Name: measuring replicative life span in the budding yeast
Uploaded: 2009-06-25T00:00:00
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इस काम एलिसन मेडिकल फाउंडेशन से एम.के. और BKK के लिए एक अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था. एम के एक एलिसन एजिंग में मेडिकल फाउंडेशन नई विद्वान है. हम सहायता के लिए शूटिंग के दौरान सौम्या Kotireddy धन्यवाद देना चाहूंगा.

भाग 1: replicative जीवन काल विश्लेषण के लिए उपभेदों और प्लेटें तैयार यह खंड replicative जीवन काल प्रयोग और जीवन काल के विश्लेषण के लिए खमीर कोशिकाओं की तैयारी में इस्तेमाल के लिए ठोस YEPD प्लेटों की तैयारी का वर्णन है. </...

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	<li>Kaeberlein, M., Burtner, C. R., Kennedy, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+developments+in+yeast+aging.">Recent developments in yeast aging.</a> PLoS Genet. 3, (2007).</li><li>Kaeberlein, M., Conn, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Handbook of models for human aging. , 109-120 (2006).</li><li>Smith, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+evidence+for+conserved+longevity+pathways+between+divergent+eukaryotic+species.">Quantitative evidence for conserved longevity pathways between divergent eukaryotic species.</a> Genome Res. 18, 564-570 (2008).</li><li>Steinkraus, K. A., Kaeberlein, M., Kennedy, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Replicative+aging+in+yeast:+the+means+to+the+end.">Replicative aging in yeast: the means to the end.</a> Annu Rev Cell Dev Biol. 24, 29-54 (2008).</li><li>Murakami, C. J., Burtner, C. R., Kennedy, B. K., Kaeberlein, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+high-throughput+quantitative+analysis+of+yeast+chronological+life+span.">A method for high-throughput quantitative analysis of yeast chronological life span.</a> J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 63, 113-121 (2008).</li><li>Jiang, J. C., Jaruga, E., Repnevskaya, M. V., Jazwinski, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+intervention+resembling+caloric+restriction+prolongs+life+span+and+retards+aging+in+yeast.">An intervention resembling caloric restriction prolongs life span and retards aging in yeast.</a> Faseb J. 14, 2135-2137 (2000).</li><li>Kaeberlein, M., Kirkland, K. T., Fields, S., Kennedy, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sir2-independent+life+span+extension+by+calorie+restriction+in+yeast.">Sir2-independent life span extension by calorie restriction in yeast.</a> PLoS Biol. 2, E296-E296 (2004).</li><li>Lin, S. J., Defossez, P. A., Guarente, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Requirement+of+NAD+and+SIR2+for+life-span+extension+by+calorie+restriction+in+Saccharomyces+cerevisiae.">Requirement of NAD and SIR2 for life-span extension by calorie restriction in Saccharomyces cerevisiae.</a> Science. 289, 2126-2128 (2000).</li><li>Kaeberlein, M., Kennedy, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Large-scale+identification+in+yeast+of+conserved+ageing+genes.">Large-scale identification in yeast of conserved ageing genes.</a> Mech Ageing Dev. 126, 17-21 (2005).</li><li>Kaeberlein, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+yeast+replicative+life+span+by+TOR+and+Sch9+in+response+to+nutrients.">Regulation of yeast replicative life span by TOR and Sch9 in response to nutrients.</a> Science. 310, 1193-1196 (2005).</li></ol>

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		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Agar</td>
<td>Reagent</td>
<td>Fisher Scientific (BD Diagnostic Systems)</td>
<td>DF0145-17-0 (214530)</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Bacto-Peptone</td>
<td>Reagent</td>
<td>Fisher Scientific (BD Diagnostic Systems)</td>
<td>DF0118-17-0 (211677)</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Yeast Extract</td>
<td>Reagent</td>
<td>Fisher Scientific (BD Diagnostic Systems)</td>
<td>DF0886-17-0 (288620)</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Glucose</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

measuring replicative life span in the budding yeast

उम्र बढ़ने के एक अपक्षयी प्रक्रिया सेलुलर घटकों और मृत्यु दर में जिसके परिणामस्वरूप organelles के एक प्रगतिशील गिरावट के द्वारा विशेषता है. नवोदित खमीर<em&gt; Saccharomyces cerevisiae</em&gt; बड़े पैमाने पर किया गया इस्तेमाल किया गया है उम्र बढ़ने के जीव विज्ञान का अध्ययन, और खमीर दीर्घायु के कई निर्धारकों कीड़े सहित multicellular eukaryotes में संरक्षित किया जा दिखाया गया है मक्खियों, और चूहों<sup&gt; 1</sup&gt;. विभिन्न संदर्भों में कोशिकाओं के जीवन काल को मापने के द्वारा आसानी मात्रा निर्धारित उम्र जुड़े phenotypes, खमीर में उम्र बढ़ने की कमी के कारण किया गया है लगभग अनन्य रूप से आम उपयोग में दो अलग जीवन काल मानदंड के साथ, assayed<sup2&gt;</sup&gt;. कालानुक्रमिक जीवन अवधि है कि एक माँ सेल एक गैर विभाजित राज्य निष्क्रियता की तरह, में जीवित रह सकते हैं समय की लंबाई करने के लिए संदर्भित करता है, और multicellular eukaryotes में पोस्ट mitotic कोशिकाओं की उम्र बढ़ने के लिए एक मॉडल के रूप में सेवा करने का प्रस्ताव है. Replicative जीवन काल में, इसके विपरीत में, बेटी senescence के लिए पहले एक माँ सेल द्वारा उत्पादित कोशिकाओं की संख्या संदर्भित करता है, और mitotically सक्रिय कोशिकाओं में उम्र बढ़ने के एक मॉडल प्रदान सोचा. यहाँ हम नवोदित खमीर माँ कोशिकाओं के replicative जीवन अवधि को मापने के लिए एक सामान्यीकृत प्रोटोकॉल उपस्थित थे. replicative जीवन अवधि परख के लक्ष्य निर्धारित करने के लिए कितनी बार प्रत्येक माँ सेल कलियों है. माँ और बेटी की कोशिकाओं को आसानी से एक मानक प्रकाश माइक्रोस्कोप, (कुल बढ़ाई 160X) जैसे Zeiss 40 Axioscope या किसी अन्य तुलनीय मॉडल का उपयोग कर एक अनुभवी अनुसंधानकर्ता द्वारा विभेदित किया जा सकता है है. माँ कोशिकाओं से बेटी कोशिकाओं के शारीरिक जुदाई एक पुस्तिका फाइबर ऑप्टिक एक सुई के साथ सुसज्जित micromanipulator का उपयोग करने के लिए हासिल की है. विशिष्ट प्रयोगशाला खमीर उपभेदों प्रति 20-30 माँ बेटी कोशिकाओं का उत्पादन और एक जीवन काल प्रयोग 2-3 सप्ताह की आवश्यकता है.

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Measuring Replicative Life Span in the Budding Yeast

इस अनुच्छेद में हम खमीर माँ कोशिकाओं के replicative जीवन अवधि को मापने के लिए एक सामान्य प्रोटोकॉल उपस्थित थे.

नवोदित खमीर में Replicative लाइफ स्पैन मापने

Aging is a degenerative process characterized by a progressive deterioration of cellular components and organelles resulting in mortality. The budding ...

Research

JoVE Journal

Biology

Measuring Caenorhabditis elegans Life Span on Solid Media

Measuring Caenorhabditis elegans Life Span on Solid Media

माप Caenorhabditis एलिगेंस ठोस मीडिया पर लाइफ स्पैन

Aging is a degenerative process characterized by a progressive deterioration of cellular components and organelles resulting in mortality. The nematode ...

Quantifying Yeast Chronological Life Span by Outgrowth of Aged Cells

आयु कक्ष के परिणाम के द्वारा खमीर कालानुक्रमिक लाइफ स्पैन बढ़ाता

The budding yeast Saccharomyces cerevisiae has proven to be an important model organism in the field of aging research 1. The replicative and ...

Purification of the M. magneticum Strain AMB-1 Magnetosome Associated Protein MamA&Delta;41

Purification of the M. magneticum Strain AMB-1 Magnetosome Associated Protein MamAÃƒÅ½Ã¢â‚¬Â41

के शोधन एम. magneticum तनाव Magnetosome एसोसिएटेड प्रोटीन MamAΔ41-1 AMB

Magnetotactic bacteria comprise a diverse group of aquatic microorganisms that are able to orientate themselves along geomagnetic fields. This behavior is ...

Analysis of the Development of a Morphological Phenotype as a Function of Protein Concentration in Budding Yeast

नवोदित खमीर में प्रोटीन कांसंट्रेशन की एक फंक्शन के रूप एक morphological Phenotype के विकास विश्लेषण

Gene deletion and protein overexpression are common methods for studying functions of proteins. In this article, we describe a protocol for analysis of ...

Measuring Caenorhabditis elegans Life Span in 96 Well Microtiter Plates

Measuring Caenorhabditis elegans Life Span in 96 Well Microtiter Plates

माप Caenorhabditis एलिगेंस 96 खैर microtiter प्लेट्स में लाइफ स्पैन

Lifespan is a biological process regulated by several genetic pathways. One strategy to investigate the biology of aging is to study animals that harbor ...

Measuring the Kinetics of mRNA Transcription in Single Living Cells

एकल जीवित कोशिकाओं में mRNA ट्रांसक्रिप्शन के कैनेटीक्स माप

The transcriptional activity of RNA polymerase II (Pol II) is a dynamic process and therefore measuring the kinetics of the transcriptional process in ...

Acquiring Fluorescence Time-lapse Movies of Budding Yeast and Analyzing Single-cell Dynamics using GRAFTS

नवोदित खमीर की प्रतिदीप्ति समय चूक सिनेमा हासिल करना और grafts का उपयोग कर एकल सेल गतिशीलता का विश्लेषण

Fluorescence time-lapse microscopy has become a powerful tool in the study of many biological processes at the single-cell level. In particular, movies ...

Budding Yeast Protein Extraction and Purification for the Study of Function, Interactions, and Post-translational Modifications

समारोह का अध्ययन है, सहभागिता, और बाद translational संशोधनों के लिए नवोदित खमीर प्रोटीन निष्कर्षण और शोधन

Homogenization by bead beating is a fast and efficient way to release DNA, RNA, proteins, and metabolites from budding yeast cells, which are notoriously ...

Measuring the Osmotic Water Permeability Coefficient (Pf) of Spherical Cells: Isolated Plant Protoplasts as an Example

Measuring the Osmotic Water Permeability Coefficient Pf of Spherical Cells: Isolated Plant Protoplasts as an Example

Osmotic पानी पारगम्यता गुणांक (पी मापने<sub&gt; च</sub&gt;) गोलाकार कोशिकाओं का एक उदाहरण के रूप में अलग संयंत्र protoplasts

Studying AQP regulation mechanisms is crucial for the understanding of water relations at both the cellular and the whole plant levels. Presented here is ...

Protein Purification Technique that Allows Detection of Sumoylation and Ubiquitination of Budding Yeast Kinetochore Proteins Ndc10 and Ndc80

Sumoylation और नवोदित खमीर Kinetochore प्रोटीन Ndc10 और Ndc80 की Ubiquitination की जांच की अनुमति देता है कि प्रोटीन शोधन तकनीक

Post-translational Modifications (PTMs), such as phosphorylation, methylation, acetylation, ubiquitination, and sumoylation, regulate the cellular ...