Name: virus-induced gene silencing (vigs) in nicotiana benthamiana and tomato
Uploaded: 2009-06-10T00:00:00
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우리는 원고에 대한 그녀의 귀중한 통찰력에 대한 박사 패트리샤 Manosalva 감사합니다. 기금은 국립 과학 재단 (National Science Foundation)의 식물 게놈 프로그램, 보너스 번호 DBI - 0605059에 의해 제공되었다.

1 부 : 식물 입을 사용 N. benthamiana 공장은 2 주위해야 ½ 주 된 어느 cotyledons하고 처음 2 시간 - 4 사실 단풍이 등장했습니다. 팔일 게시물 출현, 진정한 단풍이 아직 등장하지 않은 - 토마토 (솔라넘 lycopersicum) 식물 7을 사용하고 있습니다. 2 부 : VIGS 1 일 <ol><li> 각 실험, pTRV1을 품고 Agrobacterium tumefaciens의, pTRV2, pTRV2 - ...

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바이러스 유발 유전자 입을은 빠른 반대로 유전자 화면을 허용하는 방법입니다. 그것은 T - DNA 또는 Arabidopsis와 옥수수 같은 특정 식물에서만 사용할 수 있습니다 transposon의 중재 유전자 노크 아웃의 생성을 방지합니다. 또한 공장 변환의 시간이 소요되는 과정을 circumvents하고 그들이 충분한 상동 10 또는 다른 호스트 대상 시퀀스가 입을 벡터 6, 11 창출 배열되어있다는 제공 ...

virus-induced gene silencing (vigs) in nicotiana benthamiana and tomato

RNA 간섭 (RNAi)는 dsRNA 1 트리거 높은 특정 유전자 입을 현상입니다. microRNAs, 비 단백질 코딩 유전자와 짧은 간섭 RNAS (siRNAs)에서 생산이 입을 메커니즘은 RNA의 규제의 두 가지 주요 클래스를 사용합니다. 식물은 transposons을 제어와 같은 꽃 기관 형성과 잎 개발 2,3,4으로 개발 프로세스를 통해 꽉 컨트롤을 발휘하는 RNAi를 사용합니다. 식물은 또한 바이러스에 의해 감염으로부터 자신을 방어하기 위해 RNAi를 사용합니다. 따라서, 많은 바이러스는 숙주 5 그들의 성공적인 식민지를 허용하도록 입을 유전자의 진압을 발전시켜 왔습니다. 바이러스 유발 유전자 입을 (VIGS)는 공장 RNAi - 중재 항바이러스 방어 메커니즘을 활용하는 방법입니다. 수정되지 않은 바이러스에 감염된 식물의 메커니즘은 특히 바이러스 게놈에 대해 타겟팅됩니다. 그러나, 호스트 유전자에서 파생 시퀀스를 들고 바이러스 벡터와 프로세스가 추가로 해당 호스트 mRNAs에 대해 타겟팅할 수 있습니다. VIGS이 플라스미드는 티, 전체 또는 입을를 대상으로 유전자 시퀀스의 일부를지고 재조합 바이러스를 통해 제공하는 식물 병원균 Agrobacterium tumefaciens의를 사용하여 공장에서 높은 처리량 기능 유전체학에 맞게 조정될 수 있습니다. 체계적 바이러스 확산과 내생 식물 RNAi 기계는 알아서. 대상 유전자에 해당하는 dsRNAs의 길이는 21-24 세포핵의 siRNAs로 ribonuclease의 주사위 놀이를하는 사람에 의해 만들어진 후 죽습 있습니다. 이 siRNAs는 궁극적으로 목표 성적 증명서 2 타락하는 RNA 유발 입을 복합 (RISC)를 안내입니다. 다른 벡터는 VIGS에 고용되어 있고 가장 자주 사용 중 하나가 담배 텅 바이러스 (TRV)를 기반으로합니다. TRV는 bipartite 바이러스 등, 두 개의 다른 A.로 tumefaciens의 변종은 VIGS에 사용됩니다. 하나는 pTRV2, 다른 하나는 코트의 단백질과 VIGS 6,7에 사용되는 순서를 항구 동안 복제 및 운동 바이러스 기능을 인코딩 pTRV1을 수행합니다. Nicotiana benthamiana과 유전자 입을의 변종 결과 모두의 혼합물과 함께 토마토 모종의 접종. photobleaching 원인 내생 phytoene desaturase (PDS) 유전자,의 입을는 VIGS 효율을위한 컨트롤로 사용됩니다. 그것은 지적되어야하지만, 토마토에 입을는 보통 N.보다 덜 효율적이다 benthamiana. 관심 유전자의 RNA 대본 풍부한는 항상 대상 유전자를 효율적으로 다운 - 규제되었음을 보장하기 위해 측정해야합니다. N.에서 그럼에도 불구하고, heterologous 유전자 시퀀스 benthamiana는 토마토와 반대 8 해당 orthologs을 침묵하는 데 사용할 수 있습니다.

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Virus-induced Gene Silencing VIGS in Nicotiana benthamiana and Tomato

노크를 다운 유전자 표현의에 대한 바이러스 유도된 유전자 입을 (VIGS) 메서드에 대한 설명<em&gt; Nicotiana benthamiana</em&gt;, 토마토.

바이러스 유도 진 입을 (VIGS)에 Nicotiana benthamiana 토마토

RNA interference (RNAi) is a highly specific gene-silencing phenomenon triggered by dsRNA1. This silencing mechanism uses two major classes of RNA ...

Research

JoVE Journal

Biology

Virus-induced Gene Silencing (VIGS) in Nicotiana benthamiana and Tomato

Live Cell Calcium Imaging Combined with siRNA Mediated Gene Silencing Identifies Ca2+ Leak Channels in the ER Membrane and their Regulatory Mechanisms

Live Cell Calcium Imaging Combined with siRNA Mediated Gene Silencing Identifies Ca2+ Leak Channels in the ER Membrane and their Regulatory Mechanisms

siRNA의 중재 진 입을와 결합 라이브 세포 칼슘 영상은 CA를 나타냅니다 2 + ER 막의 누출 채널과 규제 메커니즘

In mammalian cells, the endoplasmic reticulum (ER) plays a key role in protein biogenesis as well as in calcium signalling1. The heterotrimeric Sec61 ...

연구

생물학

Induction and Testing of Hypoxia in Cell Culture

세포 배양의 유도와 Hypoxia의 시험

Hypoxia is defined as the reduction or lack of oxygen in organs, tissues, or cells.  This decrease of oxygen tension can be due to a reduced supply in ...

Agrobacterium-Mediated Virus-Induced Gene Silencing Assay In Cotton

커튼에서 Agrobacterium - 중재 바이러스 유발 유전자 입을 분석

Cotton (Gossypium hirsutum) is one of the most important crops worldwide. Considerable efforts have been made on molecular breeding of new varieties.  The ...

Isolation of Ribosome Bound Nascent Polypeptides in vitro to Identify Translational Pause Sites Along mRNA

Isolation of Ribosome Bound Nascent Polypeptides in vitro to Identify Translational Pause Sites Along mRNA

Ribosome 바운드 초기 Polypeptides의 분리<em&gt; 체외에서</em&gt; mRNA 함께 Translational 일시 중지 사이트를 식별하려면

The rate of translational elongation is non-uniform. mRNA secondary structure, codon usage and mRNA associated proteins may alter ribosome movement on the ...

Using SecM Arrest Sequence as a Tool to Isolate Ribosome Bound Polypeptides

Ribosome 바운드 Polypeptides을 파악하는 도구로 SecM 체포 시퀀스를 사용하여

Extensive research has provided ample evidences suggesting that protein folding in the cell is a co-translational process1-5. However, the exact pathway ...

Agroinfiltration and PVX Agroinfection in Potato and Nicotiana benthamiana

Agroinfiltration and PVX Agroinfection in Potato and Nicotiana benthamiana

감자와 니코티아나 벤타미안의 농아침투 및 PVX 농병감염

Agroinfiltration and PVX agroinfection are two efficient transient expression assays for functional analysis of candidate genes in plants. The most ...

Optimization and Utilization of Agrobacterium-mediated Transient Protein Production in Nicotiana

Optimization and Utilization of Agrobacterium-mediated Transient Protein Production in Nicotiana

최적화 및 활용<em&gt; 아그로 박테 리움</em에서&gt; 매개 과도 단백질 생산<em&gt;는 담배</em

Agrobacterium-mediated transient protein production in plants is a promising approach to produce vaccine antigens and therapeutic proteins within a short ...

Chitosan/Interfering RNA Nanoparticle Mediated Gene Silencing in Disease Vector Mosquito Larvae

질병 벡터 모기 유충의 키토산 / 간섭 RNA 나노 입자 중재 유전자 음소거

Vector mosquitoes inflict more human suffering than any other organism&#8212;and kill more than one million people each year. The mosquito genome projects ...

Meiotic Spindle Assessment in Mouse Oocytes by siRNA-mediated Silencing

siRNA를 매개 음소거로 마우스 난 모세포의 감수 스핀들 평가

Errors in chromosome segregation during meiotic division in gametes can lead to aneuploidy that is subsequently transmitted to the embryo upon ...

Luciferase Complementation Imaging Assay in Nicotiana benthamiana Leaves for Transiently Determining Protein-protein Interaction Dynamics

Luciferase Complementation Imaging Assay in Nicotiana benthamiana Leaves for Transiently Determining Protein-protein Interaction Dynamics

Luciferase 보완성 이미징 분석 결과 Nicotiana benthamiana 잎 뚜렷이 결정 단백질 단백질 상호 작용 역동성에 대 한

Protein-protein interactions are fundamental mechanisms for relaying signal transduction in most cellular processes; therefore, identification of novel ...