Name: combining peripheral nerve grafting and matrix modulation to repair the injured rat spinal cord
Uploaded: 2009-11-20T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Combining Peripheral Nerve Grafting and Matrix Modulation to Repair the Injured Rat Spinal Cord at JoVE.com

<p class="jove_content"> Dit werk werd ondersteund door NIH / NINDS Subsidies NS26380 en NS55976, de Christopher Reeve Foundation en Dana en de Daniel Heumann Fonds voor Spinal Cord Research. De Drexel University College of Medicine Spinal Cord Research Center biedt ondersteuning voor de belangrijkste faciliteiten die worden gebruikt om dit werk te voltooien. </p>

<p class="jove_title"> 1) Voorbereiding voor microscopische chirurgie </p><ol><li> De chirurgische station moet schoon en ontsmet met een verdunde bleekwater oplossing vóór het instellen van instrumenten en accessoires materialen. Instrumenten zullen worden geautoclaveerd een dag voorafgaand aan de operatie en opgeslagen in een steriele container. Zet de Hot Bead sterilisator (Fine Science Tools) gebruikt om pathogenen en microbiële verontreinigingen te verwijderen uit instrumenten tussen de procedures op verschillende dieren. </li><li> Slui...

<ol>
	<li>Houle, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Demonstration+of+the+potential+for+chronically+injured+neurons+to+regenerate+axons+into+intraspinal+peripheral+nerve+grafts.">Demonstration of the potential for chronically injured neurons to regenerate axons into intraspinal peripheral nerve grafts.</a> <em style='font-style: italic'>Exp. Neurol</em>. <b>113</b>, 1-9 (1991).</li><li>Ye, J. H., Houle, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+the+chronically+injured+spinal+cord+with+neurotrophic+factors+can+promote+axonal+regeneration+from+supraspinal+neurons.">Treatment of the chronically injured spinal cord with neurotrophic factors can promote axonal regeneration from supraspinal neurons.</a> <em style='font-style: italic'>Exp. Neurol</em>. <b>143</b>, 70-81 (1997).</li><li>Houle, J. D., Tom, V., Mayes, D., Wagoner, G., Phillips, N., Silver, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combining+an+autologous+peripheral+nerve+bridge+and+matrix+modification+by+chondroitinase+allows+robust+functional+regeneration+across+a+hemisection+lesion+of+the+adult+rat+spinal+cord.">Combining an autologous peripheral nerve bridge and matrix modification by chondroitinase allows robust functional regeneration across a hemisection lesion of the adult rat spinal cord.</a> <em style='font-style: italic'>J. Neurosci</em>. <b>26</b>, 7405-7415 (2006).</li><li>Tom, V., Houle, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraspinal+microinjection+of+chondroitinase+ABC+following+injury+promotes+axonal+regeneration+out+of+a+peripheral+nerve+graft.">Intraspinal microinjection of chondroitinase ABC following injury promotes axonal regeneration out of a peripheral nerve graft.</a> <em style='font-style: italic'>Exp. Neurol</em>. <b>211</b>, 315-319 (2008).</li></ol>

<ol><li> Voor de reproduceerbaarheid van het experiment is het belangrijk dat het niveau van de dwarslaesie in overeenstemming zijn van dier op dier. Daarom is het van cruciaal belang dat de juiste wervel-proces voor laminectomie worden geïdentificeerd. Omdat we gebruik maken van een hemisectie of doorsnijding letsel model voor deze studie is er geen onduidelijkheid over de grootte van de laesie, of dat specifieke spinale traktaten werden gewond of gespaard. </li><li> Het is noodzakelijk dat de perifere zenuw worden pre-gedegenereerde vóór d...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>10-0 silk suture</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>ArosSurgical</td>
<td>T5A10N10</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>6-0 silk suture</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>McKesson</td>
<td>2693</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Ampicillin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>McKesson</td>
<td>483549</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Antibody to cFos</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>F7799</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Biotinylated dextran Amine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>D7135</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Buprenorphin (.3mg/ml)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>McKesson</td>
<td>12496075701</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Chondroitinase ABC</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Associates of Cape Cod</td>
<td>100332-1A</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Euthasol</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Webster Veterinary</td>
<td>07-805-9296</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Hanks Balanced Salt Solution</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cellgro</td>
<td>21-021-CV</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Isoflurane</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Henry Schein</td>
<td>209-1966</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Michel Wound Clips</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>12040-02</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Neurotrace Kit</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>N7167</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>True Blue</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>T5891</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Xenodine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Webster Veterinary</td>
<td>92201</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Hot Bead Sterilizer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Forced Exercise Wheel</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Lafayette Instruments</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>TreadScan System</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Clever System</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Infinite Horizon Impact Device</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Precision Systems and Instrumentation</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Magnetic Stimulation Device</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>MagStim Inc.</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

combining peripheral nerve grafting and matrix modulation to repair the injured rat spinal cord

<p class="jove_content">Traumatisch letsel aan het ruggenmerg (SCI), de dood van neuronen, verstoring van motorische en sensorische zenuwvezel (axon) routes en verstoring van de communicatie met de hersenen. Een van de doelen van ons onderzoek is om regeneratie van axonen te bevorderen om de connectiviteit te herstellen in de laesie site. Om dit te bereiken hebben we een perifere zenuw (PN) enten techniek waarbij delen van de nervus ischiadicus ofwel direct geplaatst tussen de beschadigde uiteinden van het ruggenmerg of worden gebruikt om een ​​brug over de laesie te vormen. Er zijn verschillende voordelen aan deze aanpak ten opzichte van transplantatie van andere neurale weefsels; regenererende axonen kunnen worden gericht naar een bepaald doelgebied, het aantal en de bron van regenererende axonen gemakkelijk wordt bepaald door tracing technieken kan het implantaat worden gebruikt voor elektrofysiologische experimenten om te meten functioneel herstel geassocieerd met axonen in het transplantaat, en het is mogelijk om een ​​autoloog zenuw te gebruiken om de mogelijkheid van afstoting van het transplantaat te verminderen. In ons lab hebben we uitgevoerd zowel autologe (donor en ontvanger zijn hetzelfde dier) en heterologe (donor en ontvanger zijn verschillende dieren) enten met vergelijkbare resultaten. Deze aanpak is met succes gebruikt in zowel acute als chronische blessure situaties. Geregenereerd axons dat het distale uiteinde van de PN transplantaat te bereiken vaak niet om terug te breiden naar het ruggenmerg, dus gebruiken we micro-injecties van chondroitinase om remmende moleculen die worden geassocieerd met het littekenweefsel rondom het gebied van SCI degraderen. Tegelijkertijd hebben we gevonden dat het verstrekken van exogene groei en trofische moleculen langere afstand axonale hergroei bevordert in het ruggenmerg. Enkele maanden na de transplantatie we een groot aantal anatomische, gedrags-en elektrofysiologische tests om het herstel van de functie te evalueren in ons ruggenmerg gewonde dieren. Deze experimentele aanpak is met succes gebruikt in verschillende dwarslaesie modellen, op verschillende niveaus van schade en op verschillende soorten (muis, rat en kat). Belangrijk is dat de perifere zenuw enten aanpak is effectief in het bevorderen van de regeneratie door acute en chronisch gewond neuronen.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Combining Peripheral Nerve Grafting and Matrix Modulation to Repair the Injured Rat Spinal Cord at JoVE.com

Combining Peripheral Nerve Grafting and Matrix Modulation to Repair the Injured Rat Spinal Cord

<p class="jove_content">Traumatisch letsel aan het ruggenmerg verstoort de communicatie met de hersenen. Voor het herstellen van verloren connectiviteit we gebruik maken van een perifere zenuw graft om een ​​substraat te bieden voor het regenereren van vezels in combinatie met neurotrofe factoren en matrix-modulerende remmende enzymen om moleculen te verwijderen om lange afstand groei te bevorderen.</p>

De combinatie van Peripheral Nerve enten en Matrix Modulation aan de benadeelde Rat Spinal Cord Repair

Traumatic injury to the spinal cord (SCI) causes death of neurons, disruption of motor and sensory nerve fiber (axon) pathways and disruption of ...

Research

JoVE Journal

Biology

Spinal Cord Electrophysiology

Spinal Cord Elektrofysiologie

The neonatal mouse spinal cord is a model for studying the development of neural circuitries and locomotor movement. We demonstrate the spinal cord ...

Using the optokinetic response to study visual function of zebrafish

Met behulp van de optokinetische reactie op de visuele functie van de zebravis studie

Optokinetic response (OKR) is a behavior that an animal vibrates its eyes to follow a rotating grating around it. It has been widely used to assess the ...

<em>In Vivo</em> SiRNA Transfection and Gene Knockdown in Spinal Cord <em>via</em> Rapid Noninvasive Lumbar Intrathecal Injections in Mice

In Vivo SiRNA Transfection and Gene Knockdown in Spinal Cord via Rapid Noninvasive Lumbar Intrathecal Injections in Mice

<em>In Vivo</em> SiRNA Transfection en Gene Neerhalen in Spinal Cord <em>via</em> Rapid invasieve lumbale Intrathecale injecties in Muizen

This report describes a step-by-step guide to the technique of acute intrathecal needle injections in a noninvasive manner, i.e. independent of catheter ...

Scanning Electron Microscopy of Macerated Tissue to Visualize the Extracellular Matrix

Scanning Electron Microscopy van Gemacereerde Tissue te visualiseren de extracellulaire matrix

Fibrosis is a component of all forms of heart disease regardless of etiology, and while much progress has been made in the field of cardiac matrix ...

Cystometric and External Urethral Sphincter Measurements in Awake Rats with Implanted Catheter and Electrodes Allowing for Repeated Measurements

Cystometric en externe urethrale sluitspier metingen in wakker ratten met geïmplanteerde katheter en elektroden waardoor voor herhaalde metingen

Lower urinary tract function is mainly assessed by means of cystometric bladder function analysis in rodents. Conventional cystometries are usually ...

Sensitive Measurement of Mitophagy by Flow Cytometry Using the pH-dependent Fluorescent Reporter mt-Keima

Gevoelige meting van Mitophagy door Stroom Cytometry met behulp van de pH-afhankelijke fluorescerende verslaggever mt-Keima

Mitophagy is a process of selective removal of damaged or unnecessary mitochondria using autophagy machinery. Close links have been found between ...

Adipo-Clear: A Tissue Clearing Method for Three-Dimensional Imaging of Adipose Tissue

Adipo-Clear: Een weefsel Clearing methode voor driedimensionale beeldvorming van vetweefsel

Adipose tissue plays a central role in energy homeostasis and thermoregulation. It is composed of different types of adipocytes, as well as adipocyte ...

Assessment of Vascular Tone Responsiveness using Isolated Mesenteric Arteries with a Focus on Modulation by Perivascular Adipose Tissues

Beoordeling van de vasculaire Toon responsiviteit met behulp van geïsoleerde mesenterica slagaders met een focus op modulatie door Perivasculaire vetweefsel

Altered vascular tone responsiveness to pathophysiological stimuli contributes to the development of a wide range of cardiovascular and metabolic ...

A Single Cell Dissociation Approach for Molecular Analysis of Urinary Bladder in the Mouse Following Spinal Cord Injury

Een eencellige dissociatiebenadering voor moleculaire analyse van urineblaas in de muis na ruggenmergletsel

We describe the implementation of spinal cord injury in mice to elicit detrusor-sphincter dyssynergia, a functional bladder outlet obstruction, and ...

An Adipocyte Cell Culture Model to Study the Impact of Protein and Micro-RNA Modulation on Adipocyte Function

Een adipocytencelkweekmodel om de impact van eiwit- en micro-RNA-modulatie op de adipocytenfunctie te bestuderen

Alteration of adipocyte function contributes to the pathogenesis of metabolic diseases including Type 2 diabetes and insulin resistance. This highlights ...