Name: mouse mammary epithelial cells form mammospheres during lactogenic differentiation
Uploaded: 2009-10-06T16:30:00
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<p class="jove_content"> Fondos de el Congreso de Investigación Médica Dirigida subvención del Fondo (DAMD17-01-0264) a ML Cutler y militar de Estados Unidos Instituto de Cáncer de ML Cutler apoyó el trabajo. </p>

<ol><li> El HC11 células fueron cultivadas hasta confluencia durante 6 días en medio RPMI 1640 suplementado con suero bovino fetal al 10%, insulina 5μg/ml, HEPES 10 mM, el factor de 10ng/ml crecimiento epidérmico (EGF) la debida competencia. </li><li> Las células fueron lavadas con PBS y se mantiene en los medios de crecimiento sin EGF durante 24 horas. </li><li> Para inducir la diferenciación lactogénica las células fueron incubadas en medio de diferenciación, es decir, RPMI con dexametasona (10 <sup>-6</sup> M), insulina (5 mg / ml) ...

<ol>
	<li>Blatchford, D. R., Hendry, K. A., Turner, M. D., Burgoyne, R. D., Wilde, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vectorial+secretion+by+constitutive+and+regulated+secretory+pathways+in+mammary+epithelial+cells.">Vectorial secretion by constitutive and regulated secretory pathways in mammary epithelial cells.</a> <em style='font-style: italic'>Epithelial Cell Biol</em>. <b>4</b>, 8-16 (1995).</li><li>Wang, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glucocorticoid+induced+expression+of+connective+tissue+growth+factor+contributes+to+lactogenic+differentiation+of+mouse+mammary+epithelial+cells.">Glucocorticoid induced expression of connective tissue growth factor contributes to lactogenic differentiation of mouse mammary epithelial cells.</a> <em style='font-style: italic'>J Cell Physiol</em>. <b>214</b>, 38-46 (2008).</li></ol>

<p class="jove_content"> Para que esta técnica tenga éxito y sea de la mejor calidad, las células epiteliales se debe mantener en la confluencia antes de ser inducido con hormonas lactogénica. Puede haber situaciones en las que se mammospheres numerosas, lo que hace difícil la cuantificación. Por lo tanto, a efectos cuantitativos, es mejor para fotografiar el mammospheres en un punto de tiempo cuando el número de mammospheres es capaz de ser contados. </p><p class="jove_content"> Si bien existen diversos marcadores moleculares para deter...

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		<div>
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		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>RPMI</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>21870076</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fetal Bovine Serum</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Atlanta Biologicals</td>
<td>S11550</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>L-Glutamine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Gibco</td>
<td>25030</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PenStrep</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Gibco</td>
<td>15140</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Hepes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Quality Biologicals</td>
<td>118089060</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>EGF</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>E9644</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Insulin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Gibco</td>
<td>12585-014</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dexamethasone</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>D1756</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Microscope</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Olympus</td>
<td>IX71</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Digital Camera</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>QImaging</td>
<td>Retiga 2000RV Fast 1394</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

mouse mammary epithelial cells form mammospheres during lactogenic differentiation

<p class="jove_content">A medida fenotípica comúnmente utilizado para determinar el grado de diferenciación en lactogénica mamario de ratón cultivos de células epiteliales es la formación de estructuras en forma de cúpula de la célula conocida como mammospheres<sup&gt; 1</sup&gt;. La línea celular HC11 ha sido empleado como un sistema modelo para el estudio de la regulación de la diferenciación mamaria lactogénica tanto<em&gt; In vitro</em&gt; Y<em&gt; In vivo</em<sup&gt; 2</sup&gt;. El HC11 células se diferencian y sintetizar las proteínas de la leche en respuesta al tratamiento con hormonas lactogénica. Tras el crecimiento de la HC11 ratón las células epiteliales mamarias a la confluencia, la diferenciación lactogénica fue inducida por la adición de una combinación de hormonas lactogénica incluyendo la dexametasona, insulina y prolactina, que se refiere a disminuir a medida. El HC11 células inducidas a diferenciarse fueron fotografiados, a veces hasta 120 horas después de la inducción de la diferenciación y el número de mammospheres que aparecieron en cada cultura se enumeran. El tamaño de la mammospheres individuo se correlaciona con el grado de diferenciación y esto se muestra en las imágenes de la diferenciación de las células.</p>

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Mouse Mammary Epithelial Cells form Mammospheres During Lactogenic Differentiation

<p class="jove_content">HC11 diferenciación lactogénica se caracteriza por la formación de estructuras abovedadas conocida como mammospheres. Las estructuras se pueden enumerar por microscopía de contraste de fases para ayudar en la cuantificación de la diferenciación lactogénica.</p>

Células epiteliales mamarias de ratón forma Mammospheres durante la diferenciación lactogénica

A phenotypic measure commonly used to determine the degree of lactogenic differentiation in mouse mammary epithelial cell cultures is the formation of ...

Research

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Biology

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