Name: batch immunostaining for large-scale protein detection in the whole monkey brain
Uploaded: 2009-07-27T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Batch Immunostaining for Large-Scale Protein Detection in the Whole Monkey Brain at JoVE.com

<p class="jove_content"> हम फ्रैंक Ervin, रोबर्टा Palmour और व्यवहार विज्ञान फाउंडेशन हमारे रहनुमा काम के अपने निरंतर समर्थन के लिए, वेस्ट इंडीज, सेंट किट्स में स्थित प्रयोगशालाओं के कर्मचारियों के लिए आभारी हैं. स्वास्थ्य अनुसंधान (एसी) और राष्ट्रीय इंजीनियरिंग और अनुसंधान परिषद के कनाडा (सांसद) की कनाडा के संस्थानों से ऑपरेटिंग अनुदान - यह काम नाजुक एक्स कनाडा की रिसर्च फाउंडेशन (FXRFC) SZ करने के लिए और से एक फैलोशिप द्वारा समर्थित किया गया था. </p>

<p class="jove_content"> Immunohistochemisty विभिन्न प्रयोगात्मक पशु मॉडल के मस्तिष्क में प्रोटीन अभिव्यक्ति निस्र्पक के लिए सबसे व्यापक रूप से इस्तेमाल किया तकनीकों का है. यह अपेक्षाकृत आसान है करने के लिए इसी तरह की मस्तिष्क के आकार क?...

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	<li>Olfert, E. D., Cross, B. M., McWilliam, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> <em style='font-style: italic'>Guide to the Care and Use of Experimental Animals</em>. , (1993).</li><li>Devys, D., Lutz, Y., Rouyer, N., Bellocq, J. P., Mandel, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+FMR-1+protein+is+cytoplasmic,+most+abundant+in+neurons+and+appears+normal+in+carriers+of+a+fragile+X+premutation.">The FMR-1 protein is cytoplasmic, most abundant in neurons and appears normal in carriers of a fragile X premutation.</a> <em style='font-style: italic'>Nat Genet</em>. <b>4</b>, 335-340 (1993).</li><li>Mullen, R. J., Buck, C. R., Smith, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NeuN,+a+neuronal+specific+nuclear+protein+in+vertebrates.">NeuN, a neuronal specific nuclear protein in vertebrates.</a> <em style='font-style: italic'>Development</em>. <b>116</b>, 201-211 (1992).</li><li>Sternberger, L. A., Sternberger, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monoclonal+antibodies+distinguish+phosphorylated+and+nonphosphorylated+forms+of+neurofilaments+in+situ.">Monoclonal antibodies distinguish phosphorylated and nonphosphorylated forms of neurofilaments in situ.</a> <em style='font-style: italic'>Proc Natl Acad Sci U S A</em>. <b>80</b>, 6126-6130 (1983).</li></ol>

<p class="jove_content"> इस प्रक्रिया में दो महत्वपूर्ण कदम है कि एक पूरे बंदर संभव मस्तिष्क में बड़े पैमाने पर प्रोटीन का पता लगाने के हैं. एक एम्बेड और सेक्शनिंग प्रोटोकॉल, जो एनएसए के स्वामित्व ज्ञान रहता है. अन्य धुंधला व्?...

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<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>anti-FMRP monoclonal antibody</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Chemicon</td>
<td>MAB2160</td>
<td>Requires antigen retrieval in fixed tissue.</td>
</tr>
<tr>
<td>anti-NeuN monoclonal antibody</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Chemicon</td>
<td>MAB377</td>
<td>N/A</td>
</tr>
<tr>
<td>anti-Neurofilament H monoclonal antibody</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sternberger Monoclonals Inc.</td>
<td>SMI32</td>
<td>N/A</td>
</tr>
<tr>
<td>Antigen Unmasking Solution</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Vector Laboratories</td>
<td>H-3300</td>
<td>N/A</td>
</tr>
<tr>
<td>Normal horse serum</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>16050122</td>
<td>500 mL</td>
</tr>
<tr>
<td>Biotinylated Anti-Mouse IgG (H+L), made in horse</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Vector Laboratories</td>
<td>BA-2000</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>VECTASTAIN ABC Kit (Standard)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Vector Laboratories</td>
<td>PK-4000</td>
<td>1.5 mg</td>
</tr>
<tr>
<td>Staining dish for floating sections</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>HistoTools</td>
<td>10009</td>
<td>12 x 65 mm</td>
</tr>
<tr>
<td>Staining transport basket</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>HistoTools</td>
<td>10012</td>
<td>large<br />
(fits 12 x 65 mm dish)</td>
</tr>
<tr>
<td>Triton X-100</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>P8514B</td>
<td>N/A</td>
</tr>
<tr>
<td>DAB</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>AC11209-0050</td>
<td>N/A</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

batch immunostaining for large-scale protein detection in the whole monkey brain

<p class="jove_content">Immunohistochemistry (आईएचसी) लक्ष्य प्रोटीन का पता लगाने के लिए सबसे व्यापक रूप से इस्तेमाल प्रयोगशाला तकनीकों में से एक है<em&gt; बगल में</em&gt;. पूरे मस्तिष्क भर में एक लक्ष्य प्रोटीन की अभिव्यक्ति पैटर्न से संबंधित प्रश्न अपेक्षाकृत आसान जवाब जब कृन्तकों की उन जैसे छोटे दिमाग में आईएचसी का उपयोग कर रहे हैं. हालांकि, primates के उन जैसे बड़े और जटिल दिमाग में एक ही सवाल का जवाब चुनौतियों का एक संख्या प्रस्तुत करता है. यहाँ हम एक वयस्क बंदर के दिमाग में एक लक्ष्य प्रोटीन की immunodetection लिए एक व्यवस्थित दृष्टिकोण प्रस्तुत करते हैं. इस दृष्टिकोण एम्बेडिंग और सेक्शनिंग न्यूरोसाइंस एसोसिएट्स की पद्धति (एनएसए) के रूप में के रूप में अच्छी तरह से मुक्त अस्थायी वर्गों के बैच धुंधला के लिए विशेष रूप से विकसित उपकरणों के ऊतकों पर निर्भर करता है. यह वर्गों का एक सेट है, जो एक विशेष अंतराल पर पूरे मस्तिष्क का प्रतिनिधित्व करता है की वर्दी धुंधला में परिणाम है. परिणामस्वरूप दाग वर्गों विश्लेषणात्मक प्रक्रियाओं की एक विस्तृत विविधता के अधीन किया जा सकता है क्रम में करने के लिए प्रोटीन का स्तर, एक निश्चित प्रोटीन व्यक्त न्यूरॉन्स की आबादी को मापने.</p>

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Batch Immunostaining for Large-Scale Protein Detection in the Whole Monkey Brain

<p class="jove_content">पूरे रहनुमा मस्तिष्क भर में लक्ष्य प्रोटीन की बड़े पैमाने पर immunodetection उपन्यास ऊतक रोजगार एम्बेडिंग और एक निश्चित समय पर एकाधिक मुक्त अस्थायी वर्गों के बैच धुंधला के लिए रचनात्मक उपकरण के उपयोग के साथ संयुक्त तरीकों सेक्शनिंग द्वारा ही संभव है.</p>

साबुत बंदर के मस्तिष्क में बड़े पैमाने पर प्रोटीन पता लगाने के लिए बैच Immunostaining

Immunohistochemistry (IHC) is one of the most widely used laboratory techniques for the detection of target proteins in situ. Questions concerning the ...

Research

JoVE Journal

Biology

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Metagenomic पुस्तकालय के बड़े पैमाने पर स्क्रीन

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Micro-dissection of Rat Brain for RNA or Protein Extraction from Specific Brain Region

चूहा मस्तिष्क के विशिष्ट मस्तिष्क क्षेत्र से शाही सेना या प्रोटीन निष्कर्षण के लिए माइक्रो - विच्छेदन

Micro-dissection of rat brain into various regions is extremely important for the study of different neurodegenerative diseases. This video demonstrates ...

Detection of Protein Ubiquitination

प्रोटीन ubiquitination की जांच

Ubiquitination, the covalent attachment of the polypeptide ubiquitin to target proteins, is a key posttranslational modification carried out by a set of ...

Purification of the <em>M. magneticum</em> Strain AMB-1 Magnetosome Associated Protein MamA&Delta;41

Purification of the M. magneticum Strain AMB-1 Magnetosome Associated Protein MamAÃƒÅ½Ã¢â‚¬Â41

के शोधन<em> एम. magneticum</em> तनाव Magnetosome एसोसिएटेड प्रोटीन MamAΔ41-1 AMB

Magnetotactic bacteria comprise a diverse group of aquatic microorganisms that are able to orientate themselves along geomagnetic fields. This behavior is ...

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Large Scale Zebrafish-Based In vivo Small Molecule Screen

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Given their small embryo size, rapid development, transparency, fecundity, and numerous molecular, morphological and physiological similarities to ...

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Identification of Novel Regulators of Plant Transpiration by Large-Scale Thermal Imaging Screening in Helianthus Annuus

<em>हेलिएथस एन्युस</em> में बड़े पैमाने पर थर्मल इमेजिंग स्क्रीनिंग द्वारा पौधों के वाष्पीकरण के उपन्यास नियामकों की पहचान

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