואקטיבית לטובת בדיקות DIG שכותרתו. בחרנו להדגים את השלבים טכנית בדרישה של פרוטוקול בסרט שלנו. אנה Karlgren וג&#39;ני Carlsson תרמו באופן שווה על מחקר זה. המחברים מקבילים: אנה Karlgren ב Anna.Karlgren @ ebc.uu.se ו Jens Sundström פ ב Jens.Sundstrom @ vbsg.slu.se

Watch this Scientific Journal Video about Non-radioactive in situ Hybridization Protocol Applicable for Norway Spruce and a Range of Plant Species at JoVE.com

Non-radioactive in situ Hybridization Protocol Applicable for Norway Spruce and a Range of Plant Species

אנו מתארים DIG שונה<em&gt; באתרו</em&gt; פרוטוקול הכלאה, אשר הוא מהיר החלים על מגוון רחב של מיני צמחים כולל נורבגיה אשוח. עם רק כמה התאמות, כולל שינה RNase טיפול וריכוז proteinase K, הפרוטוקול ניתן להשתמש במחקרים של רקמות מינים שונים.

Non-רדיואקטיבי באתרו הכלאה פרוטוקול ישים עבור נורווגיה Spruce ומגוון של מיני צמחים

The high-throughput expression analysis technologies available today give scientists an overflow of expression profiles but their resolution in terms of ...

Research

JoVE Journal

Biology

Non-radioactive in situ Hybridization Protocol Applicable for Norway Spruce and a Range of Plant Species

Double Whole Mount in situ Hybridization of Early Chick Embryos

הר שלם כפול באתרו הכלאה של עוברים צ&#39;יק מוקדם

The chick embryo is a valuable tool in the study of early embryonic development. Its transparency, accessibility and ease of manipulation, make it an ...

Zebrafish Whole Mount High-Resolution Double Fluorescent In Situ Hybridization

Zebrafish Whole Mount High-Resolution Double Fluorescent In Situ Hybridization

דג הזברה שלמים הר ברזולוציה גבוהה פעמיים פלורסנט באתרו הכלאה

Whole mount in situ hybridization is one of the most widely used techniques in developmental biology.  Here, we present a high-resolution double ...

Fluorescence in situ hybridization (FISH) Protocol in Human Sperm

Fluorescence in situ hybridization FISH Protocol in Human Sperm

פלואורסצנציה באתרו הכלאה (FISH) פרוטוקול של זרע אדם

Aneuploidies are the most frequent chromosomal abnormalities in humans. Most of these abnormalities result from meiotic errors during the gametogenic ...

A Noninvasive Hair Sampling Technique to Obtain High Quality DNA from Elusive Small Mammals

שיער פולשנית דגימה טכניקה לקבל DNA באיכות גבוהה מ יונקים קטנים החמקמק

Noninvasive genetic sampling approaches are becoming increasingly important to study wildlife populations. A number of studies have reported using ...

Detection of Viral RNA by Fluorescence in situ Hybridization (FISH)

Detection of Viral RNA by Fluorescence in situ Hybridization FISH

זיהוי של רנ&quot;א נגיפי על ידי הקרינה<em&gt; באתרו</em&gt; הכלאה (דגים)

Viruses  that infect cells elicit specific changes to normal cell functions which serve  to divert energy and resources for viral replication. Many ...

RNA In situ Hybridization in Whole Mount Embryos and Cell Histology Adapted for Marine Elasmobranchs

RNA In situ Hybridization in Whole Mount Embryos and Cell Histology Adapted for Marine Elasmobranchs

רנ&quot;א<em&gt; באתר</em&gt; הכלאה בעוברי הר שלמים והיסטולוגיה הסלולרית מותאמת לElasmobranchs הימי

Marine  elasmobranchs are valued animal models for biomedical and genomic studies as  they are the most primitive vertebrates to have adaptive immunity ...

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

הדמיה וניתוח של מולקולות ה-mRNA באמצעות הקרינה<em&gt; באתרו</em&gt; הכלאה ב<em&gt; Cerevisiae Saccharomyces</em

The Fluorescence in situ Hybridization (FISH) method allows one to detect nucleic acids in the native cellular environment. Here we provide a protocol for ...

MicroRNA In situ Hybridization for Formalin Fixed Kidney Tissues

MicroRNA In situ Hybridization for Formalin Fixed Kidney Tissues

MicroRNA<em&gt; באתרו</em&gt; הכלאה לרקמות כליה פורמלין קבועה

In this article we describe a method for colorimetric detection of miRNA in the kidney through in situ hybridization with digoxigenin tagged microRNA ...

Flat Mount Preparation for Observation and Analysis of Zebrafish Embryo Specimens Stained by Whole Mount In situ Hybridization

Flat Mount Preparation for Observation and Analysis of Zebrafish Embryo Specimens Stained by Whole Mount In situ Hybridization

הר הכנה שטוחה לתצפית וניתוח של עובר דג הזברה דוגמאות ויטראז בהר שלם<em&gt; באתרו</em&gt; הכלאה

The zebrafish embryo is now commonly used for basic and biomedical research to investigate the genetic control of developmental processes and to model ...

Quick Fluorescent In Situ Hybridization Protocol for Xist RNA Combined with Immunofluorescence of Histone Modification in X-chromosome Inactivation

Quick Fluorescent In Situ Hybridization Protocol for Xist RNA Combined with Immunofluorescence of Histone Modification in X-chromosome Inactivation

המהיר פלורסנט<em&gt; באתר</em&gt; הכלאת פרוטוקול לXist RNA משולב עם Immunofluorescence של היסטון שינוי באיון כרומוזום X

Combining RNA fluorescent in situ hybridization (FISH) with immunofluorescence (immuno-FISH) creates a technique that can be employed at the single cell ...