Name: gross and fine dissection of inner ear sensory epithelia in adult zebrafish (danio rerio)
Uploaded: 2009-05-08T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Gross and Fine Dissection of Inner Ear Sensory Epithelia in Adult Zebrafish Danio rerio at JoVE.com

Esta investigación fue apoyada por el Programa de Investigación Intramural del National Human Genome Research Institute, National Institutes of Health.

Parte 1: Preparación del tejido <ol><li> La eutanasia de los adultos de pez cebra con buffer MS-222 (el 3-aminobenzoato de sal metanosulfonato, 0,03%). </li><li> Decapitar a los peces. Cortar la mandíbula inferior, colocar la cabeza en el cojín de disección con la cara ventral hacia arriba, e inmovilizar el tejido con alfileres de insectos. Eliminar los tejidos blandos en el cráneo ventral y el crack abrir la parte ventral de la cápsula del cráneo con un par de pinzas finas bajo el microscopio de disección. </...

En este protocolo, que describe la disección fina y gruesa de los epitelios sensoriales del oído interno del pez cebra adulto, que nos permite preparar muestras de tejidos para estudiar las características celulares y subcelulares de los epitelios sensoriales. Con el fin de llevar a cabo una disección de éxito, el primer paso, la fijación, es muy importante. Asegúrese de usar siempre solución de paraformaldehído al recién preparada porque la solución de edad se traducirá en menor...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>MS222 (Ethyl 3-aminobenzoate methanesulfonate salt)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>A5040</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PBS (Phosphate-buffered Saline, 10X)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Mediatech</td>
<td>46-013-CM</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Paraformaldehyde</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>P-6148</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Triton X-100</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>T8787</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Alexa Fluor 488 phalloidin</td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>A12379</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>VECTASHIELD Hard Set Mounting Medium with DAPI</td>
<td>Reagent</td>
<td>Vector Laboratories</td>
<td>H-1500</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dissection microscope</td>
<td>Microscope</td>
<td>Nikon</td>
<td>SMZ1000</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Insect pins</td>
<td>Tool</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>26000-40</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Scissors</td>
<td>Tool</td>
<td>Roboz</td>
<td>RS-5880</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Tweezers</td>
<td>Tool</td>
<td>Roboz</td>
<td>RS-5045</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Needle blade</td>
<td>Tool</td>
<td>Sharpoint</td>
<td>78-6810</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fluorescent microscope</td>
<td>Microscope</td>
<td>Zeiss</td>
<td>Axiovert 200M</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dissection pad</td>
<td>Tool</td>
<td>eNasco</td>
<td>SB07840M</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Zebrafish</td>
<td>Animal</td>
<td>various</td>
<td>n/a</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

gross and fine dissection of inner ear sensory epithelia in adult zebrafish (danio rerio)

Neurosensorial epitelio del oído interno son las estructuras esenciales para las funciones de audición y el equilibrio. Por lo tanto, es importante entender las características celulares y moleculares de los epitelios, que se componen principalmente de dos tipos de células: las células ciliadas (HC) y células de soporte (SC). Aquí elegimos para el estudio de los epitelios sensoriales del oído interno en el pez cebra adulto, no sólo porque las estructuras epiteliales son altamente conservadas en todos los vertebrados estudiados, sino también porque los adultos de pez cebra es capaz de regenerar los HC, una habilidad que los mamíferos pierden poco después del nacimiento. Nosotros usamos el oído interno de adultos de pez cebra como sistema modelo para estudiar los mecanismos de regeneración del oído interno HC en los vertebrados adultos que podrían ser útiles para el tratamiento clínico de la deficiencia auditiva / equilibrio en humanos como resultado de la pérdida de HC. Aquí se demuestra cómo hacer la disección fina y gruesa de los epitelios sensoriales del oído interno en el pez cebra adulto. La disección bruto elimina los tejidos que rodean el oído interno y es de gran ayuda para la preparación de las secciones de tejido, lo que nos permite examinar la estructura detallada de los epitelios sensoriales. La disección fina limpia los tejidos no-sensorial-epitelial del epitelio cada individuo y nos permite examinar la heterogeneidad del epitelio toda facilidad en todo el montaje de muestras epiteliales.

Watch this Scientific Journal Video about Gross and Fine Dissection of Inner Ear Sensory Epithelia in Adult Zebrafish Danio rerio at JoVE.com

Gross and Fine Dissection of Inner Ear Sensory Epithelia in Adult Zebrafish Danio rerio

El epitelio sensorial del oído interno de los adultos de pez cebra es un buen modelo de sistema para la comprensión de los mecanismos de regeneración de las células ciliadas en los vertebrados adultos. Este protocolo demuestra la disección fina de los epitelios, a través del cual podemos obtener muestras de tejido para el estudio de los eventos de regeneración a nivel celular y subcelular.

La disección fina y gruesa de los epitelios sensoriales del oído interno en adultos de pez cebra ( Danio rerio)

Neurosensory epithelia in the inner ear are the crucial structures for hearing and balance functions. Therefore, it is important to understand the ...

Research

JoVE Journal

Biology

Gross and Fine Dissection of Inner Ear Sensory Epithelia in Adult Zebrafish (Danio rerio)

Gross Dissection of the Stomach of the Lobster, Homarus Americanus

Gross Dissection of the Stomach of the Lobster, Homarus Americanus

La disección bruto del estómago de la langosta, Homarus americanus</em

The stomach of the American lobster (Homarus americanus) is located in the cephalothorax, between the rostrum and the cervical groove. The anterior end of ...

Investigación

Biología

Dissection of Organs from the Adult Zebrafish

La disección de los órganos del pez cebra adultos

Over the last 20 years, the zebrafish has become a powerful model organism for understanding vertebrate development and disease.  Although experimental ...

Direct Delivery of MIF Morpholinos Into the Zebrafish Otocyst by Injection and Electroporation Affects Inner Ear Development

Entrega directa de Morpholinos FOMIN Hacia el otocyst pez cebra por inyección y electroporación afecta el desarrollo del oído interno

In recent years, electroporation has become a popular technique for in vivo transfection of DNA, RNA, and morpholinos into various tissues, including the ...

Dissection of the Adult Zebrafish Kidney

La disección del riñón adultos de pez cebra

Researchers working in the burgeoning field of adult stem cell biology seek to understand the signals that regulate the behavior and function of stem ...

Heart Dissection in Larval, Juvenile and Adult Zebrafish, Danio rerio

Heart Dissection in Larval, Juvenile and Adult Zebrafish, Danio rerio

La disección del corazón en las larvas, juveniles y adultos de pez cebra, Danio rerio</em

Zebrafish have become a beneficial and practical model organism for the study of embryonic heart development (see recent reviews1-6), however, work ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

En electroporación in vivo de Morpholinos en la retina de pez cebra adultos

Many devastating inherited eye diseases result in progressive and irreversible blindness because humans cannot regenerate dying or diseased retinal ...

Regular Care and Maintenance of a Zebrafish (Danio rerio) Laboratory: An Introduction

Regular Care and Maintenance of a Zebrafish Danio rerio Laboratory: An Introduction

Cuidado y mantenimiento regulares de un pez cebra (<em&gt; Danio rerio</em&gt;) Laboratorio: Introducción

This protocol describes regular care and maintenance of a zebrafish laboratory. Zebrafish are now gaining popularity in genetics, pharmacological and ...

In Vivo Modeling of the Morbid Human Genome using Danio rerio

In Vivo Modeling of the Morbid Human Genome using Danio rerio

En Vivo Modelado del Genoma Humano Morbid usando Danio rerio

Here,  we present methods for the development of assays to query potentially clinically  significant nonsynonymous changes using in  vivo complementation ...

Gavaging Adult Zebrafish

Gavage adultos de pez cebra

The zebrafish has become an important in vivo model in biomedical research. Effective methods must be developed and utilized to deliver compounds or ...

High Throughput Danio Rerio Energy Expenditure Assay

High Throughput Danio Rerio Energy Expenditure Assay

High Throughput<em&gt; Danio rerio</em&gt; Ensayo gasto energético

Zebrafish are an important model organism with inherent advantages that have the potential to make zebrafish a widely applied model for the study of ...