Name: a high-throughput method to globally study the organelle morphology in s. cerevisiae
Uploaded: 2009-03-02T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A high-throughput method to globally study the organelle morphology in S. cerevisiae at JoVE.com

<p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> وأيد هذا العمل عن طريق التكنولوجيا الحيوية والعلوم البيولوجية مجلس البحوث (منحة 31/C15982) ، والمعاهد الكندية للأبحاث الصحية ، والمؤسسة الكندية للإبداع ، ومعارف كولومبيا البريطانية صندوق التنمية ، ومؤسسة مايكل سميث للبحوث الصحية (منحة لCJR لوين) ، والكفاح من أجل البصر. </p>

<p class="jove_title" style=";text-align:right;direction:rtl"> المواد والأساليب : </p><ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> سلالات الخميرة : <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ولدت محطة C - GFP العنونة من Acp1 قبل إعادة التركيب مثلي PCR بوساطة استخدام البلازميد pKT128 (يحتوي على <em>وHIS5</em> GFP) : Acp1 - GFP (GFP : : صاحب). وتأكدت tran...

<ol>
	<li>Amberg, D. C., Burke, D., Strathern, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> <em style='font-style: italic'>Methods in yeast genetics : a Cold Spring Harbor Laboratory course manual</em>. , (2005).</li><li>Tong, A. H., Boone, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthetic+genetic+array+analysis+in+Saccharomyces+cerevisiae.">Synthetic genetic array analysis in Saccharomyces cerevisiae.</a> <em style='font-style: italic'>Methods Mol Biol</em>. <b>313</b>, 171-192 (2006).</li></ol>

<p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> هذا الأسلوب يمكن أن تساعد بشكل فعال إدراج علامة الميتوكوندريا ، Acp1 - GFP متحولة إلى خلفيات مختلفة. فهو يعتمد على استخدام نظام الروبوتية ، ويمكن اعتمادها بسهولة للاستخدام مع أي نظام الروبوتية. ويمكن أيضا استخدام هذا الإجراء لإدراج أنواع أخرى من علامات. على سبيل المثال ،...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>SGA media</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>The growth media (YPD) and synthetic dropout media (SD) including LRK and LHRK, and enriched sporulation media used in this protocol is routinely used in yeast molecular biology. Please refer to Methods in Yeast (Amberg et al., 2005) for detailed descriptions.</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

a high-throughput method to globally study the organelle morphology in s. cerevisiae

<p class="jove_content">الإنتاجية العالية لدراسة أساليب توطين البروتين أو التشكل عضية هو أداة فعالة لدراسة التفاعلات بين البروتينات ويمكن أن تساعد في تحقيق فهم شامل للمسارات الجزيئية. السكيراء في البيرة ، مع تطوير مجموعة الجينات الحذف غير الضرورية ، لا يمكننا على الصعيد العالمي في دراسة مورفولوجية العضيات المختلفة مثل شبكية هيولي باطني (ER) وGFP الميتوكوندريا باستخدام (أو متغير) ، علامات في الجينات خلفيات مختلفة. ومع ذلك ، تتضمن علامات GFP الطافرة في كل واحد هو عملية فردية كثيفة العمالة. هنا ، نحن وصف الإجراء الذي يستخدم عادة في المختبرات لدينا. باستخدام نظام الروبوتية للتعامل مع المصفوفات الخميرة ذات الكثافة السكانية العالية وتقنيات اختيار المخدرات ، يمكننا تقصير كبير في الوقت المطلوب وتحسين استنساخ. باختصار ، نحن نعبر علامة GFP الموسومة الميتوكوندريا (Apc1 - GFP) لمجموعة ذات الكثافة العالية من غير الضرورى 4672 المسوخ حذف الجينات التي تعلق نسخة الروبوتية. من خلال اختيار ضعفاني الإنبات ، تبوغ والمزدوجة الانتخاب ، نستعيد كل من الأليلات. نتيجة لذلك ، كل واحد يحتوي على متحولة فرداني Apc1 - GFP أدرجت في مكان به الجيني. الآن ، يمكننا دراسة مورفولوجية الميتوكوندريا في جميع الخلفية غير الضرورية متحولة. باستخدام هذا النهج الإنتاجية العالية ، ويمكننا بسهولة دراسة ورسم المسارات والجينات المشاركة في الميراث وتشكيل العضيات في وضع الخريطة الوراثية البشرية ككل.</p>

Watch this Scientific Journal Video about A high-throughput method to globally study the organelle morphology in S. cerevisiae at JoVE.com

A high-throughput method to globally study the organelle morphology in S. cerevisiae

<p class="jove_content">وتستخدم على نطاق واسع GFP الانصهار البروتينات لتصور العضيات بواسطة الفحص المجهري متحد البؤر. ومع ذلك ، الكشف عن الطفرات التي تؤثر في التشكل من العضيات يتطلب عموما الطفرات الفردية وقتا طويلا. هنا ، علينا أن نظهر وسيلة لدمج عضية في وقت واحد ، في GFP علامات الجينات غير الضرورية في 5000 ما يقرب من الخميرة.</p>

أسلوب الإنتاجية العالية عالميا لدراسة مورفولوجية عضية في البيرة س.

High-throughput methods to examine protein localization or organelle morphology is an effective tool for studying protein interactions and can help ...

Research

JoVE Journal

Biology

Assay for Adhesion and Agar Invasion in S. cerevisiae

مقايسة للالتصاق وغزو آجار في البيرة س.

Yeasts are found in natural biofilms, where many microorganisms colonize surfaces. In artificial environments, such as surfaces of man-made objects, ...

Testing Visual Sensitivity to the Speed and Direction of Motion in Lizards

اختبار الحساسية البصرية للسرعة واتجاه الحركة في السحالي

Testing visual sensitivity in any species provides basic information regarding behaviour, evolution, and ecology. However, testing specific features of ...

Identification of protein complexes with quantitative proteomics in S. cerevisiae

تحديد بروتين المجمعات مع كمية البروتينات في البيرة س.

Lipids are the building blocks of cellular membranes that function as barriers and in compartmentalization of cellular processes, and recently, as ...

Hi-C: A Method to Study the Three-dimensional Architecture of Genomes.

مرحبا - C : طريقة لدراسة الهندسة المعمارية ثلاثي الأبعاد للخريطة جينوم.

The three-dimensional folding of chromosomes compartmentalizes the genome and and can bring distant functional elements, such as promoters and enhancers, ...

A High Throughput <em>in situ</em> Hybridization Method to Characterize mRNA Expression Patterns in the Fetal Mouse Lower Urogenital Tract

A High Throughput in situ Hybridization Method to Characterize mRNA Expression Patterns in the Fetal Mouse Lower Urogenital Tract

إنتاجية عالية<em> في الموقع</em> أسلوب التهجين لتوصيف أنماط التعبير مرنا في الفأر الجنينية السفلى المسالك البولي التناسلي

Development of the lower urogenital tract (LUT) is an intricate process. This complexity is evidenced during formation of the prostate from the fetal male ...

Studying Age-dependent Genomic Instability using the <em>S. cerevisiae</em> Chronological Lifespan Model

Studying Age-dependent Genomic Instability using the S. cerevisiae Chronological Lifespan Model

دراسة السن التي تعتمد على عدم الاستقرار الجيني باستخدام<em> س. خميرة</em> يفسبن الزمني النموذجي

Studies using the Saccharomyces cerevisiae aging model have uncovered life span regulatory pathways that are partially conserved in higher eukaryotes1-2. ...

Flow Cytometry-based Purification of <em>S. cerevisiae</em> Zygotes

Flow Cytometry-based Purification of S. cerevisiae Zygotes

تدفق الخلوي على أساس تنقية<em&gt; S. خميرة</em&gt; بيضات ملقحة

Zygotes are essential intermediates between haploid and diploid states in the life cycle of many organisms, including yeast (Figure 1) 1. S. cerevisiae ...

Flow Cytometric Analysis of Bimolecular Fluorescence Complementation: A High Throughput Quantitative Method to Study Protein-protein Interaction

تدفق تحليل Cytometric من التكملة الإسفار ثنائي الجزيء: عالية الإنتاجية الأسلوب الكمي لدراسة التفاعل البروتين البروتين

Among methods to study protein-protein interaction inside cells, Bimolecular Fluorescence Complementation (BiFC) is relatively simple and sensitive. BiFC ...

High-throughput Image Analysis of Tumor Spheroids: A User-friendly Software Application to Measure the Size of Spheroids Automatically and Accurately

عالية الإنتاجية تحليل صورة الأجسام الشبه الكروية ورم: A برمجيات صديقة للمستخدم التطبيق لقياس حجم الأجسام الشبه الكروية تلقائيا وبدقة

The increasing number of applications of three-dimensional (3D) tumor spheroids as an in vitro model for drug discovery requires their adaptation to ...

High-throughput Screening for Chemical Modulators of Post-transcriptionally Regulated Genes

الإنتاجية العالية للكشف عن المغيرون الكيميائية من الجينات المشاركة ما بعد transcriptionally الخاضعة للرقابة

Both transcriptional and post-transcriptional regulation have a profound impact on genes expression. However, commonly adopted cell-based screening assays ...