Name: measuring plant cell wall extension (creep) induced by acidic ph and by alpha-expansin
Uploaded: 2009-03-11T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measuring Plant Cell Wall Extension Creep Induced by Acidic pH and by Alpha-Expansin at JoVE.com

Las técnicas que se muestran aquí fueron desarrollados con financiación de subvenciones del Departamento de Energía (Ciencias de la Bioenergía) y la Fundación Nacional de Ciencias.

Parte 1: Crecimiento y el almacenamiento de material vegetal adecuado <ol><li> En nuestra experiencia, hipocotilos jóvenes de plántulas de pepino etioladas servir como una fuente conveniente de material de la pared celular de estos experimentos. Las semillas de pepino se siembran en papel mojado en una caja a prueba de luz, que es mantener en un armario oscuro en una sala a temperatura constante fijado en 26 ° C. La temperatura exacta no es crítica, ya que cualquier cosa entre 22 ° y 30 ° C debe estar bien, pero...

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	<li>Cosgrove, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+long-term+extension+of+isolated+cell+walls+from+growing+cucumber+hypocotyls.">Characterization of long-term extension of isolated cell walls from growing cucumber hypocotyls.</a> Planta. 177, 121-130 (1989).</li><li>Rayle, D. L., Cleland, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Acid+Growth+Theory+of+auxin-induced+cell+elongation+is+alive+and+well.">The Acid Growth Theory of auxin-induced cell elongation is alive and well.</a> Plant Physiol. 99, 1271-1274 (1992).</li><li>Cleland, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Auxin-induced+growth+of+Avena+coleoptiles+involves+two+mechanisms+with+different+pH+optima.">Auxin-induced growth of Avena coleoptiles involves two mechanisms with different pH optima.</a> Plant Physiol. 99, 1556-1561 (1992).</li><li>Cosgrove, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Loosening+of+plant+cell+walls+by+expansins.">Loosening of plant cell walls by expansins.</a> Nature. 407, 321-326 (2000).</li><li>McQueen-Mason, S., Durachko, D. M., Cosgrove, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two+endogenous+proteins+that+induce+cell+wall+expansion+in+plants.">Two endogenous proteins that induce cell wall expansion in plants.</a> Plant Cell. 4, 1425-1433 (1992).</li></ol>

Para esta demostración se utilizó las paredes celulares de hipocotilos de pepino, ya que han demostrado ser una fuente confiable de las muestras de la pared que son fáciles de manejar y que responden con buena sensibilidad. También hemos tenido mucho éxito con las paredes de las plántulas, así como otros materiales de algunos de los supermercados, tales como hojas de espinacas jóvenes y tallos de apio. Básicamente, el joven, suave y rápido crecimiento de los tejidos vegetales es probable que sean fáciles de m...

measuring plant cell wall extension (creep) induced by acidic ph and by alpha-expansin

Cada vez las paredes celulares vegetales típicamente presentan una propiedad conocida como &quot;el crecimiento de ácido, por lo que entendemos que es más extensible a un pH bajo (&lt;5) 1. La hormona auxina planta rápidamente estimula la elongación celular en los tallos jóvenes y los tejidos similares al menos en parte por un mecanismo ácido-crecimiento del 2, 3. Auxina activa una bomba de H + en la membrana plasmática, provocando la acidificación de la solución de la pared celular. La acidificación de la pared activa expansins, que son endógena de desprendimiento de la pared de las proteínas 4, haciendo que la pared celular a ceder a las tensiones creadas por la presión de la pared celular de turgencia. Como resultado, la célula comienza a crecer rápidamente. Este fenómeno de crecimiento de ácido &#39;se mide fácilmente en el aislamiento (no vivos) muestras de la pared celular. La capacidad de las paredes de las células a sufrir inducida por el ácido de extensión no es simplemente el resultado de la disposición estructural de los polisacáridos de la pared celular (pectinas, por ejemplo), pero depende de la actividad de expansins 5. Expansinas no tienen actividad enzimática conocida y la única manera de ensayo para la actividad expansina es medir su inducción de la extensión de la pared celular. Este informe de detalles del vídeo de las fuentes y técnicas de preparación para la obtención de materiales adecuados para los ensayos de la pared expansina y pasa a mostrar inducida por el ácido de extensión y expansina inducida por la extensión de las muestras de la pared preparada a partir de hipocotilos de pepino en crecimiento. Para obtener muestras adecuadas de la pared celular, las plántulas de pepino se cultiva en la oscuridad, los hipocotilos se cortan y se congelan a -80 ° C. Hipocotilos congelados son desgastado, aplastado, y sujeta a una tensión constante en una cubeta especial para la medición del extensómetro. Para medir la inducida por el ácido de extensión, las paredes están inicialmente tamponada a pH neutro, lo que resulta en una baja actividad de expansins que son componentes de las paredes celulares de origen. Tras el intercambio de buffer de pH ácido, expansins se activan y las paredes celulares se extienden rápidamente. También demuestran una actividad expansina en un ensayo de reconstitución. Para esta parte, se utiliza un tratamiento térmico breve para desnaturalizar el expansins nativos en las muestras de la pared celular. Estas paredes de las células inactivadas no se dan incluso en tampón ácido, pero la adición de expansins de las paredes celulares rápidamente recupera su capacidad de extender.

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Measuring Plant Cell Wall Extension Creep Induced by Acidic pH and by Alpha-Expansin

Se demuestra el uso de un extensómetro de fuerza constante a medida a largo plazo de extensión (fluencia) de especímenes de plantas de la pared celular inducida por tampones ácidos y proteínas expansina.

Celda de medición Planta de Extensión de la pared (creep) inducida por el pH ácido y por Alfa-expansina

Growing plant cell walls characteristically exhibit a property known as 'acid growth', by which we mean they are more extensible at low pH (&lt; 5) 1. The ...

Research

JoVE Journal

Biology

Measuring Plant Cell Wall Extension (Creep) Induced by Acidic pH and by Alpha-Expansin

Title Cell Encapsulation by Droplets

Título encapsulación celular a través de gotitas

Investigación

Biología

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Inducida por el virus de silenciamiento génico (VIGS) en Nicotiana benthamiana Y tomate

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Glycan Profiling of Plant Cell Wall Polymers using Microarrays

Perfiles de Polímeros Glycan la pared celular vegetal utilizando microarrays

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Isolation of Native Soil Microorganisms with Potential for Breaking Down Biodegradable Plastic Mulch Films Used in Agriculture

El aislamiento de los microorganismos del suelo nativo con potencial para romper biodegradables Mantillo películas de plástico utilizados en la agricultura

Fungi native to agricultural soils that colonized commercially available biodegradable mulch (BDM) films were isolated and assessed for potential to ...

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

En Vivo Tracking 4-Dimensional de madre hematopoyéticas y células progenitoras en ratones adultos de calota de Médula Ósea

Through a delicate balance between quiescence and proliferation, self renewal and production of differentiated progeny, hematopoietic stem cells (HSCs) ...

Fecal Glucocorticoid Analysis: Non-invasive Adrenal Monitoring in Equids

Análisis de glucocorticoides fecales: Monitoreo suprarrenal no invasiva en los équidos

Adrenal activity can be assessed in the equine species by analysis of feces for corticosterone metabolites. During a potentially aversive situation, ...

High Resolution Quantification of Crystalline Cellulose Accumulation in Arabidopsis Roots to Monitor Tissue-specific Cell Wall Modifications

High Resolution Quantification of Crystalline Cellulose Accumulation in Arabidopsis Roots to Monitor Tissue-specific Cell Wall Modifications

Alta resolución Cuantificación de celulosa cristalina acumulación en<em&gt; Arabidopsis</em&gt; Las raíces para monitorear la célula específica de tejido de pared Modificaciones

Plant cells are surrounded by a cell wall, the composition of which determines their final size and shape. The cell wall is composed of a complex matrix ...