Name: standardized preparation of single-cell suspensions from mouse lung tissue using the gentlemacs dissociator
Uploaded: 2009-07-02T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Standardized Preparation of Single-Cell Suspensions from Mouse Lung Tissue using the gentleMACS Dissociator at JoVE.com

<p class="jove_content"> Авторы являются сотрудниками Miltenyi Biotec GmbH, Германия. </p>

<p class="jove_content"> Для работы в стерильных условиях, то рекомендуется выполнять все шаги в ламинарном боксе. </p><p class="jove_title"> 1. Материалы </p><ol><li> HEPES буфера: 10 мМ HEPES-NaOH рН 7,4, 150 мМ NaCl, 5 мМ KCl, 1 мМ MgCl <sub>2,</sub> 1,8 мМ CaCl <sub>2)</sub> </li><li> Коллагеназа D решение: Коллагеназа D: 100 мг / мл (коллагеназы D&gt; 0,15 ЕД / мг), в HEPES буфере </li...

<ol>
	<li>Swanson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flt3-Ligand,+IL-4,+GM-CSF,+and+Adherence-Mediated+Isolation+of+Murine+Lung+Dendritic+Cells:+Assessment+of+Isolation+Technique+on+Phenotype+and+Function.">Flt3-Ligand, IL-4, GM-CSF, and Adherence-Mediated Isolation of Murine Lung Dendritic Cells: Assessment of Isolation Technique on Phenotype and Function.</a> <em style='font-style: italic'>J. Immunol</em>. <b>173</b>, 4875-4881 (2004).</li><li>Vermaelen, K., Pauwels, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accurate+and+simple+discrimination+of+mouse+pulmonary+dendritic+cell+and+macrophage+populations+by+flow+cytometry:+Methodology+and+new+insights.">Accurate and simple discrimination of mouse pulmonary dendritic cell and macrophage populations by flow cytometry: Methodology and new insights.</a> <em style='font-style: italic'>Cytometry Part A</em>. <b>61A</b>, 170-177 (2004).</li></ol>

<p class="jove_content"> В этом видео, мы вводим новый метод диссоциации легочной ткани мыши. Мы показали, что сочетание механических и ферментативных лечения легочной ткани дали высокий процент жизнеспособных лейкоцитов и эндотелиальных клеток. В частности, механические распада тканей было достигнуто за сч?...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>C Tubes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Miltenyi Biotec</td>
<td>Order no. 130-093-237</td>
<td><a href="http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_709_765_gentleMACS_C_Tubes.aspx">http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_709_765_gentleMACS_C_Tubes.aspx</a></td>
</tr>
<tr>
<td>gentleMACS&#x2122; Starting Kit</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Miltenyi Biotec</td>
<td>Order no. 130-093-235</td>
<td><a href="http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_709_763_gentleMACS_Dissociator.aspx">http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_709_763_gentleMACS_Dissociator.aspx</a></td>
</tr>
<tr>
<td>MACSmix&#x2122; Tube Rotator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Miltenyi Biotec</td>
<td>Order no. 130-090-753</td>
<td><a href="http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_34_251_MACSmix_Tube_Rotator.aspx">http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_34_251_MACSmix_Tube_Rotator.aspx</a></td>
</tr>
<tr>
<td>autoMACS&#x2122; Rinsing Solution</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Miltenyi Biotec</td>
<td>Order no. 130-091-222</td>
<td><a href="http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_134_155_autoMACS_Rinsing_Solution.aspx">http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_134_155_autoMACS_Rinsing_Solution.aspx</a></td>
</tr>
<tr>
<td>MACS&#174; BSA Stock Solution</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Miltenyi Biotec</td>
<td>Order no. 130-091-376</td>
<td><a href="http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_33_295_MACS_BSA_Stock_Solution.aspx">http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_33_295_MACS_BSA_Stock_Solution.aspx</a></td>
</tr>
<tr>
<td>CD11c MicroBeads</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Miltenyi Biotec</td>
<td>Order No. 130-052-001</td>
<td><a href="http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_93_132_CD11c_MicroBeads.aspx">http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_93_132_CD11c_MicroBeads.aspx</a></td>
</tr>
<tr>
<td>CD11c-FITC, CD11c-PE</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Miltenyi Biotec</td>
<td>Order no. 130-092-026	130-091-830</td>
<td><a href="http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_599_329_CD11c.aspx">http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_599_329_CD11c.aspx</a></td>
</tr>
<tr>
<td>Anti-mPDCA-1-APC</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Miltenyi Biotec</td>
<td>Order no. 130-091-963</td>
<td><a href="http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_599_325_Anti_mPDCA_1.aspx">http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_599_325_Anti_mPDCA_1.aspx</a></td>
</tr>
<tr>
<td>CD146-FITC</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Miltenyi Biotec</td>
<td>Order no. 130-092-026</td>
<td><a href="http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_599_417_CD146_LSEC_.aspx">http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_599_417_CD146_LSEC_.aspx</a></td>
</tr>
<tr>
<td>CD45-PE</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Miltenyi Biotec</td>
<td>Order no. 130-091-610</td>
<td><a href="http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_599_331_CD45.aspx">http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_599_331_CD45.aspx</a></td>
</tr>
<tr>
<td>Propidium Iodide Solution</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Miltenyi Biotec</td>
<td>Order no. 130-093-233</td>
<td><a href="http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_337_744_Propidium_Iodide_Solution.aspx">http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_337_744_Propidium_Iodide_Solution.aspx</a></td>
</tr>
<tr>
<td>Art 1000 Reach Pipet Tips</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Molecular BioProducts</td>
<td>Order no. 2079</td>
<td><a href="http://www.mbpinc.com/ASP/products.aspx?query_TipID=61">http://www.mbpinc.com/ASP/products.aspx?query_TipID=61</a><br /><a href="http://www.mbpinc.com/html/products/art/display.html">http://www.mbpinc.com/html/products/art/display.html</a>
</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

standardized preparation of single-cell suspensions from mouse lung tissue using the gentlemacs dissociator

<p class="jove_content">Подготовка одноклеточных суспензий из тканей является важной предпосылкой для многих экспериментов в сотовых исследований. Процесс диссоциации целые органы требует специфических параметров, чтобы получить большое количество жизнеспособных клеток в воспроизводимым образом. GentleMACS диссоциатор оптимизирует эту задачу с простым, практичным протокола. Инструмент содержит предварительно запрограммированными настройками, которые оптимизированы для эффективной, но нежный диссоциации различных типов тканей, в том числе мыши легких. В этой публикации использование диссоциатор gentleMACS на легочную ткань производным от мышей показано.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Standardized Preparation of Single-Cell Suspensions from Mouse Lung Tissue using the gentleMACS Dissociator at JoVE.com

Standardized Preparation of Single-Cell Suspensions from Mouse Lung Tissue using the gentleMACS Dissociator

<p class="jove_content">Диссоциирующего клетки определенных типов ткани требует специфических параметров для агитации ткани для получения большого количества жизнеспособных, culturable клеток. Miltenyi gentleMACS диссоциатор оптимизирует эту задачу с простым, практичным протокола. В этой публикации использование этого аппарата на легочной ткани объясняется.</p>

Стандартизированные Подготовка одноклеточных суспензий от мыши легочной ткани использованием gentleMACS диссоциатор

The preparation of single-cell suspensions from tissues is an important prerequisite for many experiments in cellular research. The process of ...

Research

JoVE Journal

Biology

Preparation of Single-Cell Suspensions from Mouse Spleen with the gentleMACS Dissociator

Подготовка одноклеточных суспензий из селезенки мыши с gentleMACS диссоциатор

Single-cell suspensions are a prerequisite for experiments in cell separation, cell analysis and cell culture.  To avoid tedious and often painful manual ...

Generation of Single-Cell Suspensions from Mouse Neural Tissue

Генерация одноклеточных суспензий от мыши нервной ткани

Within the nervous system, hundreds of neuronal and glial cell types have been described. Each specific cell type in the brain or spinal cord has a ...

Single-cell Suction Recordings from Mouse Cone Photoreceptors

Одноклеточный Всасывающая Recordings от фоторецепторов Мышь Конус

Rod and cone photoreceptors in the retina are responsible for light detection. In darkness, cyclic nucleotide-gated (CNG) channels in the outer segment ...

Detection of Nitric Oxide and Superoxide Radical Anion by Electron Paramagnetic Resonance Spectroscopy from Cells using Spin Traps

Определение оксида азота и супероксид анион-радикал электронов парамагнитного резонанса от клеток с использованием спиновых ловушек

Reactive nitrogen/oxygen species (ROS/RNS) at low concentrations play an important role in regulating cell function, signaling, and immune response but in ...

Generation of Mice Derived from Induced Pluripotent Stem Cells

Генерация Мыши, полученные из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток

The production of induced pluripotent stem cells (iPSCs) from somatic cells provides a means to create valuable tools for basic research and may also ...

Simple and Efficient Technique for the Preparation of Testicular Cell Suspensions

Простой и эффективный способ для подготовки яичек клеточные суспензии

Mammalian testes are very complex organs that contain over 30 different cell types, including somatic testicular cells and different stages of germline ...

Isolation of Nuclei from Flash-Frozen Liver Tissue for Single-Cell Multiomics

Выделение ядер из замороженной ткани печени для одноклеточной мультиомики

The liver is a complex and heterogenous tissue responsible for carrying out many critical physiological functions, such as the maintenance of energy ...

Single-Cell Suspension Preparation from Nile Tilapia Intestine for Single-Cell Sequencing

Препарат одноклеточной суспензии из кишечника нильской тилапии для секвенирования одноклеточных клеток

Nile tilapia is one of the most commonly cultured freshwater fish species worldwide and is a widely used research model for aquaculture fish studies. The ...

Semi-Automated Isolation of Murine White Adipose Tissue

Semi-Automated Isolation of the Stromal Vascular Fraction from Murine White Adipose Tissue Using a Tissue Dissociator

Semi-Automated Isolation of the Stromal Vascular Fraction from Murine White Adipose Tissue Using a Tissue Dissociator (Video) | JoVE 

Полуавтоматическое выделение стромально-васкулярной фракции из белой жировой ткани мыши с помощью тканевого диссоциатора

The in vitro study of white, brown, and beige adipocyte differentiation enables the investigation of cell-autonomous functions of adipocytes and their ...

Two-Step Cell Digestion of Mouse Carotid Artery

Preparation of a Single-Cell Suspension from Mouse Carotid Arteries for Single-Cell Sequencing

Vascular Tissue Dissociation and Exploring Single-Cell Subclusters for Targeted Therapy (Video) | JoVE

Приготовление одноклеточной суспензии из сонных артерий мыши для секвенирования одноклеточных клеток

Carotid arteries are major blood vessels in the neck that supply blood and oxygen to the brain, but carotid stenosis occurs when carotid arteries are ...