Name: measuring plant cell wall extension (creep) induced by acidic ph and by alpha-expansin
Uploaded: 2009-03-11T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measuring Plant Cell Wall Extension Creep Induced by Acidic pH and by Alpha-Expansin at JoVE.com

De tekniker som visas här har utvecklats med finansiering genom bidrag från Department of Energy (Bioenergi Sciences) och National Science Foundation.

Del 1: Odling och lagring lämpligt växtmaterial <ol><li> Vår erfarenhet är att unga hypocotyls från etiolated gurka plantor tjäna som en bekväm källa cellvägg material för dessa experiment. Gurka frön sås på vått papper i en ljus-låda, som håller i ett mörkt skåp i en konstant temperatur rum inställd på 26 ° C. Den exakta temperaturen är inte kritisk, eftersom allt mellan 22 ° och 30 ° C ska vara bra, men temperaturen kommer att avgöra hur snabbt plantorna nå en lämplig utvecklingsstadium. J...

<ol>
	<li>Cosgrove, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+long-term+extension+of+isolated+cell+walls+from+growing+cucumber+hypocotyls.">Characterization of long-term extension of isolated cell walls from growing cucumber hypocotyls.</a> Planta. 177, 121-130 (1989).</li><li>Rayle, D. L., Cleland, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Acid+Growth+Theory+of+auxin-induced+cell+elongation+is+alive+and+well.">The Acid Growth Theory of auxin-induced cell elongation is alive and well.</a> Plant Physiol. 99, 1271-1274 (1992).</li><li>Cleland, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Auxin-induced+growth+of+Avena+coleoptiles+involves+two+mechanisms+with+different+pH+optima.">Auxin-induced growth of Avena coleoptiles involves two mechanisms with different pH optima.</a> Plant Physiol. 99, 1556-1561 (1992).</li><li>Cosgrove, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Loosening+of+plant+cell+walls+by+expansins.">Loosening of plant cell walls by expansins.</a> Nature. 407, 321-326 (2000).</li><li>McQueen-Mason, S., Durachko, D. M., Cosgrove, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two+endogenous+proteins+that+induce+cell+wall+expansion+in+plants.">Two endogenous proteins that induce cell wall expansion in plants.</a> Plant Cell. 4, 1425-1433 (1992).</li></ol>

För denna demonstration använde vi cellväggar från gurka hypocotyls eftersom de har visat sig vara en pålitlig källa för vägg prover som är lätta att hantera och som svarar med god känslighet. Vi har också haft god framgång med väggar från andra plantor samt en del material från stormarknaden, till exempel unga spenat blad och stjälkar selleri. I grund och botten, ung, mjukt, snabbt växande växt vävnader är troligt att de lätt mätas med denna teknik, men tuffa, äldre, oxiderade eller nongrowing p...

measuring plant cell wall extension (creep) induced by acidic ph and by alpha-expansin

Växande plantan cellväggar uppvisar karakteristiskt en fastighet som kallas &quot;sura tillväxt&quot;, med vilket vi menar de är mer utbyggbar vid lågt pH (&lt;5) 1. Anläggningen hormonet auxin stimulerar snabbt cell förlängningen i unga stjälkar och liknande vävnader åtminstone delvis av en syra-tillväxt mekanism 2, 3. Auxin aktiverar en H + pump i plasmamembranet, vilket leder till försurning av cellväggen lösningen. Wall försurning aktiverar expansins, som är endogena cellväggen-lossa proteiner 4, vilket gör cellväggen att ge på väggen spänningar som skapas av cellen saftspänningen. Som ett resultat börjar cellen att förstora snabbt. Denna &quot;sura tillväxt&quot; Fenomenet är lätt mäts i isolerade (icke-levande) exemplar cellvägg. Förmåga cellväggar att genomgå sura-inducerad förlängning är inte bara ett resultat av den strukturella placeringen av polysackarider cellväggen (t.ex. pektiner), men beror på den aktivitet expansins 5. Expansins inte har någon känd enzymatisk aktivitet och det enda sättet att assay för expansin verksamhet är att mäta deras induktion av cellvägg förlängning. Denna video rapport redovisar källor och tekniker förberedelse för att få ett passande väggmaterial för expansin analyser och fortsätter att visa sura-inducerad förlängning och expansin-inducerad förlängning av vägg prov som har beretts från att växa gurka hypocotyls. För att få lämpliga prover cellväggen, gurka plantor odlas i mörker, är hypocotyls klippa och frysas vid -80 ° C. Frysta hypocotyls är skadad, stryks ut, och sedan spänns fast med konstant spänning i en speciell kyvett för tensiometer mätningar. För att mäta syra-inducerad förlängning, är väggarna initialt buffrade vid neutralt pH, vilket resulterar i låga aktivitet expansins som är delar av den infödda cellväggar. När bufferten utbyte till surt pH-värde, är expansins aktiveras och cellväggarna förlänga snabbt. Vi visar också expansin verksamhet i en beredning analys. För denna del använder vi en kort värmebehandling för att denaturera infödda expansins i cellväggen prover. Dessa inaktiverat cellväggar sträcker sig inte ens i sura buffert, men tillägg av expansins att cellväggarna snabbt återställer deras förmåga att förlänga.

Watch this Scientific Journal Video about Measuring Plant Cell Wall Extension Creep Induced by Acidic pH and by Alpha-Expansin at JoVE.com

Measuring Plant Cell Wall Extension Creep Induced by Acidic pH and by Alpha-Expansin

Vi visar användandet av en konstant kraft tensiometer att mäta långsiktiga förlängning (krypning) av vägg växtcell exemplar induceras av sura buffertar och expansin protein.

Mätning Plant Cell Wall Extension (Creep) induceras av surt pH-värde och Alpha-Expansin

Growing plant cell walls characteristically exhibit a property known as 'acid growth', by which we mean they are more extensible at low pH (&lt; 5) 1. The ...

Research

JoVE Journal

Biology

Measuring Plant Cell Wall Extension (Creep) Induced by Acidic pH and by Alpha-Expansin

Title Cell Encapsulation by Droplets

Titel Cell Inkapsling av Droppar

Virus-induced Gene Silencing (VIGS) in Nicotiana benthamiana and Tomato

Virus-induced Gene Silencing VIGS in Nicotiana benthamiana and Tomato

Virus-inducerad geners uttryck (VIGS) i Nicotiana benthamiana Och Tomat

RNA interference (RNAi) is a highly specific gene-silencing phenomenon triggered by dsRNA1. This silencing mechanism uses two major classes of RNA ...

Identification of Growth Inhibition Phenotypes Induced by Expression of Bacterial Type III Effectors in Yeast

Identifiering av fenotyper tillväxthämning orsakad av Redovisning av Bakterie Typ III Effektenheter i jäst

Many Gram-negative pathogenic bacteria use a type III secretion system to translocate a suite of effector proteins into the cytosol of host cells. Within ...

Agar-Block Microcosms for Controlled Plant Tissue Decomposition by Aerobic Fungi

Agar-Block mikrokosmos för kontrollerad växtvävnad Nedbrytning av Aerobic Svampar

The two principal methods for studying fungal biodegradation of lignocellulosic plant tissues were developed for wood preservative testing (soil-block; ...

Pouring and Running a Protein Gel by reusing Commercial Cassettes

Hälla och köra ett protein Gel genom att återanvända Commercial Kassetter

The evaluation of proteins using sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) analysis is a common technique used by biochemistry ...

Glycan Profiling of Plant Cell Wall Polymers using Microarrays

Glykan Profilering av växtcellväggnedbrytande Polymerer med Microarrays

Plant cell walls are complex matrixes of heterogeneous glycans which play an important role in the physiology and development of plants and provide the ...

Isolation of Native Soil Microorganisms with Potential for Breaking Down Biodegradable Plastic Mulch Films Used in Agriculture

Isolering av befintliga jorden Mikroorganismer med potential för Breaking Down Biologiskt nedbrytbara plast kompost filmer som används i jordbruk

Fungi native to agricultural soils that colonized commercially available biodegradable mulch (BDM) films were isolated and assessed for potential to ...

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

In Vivo 4-Dimensional Spårning av Hematopoietic Stem och stamceller i vuxen mus calvarial Benmärg

Through a delicate balance between quiescence and proliferation, self renewal and production of differentiated progeny, hematopoietic stem cells (HSCs) ...

Fecal Glucocorticoid Analysis: Non-invasive Adrenal Monitoring in Equids

Fekal Glukokortikoid Analys: Icke-invasiv Adrenal Övervakning av equids

Adrenal activity can be assessed in the equine species by analysis of feces for corticosterone metabolites. During a potentially aversive situation, ...

High Resolution Quantification of Crystalline Cellulose Accumulation in Arabidopsis Roots to Monitor Tissue-specific Cell Wall Modifications

High Resolution Quantification of Crystalline Cellulose Accumulation in Arabidopsis Roots to Monitor Tissue-specific Cell Wall Modifications

Högupplöst Kvantifiering av kristallin cellulosa Ackumulering i<em&gt; Arabidopsis</em&gt; Roots att övervaka Vävnadsspecifik cellvägg Ändringar

Plant cells are surrounded by a cell wall, the composition of which determines their final size and shape. The cell wall is composed of a complex matrix ...