Name: combining peripheral nerve grafting and matrix modulation to repair the injured rat spinal cord
Uploaded: 2009-11-20T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Combining Peripheral Nerve Grafting and Matrix Modulation to Repair the Injured Rat Spinal Cord at JoVE.com

<p class="jove_content"> Este trabajo fue apoyado por el NIH / NINDS subvenciones NS26380 y NS55976, la Fundación Christopher y Dana Reeve y el Fondo de Daniel Heumann para la Investigación de la Médula Espinal. La Drexel University College de Medicina de la columna vertebral Centro de Investigación de cable proporciona apoyo a las estructuras básicas utilizadas para completar este trabajo. </p>

<p class="jove_title"> 1) Preparación para una cirugía microscópica </p><ol><li> La estación de cirugía tiene que ser limpios y desinfectados con una solución diluida de lejía antes de la creación de instrumentos y materiales accesorios. Instrumentos en autoclave un día antes de la cirugía y se almacena en un recipiente estéril. A su vez en la lista Hot esterilizador de cuentas (Herramientas Artes Ciencia) que se utiliza para eliminar los agentes patógenos y contaminantes microbianos de instrumentos entre los procedimientos en los d...

<ol>
	<li>Houle, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Demonstration+of+the+potential+for+chronically+injured+neurons+to+regenerate+axons+into+intraspinal+peripheral+nerve+grafts.">Demonstration of the potential for chronically injured neurons to regenerate axons into intraspinal peripheral nerve grafts.</a> <em style='font-style: italic'>Exp. Neurol</em>. <b>113</b>, 1-9 (1991).</li><li>Ye, J. H., Houle, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+the+chronically+injured+spinal+cord+with+neurotrophic+factors+can+promote+axonal+regeneration+from+supraspinal+neurons.">Treatment of the chronically injured spinal cord with neurotrophic factors can promote axonal regeneration from supraspinal neurons.</a> <em style='font-style: italic'>Exp. Neurol</em>. <b>143</b>, 70-81 (1997).</li><li>Houle, J. D., Tom, V., Mayes, D., Wagoner, G., Phillips, N., Silver, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combining+an+autologous+peripheral+nerve+bridge+and+matrix+modification+by+chondroitinase+allows+robust+functional+regeneration+across+a+hemisection+lesion+of+the+adult+rat+spinal+cord.">Combining an autologous peripheral nerve bridge and matrix modification by chondroitinase allows robust functional regeneration across a hemisection lesion of the adult rat spinal cord.</a> <em style='font-style: italic'>J. Neurosci</em>. <b>26</b>, 7405-7415 (2006).</li><li>Tom, V., Houle, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraspinal+microinjection+of+chondroitinase+ABC+following+injury+promotes+axonal+regeneration+out+of+a+peripheral+nerve+graft.">Intraspinal microinjection of chondroitinase ABC following injury promotes axonal regeneration out of a peripheral nerve graft.</a> <em style='font-style: italic'>Exp. Neurol</em>. <b>211</b>, 315-319 (2008).</li></ol>

<ol><li> Para la reproducibilidad del experimento es importante que el nivel de lesión de la médula espinal ser consistentes de un animal a otro. Por lo tanto, es fundamental que el proceso adecuado para laminectomía vertebral ser identificado. Debido a que estamos usando un modelo de lesión o hemisección sección transversal de este estudio no hay ambigüedad sobre el tamaño de la lesión o si determinadas extensiones espinal se lesiona o salvado. </li><li> Es necesario que los nervios periféricos se pre-degenerado antes del trasplante,...

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		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
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		<tbody>
		
<tr>
<td>10-0 silk suture</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>ArosSurgical</td>
<td>T5A10N10</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>6-0 silk suture</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>McKesson</td>
<td>2693</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Ampicillin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>McKesson</td>
<td>483549</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Antibody to cFos</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>F7799</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Biotinylated dextran Amine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>D7135</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Buprenorphin (.3mg/ml)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>McKesson</td>
<td>12496075701</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Chondroitinase ABC</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Associates of Cape Cod</td>
<td>100332-1A</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Euthasol</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Webster Veterinary</td>
<td>07-805-9296</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Hanks Balanced Salt Solution</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cellgro</td>
<td>21-021-CV</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Isoflurane</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Henry Schein</td>
<td>209-1966</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Michel Wound Clips</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>12040-02</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Neurotrace Kit</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>N7167</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>True Blue</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>T5891</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Xenodine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Webster Veterinary</td>
<td>92201</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Hot Bead Sterilizer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Forced Exercise Wheel</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Lafayette Instruments</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>TreadScan System</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Clever System</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Infinite Horizon Impact Device</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Precision Systems and Instrumentation</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Magnetic Stimulation Device</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>MagStim Inc.</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

combining peripheral nerve grafting and matrix modulation to repair the injured rat spinal cord

<p class="jove_content">La lesión traumática de la médula espinal (SCI) causa la muerte de las neuronas, las disfunciones motoras y las fibras nerviosas sensoriales (axón) y la interrupción de las vías de comunicación con el cerebro. Uno de los objetivos de nuestra investigación es el de promover la regeneración axonal para restaurar la conectividad a través del sitio de la lesión. Para lograr esto, hemos desarrollado un nervio periférico (PN) injerto técnica en los segmentos de nervio ciático son colocados directamente entre los extremos dañados de la médula espinal o se utilizan para formar un puente a través de la lesión. Hay varias ventajas de este enfoque en comparación con el trasplante de otros tejidos neurales, la regeneración de los axones pueden ser dirigidos hacia un área específica, el número y el origen de la regeneración de los axones se determina fácilmente por técnicas de trazado, el injerto se puede utilizar para experimentos electrofisiológicos para medir recuperación funcional asociado con los axones en el injerto, y es posible utilizar un nervio autólogo para reducir la posibilidad de rechazo del injerto. En nuestro laboratorio hemos llevado a cabo tanto autólogos (donante y receptor son el mismo animal) y heteróloga (donante y receptor son diferentes animales) injertos con resultados comparables. Este enfoque ha sido utilizado con éxito en situaciones de lesiones agudas y crónicas. Axones regenerados que llegan al extremo distal del injerto PN a menudo no se extienden a la médula espinal, por lo que utilizar microinyecciones de condroitinasa para degradar moléculas inhibidoras asociados con el tejido de la cicatriz que rodea el área de la lesión medular. Al mismo tiempo, nos han revelado que el crecimiento exógeno y las moléculas tróficas estimula la regeneración axonal ya distancia en la médula espinal. Varios meses después del trasplante que realizamos una serie de pruebas anatómicas, de comportamiento y electrofisiológicos para evaluar la recuperación de la función en los animales de la médula espinal lesionada. Este enfoque experimental ha sido utilizado con éxito en varios modelos de lesión medular, en los diferentes niveles de lesiones y en diferentes especies (ratones, ratas y gatos). Es importante destacar que el enfoque de injerto de nervio periférico es eficaz para promover la regeneración de las neuronas aguda y crónica heridos.</p>

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Combining Peripheral Nerve Grafting and Matrix Modulation to Repair the Injured Rat Spinal Cord

<p class="jove_content">La lesión traumática de la médula espinal interrumpe la comunicación con el cerebro. Para restaurar la pérdida de conectividad que utilizan un injerto de nervio periférico para proporcionar un sustrato para la regeneración de las fibras en combinación con factores neurotróficos y las enzimas de la matriz de modulación, para eliminar las moléculas inhibidoras para promover el crecimiento de larga distancia.</p>

La combinación de injerto de nervio periférico y la matriz de modulación para la Reparación de médula espinal de ratas lesionados

Traumatic injury to the spinal cord (SCI) causes death of neurons, disruption of motor and sensory nerve fiber (axon) pathways and disruption of ...

Research

JoVE Journal

Biology

Spinal Cord Electrophysiology

La médula espinal de Electrofisiología

The neonatal mouse spinal cord is a model for studying the development of neural circuitries and locomotor movement. We demonstrate the spinal cord ...

Investigación

Biología

Using the optokinetic response to study visual function of zebrafish

Usando la respuesta de optocinético para estudiar la función visual del pez cebra

Optokinetic response (OKR) is a behavior that an animal vibrates its eyes to follow a rotating grating around it. It has been widely used to assess the ...

<em>In Vivo</em> SiRNA Transfection and Gene Knockdown in Spinal Cord <em>via</em> Rapid Noninvasive Lumbar Intrathecal Injections in Mice

In Vivo SiRNA Transfection and Gene Knockdown in Spinal Cord via Rapid Noninvasive Lumbar Intrathecal Injections in Mice

<em>En Vivo</em> transfección siRNA y Gene Derribo en la médula espinal <em>a través</em> de Rapid no invasiva lumbar intratecal inyecciones en ratones

This report describes a step-by-step guide to the technique of acute intrathecal needle injections in a noninvasive manner, i.e. independent of catheter ...

Scanning Electron Microscopy of Macerated Tissue to Visualize the Extracellular Matrix

Microscopía Electrónica de Barrido de tejido macerado para visualizar la matriz extracelular

Fibrosis is a component of all forms of heart disease regardless of etiology, and while much progress has been made in the field of cardiac matrix ...

Cystometric and External Urethral Sphincter Measurements in Awake Rats with Implanted Catheter and Electrodes Allowing for Repeated Measurements

Medición de esfínter uretral externo cistométrico en ratas despiertas con catéter implantado y electrodos para medidas repetidas

Lower urinary tract function is mainly assessed by means of cystometric bladder function analysis in rodents. Conventional cystometries are usually ...

Sensitive Measurement of Mitophagy by Flow Cytometry Using the pH-dependent Fluorescent Reporter mt-Keima

Medida sensible de la mitofagia por reportero fluorescente flujo Cytometry usando el pH-dependiente mt-Keima

Mitophagy is a process of selective removal of damaged or unnecessary mitochondria using autophagy machinery. Close links have been found between ...

Adipo-Clear: A Tissue Clearing Method for Three-Dimensional Imaging of Adipose Tissue

Adipo-claro: Un tejido claro método de proyección de imagen tridimensional del tejido adiposo

Adipose tissue plays a central role in energy homeostasis and thermoregulation. It is composed of different types of adipocytes, as well as adipocyte ...

Assessment of Vascular Tone Responsiveness using Isolated Mesenteric Arteries with a Focus on Modulation by Perivascular Adipose Tissues

Evaluación de la capacidad de respuesta del tono vascular utilizando arterias mesentérica aisladas con un enfoque en la modulación por tejidos adiposo perivasculares

Altered vascular tone responsiveness to pathophysiological stimuli contributes to the development of a wide range of cardiovascular and metabolic ...

A Single Cell Dissociation Approach for Molecular Analysis of Urinary Bladder in the Mouse Following Spinal Cord Injury

Un enfoque de disociación de una sola célula para el análisis molecular de la vejiga urinaria en el ratón después de la lesión de la médula espinal

We describe the implementation of spinal cord injury in mice to elicit detrusor-sphincter dyssynergia, a functional bladder outlet obstruction, and ...

An Adipocyte Cell Culture Model to Study the Impact of Protein and Micro-RNA Modulation on Adipocyte Function

Un modelo de cultivo celular de adipocitos para estudiar el impacto de la modulación de proteínas y microARN en la función de los adipocitos

Alteration of adipocyte function contributes to the pathogenesis of metabolic diseases including Type 2 diabetes and insulin resistance. This highlights ...