Name: gross and fine dissection of inner ear sensory epithelia in adult zebrafish (danio rerio)
Uploaded: 2009-05-08T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Gross and Fine Dissection of Inner Ear Sensory Epithelia in Adult Zebrafish Danio rerio at JoVE.com

Dit onderzoek werd ondersteund door de Intramurale Research Program van de National Human Genome Research Institute, National Institutes of Health.

Deel 1: Voorbereiding van het weefsel <ol><li> Euthanaseren de volwassen zebravissen met gebufferde MS-222 (Ethyl 3-aminobenzoaat methaansulfonaat zout, 0,03%). </li><li> Onthoofden van de vis. Snijd de onderkaak, plaats het hoofd op de dissectie pad met de ventrale kant naar boven, en immobiliseren het weefsel met een insect pinnen. Verwijder het zachte weefsel ventrale aan de schedel en crack opent het ventrale deel van de schedel capsule met een paar fijne pincet onder een dissectie microscoop. </li><li> Zet de vis...

In dit protocol beschrijven we de grove en fijne ontleding van het binnenoor sensorische epitheel van volwassen zebravissen, die ons in staat stelt weefselmonster voor te bereiden op het bestuderen van de cellulaire en subcellulaire kenmerken van de sensorische epitheel. Met het oog op het uitvoeren van een succesvolle dissectie, de allereerste stap, fixatie, is erg belangrijk. Zorg ervoor dat u altijd vers bereide paraformaldehyde oplossing te gebruiken omdat oude oplossing zal resulteren i...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>MS222 (Ethyl 3-aminobenzoate methanesulfonate salt)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>A5040</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PBS (Phosphate-buffered Saline, 10X)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Mediatech</td>
<td>46-013-CM</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Paraformaldehyde</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>P-6148</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Triton X-100</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>T8787</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Alexa Fluor 488 phalloidin</td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>A12379</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>VECTASHIELD Hard Set Mounting Medium with DAPI</td>
<td>Reagent</td>
<td>Vector Laboratories</td>
<td>H-1500</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dissection microscope</td>
<td>Microscope</td>
<td>Nikon</td>
<td>SMZ1000</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Insect pins</td>
<td>Tool</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>26000-40</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Scissors</td>
<td>Tool</td>
<td>Roboz</td>
<td>RS-5880</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Tweezers</td>
<td>Tool</td>
<td>Roboz</td>
<td>RS-5045</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Needle blade</td>
<td>Tool</td>
<td>Sharpoint</td>
<td>78-6810</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fluorescent microscope</td>
<td>Microscope</td>
<td>Zeiss</td>
<td>Axiovert 200M</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dissection pad</td>
<td>Tool</td>
<td>eNasco</td>
<td>SB07840M</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Zebrafish</td>
<td>Animal</td>
<td>various</td>
<td>n/a</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

gross and fine dissection of inner ear sensory epithelia in adult zebrafish (danio rerio)

Neurosensorische epitheel in het binnenoor zijn de cruciale structuren voor gehoor en evenwicht functies. Daarom is het belangrijk om te begrijpen van de cellulaire en moleculaire kenmerken van het epitheel, die hoofdzakelijk zijn samengesteld uit twee soorten cellen: haarcellen (HCS) en het ondersteunen van cellen (SC). Hier kiezen we ervoor om het binnenoor sensorische epitheel bij volwassen zebravissen niet alleen studeren, omdat de epitheliale structuren zijn sterk geconserveerd in de bestudeerde alle gewervelde dieren, maar ook omdat de volwassen zebravis is in staat om HC, een vermogen dat zoogdieren te verliezen kort na de geboorte te regenereren. We maken gebruik van het binnenoor van volwassen zebravis als model systeem om de mechanismen van binnenoor HC regeneratie studie bij volwassen gewervelde dieren die nuttig zouden kunnen zijn voor de klinische behandeling van het gehoor / balans tekorten in de menselijke als gevolg van de HC verlies. Hier laten we zien hoe de grove en fijne dissecties van binnenoor sensorische epitheel bij volwassen zebravissen doen. De bruto dissectie verwijdert de weefsels rondom het binnenoor en is nuttig voor het bereiden van weefselcoupes, die ons in staat stelt te onderzoeken of het gedetailleerde structuur van de sensorische epitheel. De fijne dissectie ruimt de niet-zintuiglijke-epitheliale weefsels van elke individuele epitheel en stelt ons in staat om de heterogeniteit van de gehele epitheel gemakkelijk te onderzoeken in zijn geheel-mount epitheliale monsters.

Watch this Scientific Journal Video about Gross and Fine Dissection of Inner Ear Sensory Epithelia in Adult Zebrafish Danio rerio at JoVE.com

Gross and Fine Dissection of Inner Ear Sensory Epithelia in Adult Zebrafish Danio rerio

Het binnenoor sensorische epitheel van volwassen zebravis is een goed model voor het begrijpen van de mechanismen van haar cel regeneratie in volwassen gewervelde dieren. Dit protocol laat de fijne ontleding van het epitheel, waardoor we kunnen weefselmonsters krijgen voor het bestuderen van de regeneratieve gebeurtenissen in cellulaire en subcellulaire niveau.

Grove en fijne Dissectie van binnenoor Sensory epitheel in Adult zebravis ( Danio rerio)

Neurosensory epithelia in the inner ear are the crucial structures for hearing and balance functions. Therefore, it is important to understand the ...

Research

JoVE Journal

Biology

Gross and Fine Dissection of Inner Ear Sensory Epithelia in Adult Zebrafish (Danio rerio)

Gross Dissection of the Stomach of the Lobster, Homarus Americanus

Gross Dissection of the Stomach of the Lobster, Homarus Americanus

Bruto Dissectie van de maag van de Kreeft, Homarus Americanus</em

The stomach of the American lobster (Homarus americanus) is located in the cephalothorax, between the rostrum and the cervical groove. The anterior end of ...

Dissection of Organs from the Adult Zebrafish

Dissectie van organen van de Adult zebravis

Over the last 20 years, the zebrafish has become a powerful model organism for understanding vertebrate development and disease.  Although experimental ...

Direct Delivery of MIF Morpholinos Into the Zebrafish Otocyst by Injection and Electroporation Affects Inner Ear Development

Directe levering van MAV Morpholinos Into the zebravis Otocyst door injectie en elektroporatie van invloed op binnenoor Ontwikkeling

In recent years, electroporation has become a popular technique for in vivo transfection of DNA, RNA, and morpholinos into various tissues, including the ...

Dissection of the Adult Zebrafish Kidney

Dissectie van de Adult zebravis Kidney

Researchers working in the burgeoning field of adult stem cell biology seek to understand the signals that regulate the behavior and function of stem ...

Heart Dissection in Larval, Juvenile and Adult Zebrafish, Danio rerio

Heart Dissection in Larval, Juvenile and Adult Zebrafish, Danio rerio

Hart Dissection in larvale, jeugdige en volwassen zebravis, Danio rerio</em

Zebrafish have become a beneficial and practical model organism for the study of embryonic heart development (see recent reviews1-6), however, work ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo Elektroporatie van Morpholinos in de Adult zebravis Retina

Many devastating inherited eye diseases result in progressive and irreversible blindness because humans cannot regenerate dying or diseased retinal ...

Regular Care and Maintenance of a Zebrafish (Danio rerio) Laboratory: An Introduction

Regular Care and Maintenance of a Zebrafish Danio rerio Laboratory: An Introduction

Regelmatige verzorging en onderhoud van een zebravis (<em&gt; Danio rerio</em&gt;) Laboratorium: Een inleiding

This protocol describes regular care and maintenance of a zebrafish laboratory. Zebrafish are now gaining popularity in genetics, pharmacological and ...

In Vivo Modeling of the Morbid Human Genome using Danio rerio

In Vivo Modeling of the Morbid Human Genome using Danio rerio

In vivo modellering van de Morbid Human Genome behulp Danio rerio

Here,  we present methods for the development of assays to query potentially clinically  significant nonsynonymous changes using in  vivo complementation ...

Gavaging Adult Zebrafish

Gavaging Adult zebravis

The zebrafish has become an important in vivo model in biomedical research. Effective methods must be developed and utilized to deliver compounds or ...

High Throughput Danio Rerio Energy Expenditure Assay

High Throughput Danio Rerio Energy Expenditure Assay

High Throughput<em&gt; Danio Rerio</em&gt; Energie Uitgaven Assay

Zebrafish are an important model organism with inherent advantages that have the potential to make zebrafish a widely applied model for the study of ...