Name: gross and fine dissection of inner ear sensory epithelia in adult zebrafish (danio rerio)
Uploaded: 2009-05-08T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Gross and Fine Dissection of Inner Ear Sensory Epithelia in Adult Zebrafish Danio rerio at JoVE.com

Denna forskning stöds av Interna forskningsprogram National Human Genome Research Institute, National Institutes of Health.

Del 1: Förberedelser av vävnaden <ol><li> Euthanize den vuxne zebrafisk med buffrad MS-222 (Ethyl 3-aminobenzoate methanesulfonate salt, 0,03%). </li><li> Halshugga fisken. Skär av underkäken, placera huvudet på dissekering pad med den ventrala sidan uppåt och immobilisera vävnaden med insekt stift. Ta bort den mjuka vävnaden ventrala till skallen och spricka öppna den ventrala delen av skallen kapseln med ett par fina pincett under en dissektion mikroskop. </li><li> Fäst fisken huvudet i paraformaldehyd (4%...

I detta protokoll beskrivs vi de grova och fina dissekering av innerörat sensoriska epitel av vuxna zebrafisk, vilket gör att vi kan förbereda vävnadsprov för att studera de cellulära och subcellulära funktioner i sensoriska epitel. För att kunna genomföra en framgångsrik dissektion, det allra första steget, fixering, är mycket viktigt. Se till att du alltid använder nygjord paraformaldehyd lösning eftersom gamla lösningen kommer att resultera i under-fixeringen av vävnader s...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>MS222 (Ethyl 3-aminobenzoate methanesulfonate salt)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>A5040</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PBS (Phosphate-buffered Saline, 10X)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Mediatech</td>
<td>46-013-CM</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Paraformaldehyde</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>P-6148</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Triton X-100</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>T8787</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Alexa Fluor 488 phalloidin</td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>A12379</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>VECTASHIELD Hard Set Mounting Medium with DAPI</td>
<td>Reagent</td>
<td>Vector Laboratories</td>
<td>H-1500</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dissection microscope</td>
<td>Microscope</td>
<td>Nikon</td>
<td>SMZ1000</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Insect pins</td>
<td>Tool</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>26000-40</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Scissors</td>
<td>Tool</td>
<td>Roboz</td>
<td>RS-5880</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Tweezers</td>
<td>Tool</td>
<td>Roboz</td>
<td>RS-5045</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Needle blade</td>
<td>Tool</td>
<td>Sharpoint</td>
<td>78-6810</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fluorescent microscope</td>
<td>Microscope</td>
<td>Zeiss</td>
<td>Axiovert 200M</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dissection pad</td>
<td>Tool</td>
<td>eNasco</td>
<td>SB07840M</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Zebrafish</td>
<td>Animal</td>
<td>various</td>
<td>n/a</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

gross and fine dissection of inner ear sensory epithelia in adult zebrafish (danio rerio)

Neurosensoriska epitel i innerörat är de avgörande strukturer för hörsel och balans funktioner. Därför är det viktigt att förstå den cellulära och molekylära funktioner i epitel, som huvudsakligen består av två typer av celler: hårceller (HCS) och stödjande celler (SCS). Här har vi väljer att studera i innerörat sensoriska epitel hos vuxna zebrafisk inte bara för att de epiteliala strukturer är starkt konservativa i alla studerade ryggradsdjur, men också för att den vuxna zebrafisk kan regenerera HC, en förmåga som däggdjur förlorar strax efter födseln. Vi använder innerörat hos vuxna zebrafisk som modellsystem för att studera mekanismerna bakom innerörat HC förnyelse i vuxen ryggradsdjur som kan vara till hjälp för klinisk behandling av hörsel / balans underskott i mänskligt som ett resultat av HC förlust. Här visar vi hur du gör grova och fina dissektioner av innerörat sensoriska epitel i vuxen zebrafisk. Bruttomarginalen dissektion tar bort vävnad som omger innerörat och är till hjälp för att förbereda vävnadssnitt, som tillåter oss att undersöka den närmare strukturen i sensoriska epitel. Den fina dissektion rensar upp den icke-sensoriska-epitelvävnader för varje enskild epitel och ger oss möjlighet att undersöka heterogenitet av hela epitelet lätt i hela montering epiteliala prover.

Watch this Scientific Journal Video about Gross and Fine Dissection of Inner Ear Sensory Epithelia in Adult Zebrafish Danio rerio at JoVE.com

Gross and Fine Dissection of Inner Ear Sensory Epithelia in Adult Zebrafish Danio rerio

Innerörat sensoriska epitelet av vuxna zebrafisk är en bra modell för att förstå de mekanismer av hår cellförnyelsen i vuxen ryggradsdjur. Detta protokoll visar fina dissekering av epitel, genom vilken vi kan få vävnadsprover för att studera regenerativ händelserna på cellulär och subcellulära nivåer.

Gross och Fine dissekering av Inner Ear Sensorisk epitel i Vuxen Zebrafish ( Danio rerio)

Neurosensory epithelia in the inner ear are the crucial structures for hearing and balance functions. Therefore, it is important to understand the ...

Research

JoVE Journal

Biology

Gross and Fine Dissection of Inner Ear Sensory Epithelia in Adult Zebrafish (Danio rerio)

Gross Dissection of the Stomach of the Lobster, Homarus Americanus

Gross Dissection of the Stomach of the Lobster, Homarus Americanus

Gross Dissection i magen av Hummer, Homarus americanus</em

The stomach of the American lobster (Homarus americanus) is located in the cephalothorax, between the rostrum and the cervical groove. The anterior end of ...

Dissection of Organs from the Adult Zebrafish

Dissektion av organ från vuxna Zebrafish

Over the last 20 years, the zebrafish has become a powerful model organism for understanding vertebrate development and disease.  Although experimental ...

Direct Delivery of MIF Morpholinos Into the Zebrafish Otocyst by Injection and Electroporation Affects Inner Ear Development

Direkt Leverans av MIF Morpholinos Into the Zebrafish Otocyst med injektion och elektroporation Påverkar Inner Ear utveckling

In recent years, electroporation has become a popular technique for in vivo transfection of DNA, RNA, and morpholinos into various tissues, including the ...

Dissection of the Adult Zebrafish Kidney

Dissekering av vuxna Zebrafish Kidney

Researchers working in the burgeoning field of adult stem cell biology seek to understand the signals that regulate the behavior and function of stem ...

Heart Dissection in Larval, Juvenile and Adult Zebrafish, Danio rerio

Heart Dissection in Larval, Juvenile and Adult Zebrafish, Danio rerio

Hjärta Dissection i Larvernas, unga och vuxna Zebrafish, Danio rerio</em

Zebrafish have become a beneficial and practical model organism for the study of embryonic heart development (see recent reviews1-6), however, work ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo elektroporering av Morpholinos i Adult Zebrafish Retina

Many devastating inherited eye diseases result in progressive and irreversible blindness because humans cannot regenerate dying or diseased retinal ...

Regular Care and Maintenance of a Zebrafish (Danio rerio) Laboratory: An Introduction

Regular Care and Maintenance of a Zebrafish Danio rerio Laboratory: An Introduction

Regelbunden skötsel och underhåll av en zebrafisk (<em&gt; Danio rerio</em&gt;) Laboratorium: En introduktion

This protocol describes regular care and maintenance of a zebrafish laboratory. Zebrafish are now gaining popularity in genetics, pharmacological and ...

In Vivo Modeling of the Morbid Human Genome using Danio rerio

In Vivo Modeling of the Morbid Human Genome using Danio rerio

In Vivo Modellering av Morbid Human Genome hjälp Danio rerio

Here,  we present methods for the development of assays to query potentially clinically  significant nonsynonymous changes using in  vivo complementation ...

Gavaging Adult Zebrafish

Gavaging vuxna zebrafisk

The zebrafish has become an important in vivo model in biomedical research. Effective methods must be developed and utilized to deliver compounds or ...

High Throughput Danio Rerio Energy Expenditure Assay

High Throughput Danio Rerio Energy Expenditure Assay

Hög genomströmning<em&gt; Danio rerio</em&gt; Energi Utgifter analys

Zebrafish are an important model organism with inherent advantages that have the potential to make zebrafish a widely applied model for the study of ...