Name: imaging in-stent restenosis: an inexpensive, reliable, and rapid preclinical model
Uploaded: 2009-09-14T13:00:00
Duration: 9 min 46 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Imaging In-Stent Restenosis: An Inexpensive, Reliable, and Rapid Preclinical Model at JoVE.com

Harçlar Bu çalışmada, Stanford Üniversitesi, Stanford, CA, USA Tıp Fakültesi Kalp ve Damar Cerrahisi Anabilim Dalı Falk Araştırma Fonu tarafından desteklenmiştir. Tobias Deuse bir araştırma bursuyla Alman Kalp Derneği tarafından finanse edildi. Sonja Schrepfer Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) (SCHR992/2-1) bir araştırma bursu aldı.

Aort Stent Dağıtım <ol><li> 550-600 g ağırlığında erkek Sprague-Dawley sıçan Harlan (Indianapolis, IN, ABD) satın alınır. House geleneksel koşullar altında sıçan, beslenen standart sıçan yemi ve su ad libitum. </li><li> Ile sıçan anestezisi izofluran (% 2) ve ketamin (25 mg / kg). Mikroskobik görünümü altında, mini laparotomi infrarenal aort maruz bir üst medyan gerçekleştirin. </li><li> Renal arter seviyesinden aşağı çatallanma, çevredeki doku abdominal aorta parçalara ayır. DİKKAT: IVC aort incelemek gerek yok. </li><li> Microclamps aort kan akışını durdurmak için kullanın. Distal kelepçe ilk proksimal kelepçe yerleştirin. </li><li> Enine küçük bir kesi ile aort açın ve heparin (200 adet) ile aort yıkayın. </li><li> Aort endotel 2-fransız Fogarty arter embolektomi kateteri (Baxter Healthcare, Deerfield, IL, USA) geçişini arındırılır. </li><li> Herhangi bir insan stent uzunluğu 8mm ve 12mm arasında büyüklüğü ve çapı 2.5mm-3mm kullanın. DİKKAT: stent çapı, pre-ve post-stent stenozu önlemek için% 10 den fazla damar çapı geçmemesi gerekir. DİKKAT: Aynı çalışma içinde stent uzunluğu açmayın. </li><li> Stent istenilen çap elde etmek için uygun bir balon basıncı kullanarak dağıtın. </li><li> Küçük aort kesi 9-0 Prolen dikişler (Ethicon, Norderstedt, Almanya) ile kapatılmıştır. </li><li> 4-0 Vicryl çalışan dikişler (Ethicon, Norderstedt, Almanya) ile katmanları karın kesi kapatın. Cilt dikişlerle hala Viacryl kullanılsa bile 7-14 gün içinde sökülmelidir. </li><li> Hayvanların içme suyu 7 gün daha intraoperatif Carprofen (6mg/KG), ve metamizol aldı. </li></ol> Optik Koherens Tomografi (OCT) Görüntüleme OCT görüntüleri M2 OCT görüntüleme sistemi (Lightlab Imaging, Inc Westford, MA, USA) ile elde edilir. ImageWire doku ışık sinyalleri toplamak için bir görüntüleme probu. ImageWire 0.006 oluşur &quot;(0,15 mm) fiber-optik çekirdek, 0.019 maksimum OD ile bir kılıf içinde&quot; (0.48 mm). <ol><li> Ile sıçan anestezisi izofluran (% 2) ve ketamin (25 mg / kg). Mikroskobik görünümü altında, infrarenal aorta ortaya çıkarmak için bir medyan yinelemek laparotomi gerçekleştirin. </li><li> Proksimal aorta ve her iki iliyak arter Kelepçe. </li><li> Aort distal ucunda enine arteriyotomi gerçekleştirin 1ml PBS 28G kateter ile yıkayın ve OCT kateter eklemek ve aort içine yönlendirmek. </li><li> Bir geri çekilme hızı saniyede 1.0 mm Motorlu geri çekilme OCT görüntüleme yapılır. </li><li> Saniyede 15 kare görüntüler elde görüntülerin bir renk look-up tablosu ile gösterilir ve dijital olarak arşivlenir. </li><li> Arteriyotomi kapatın. </li><li> 4-0 Vicryl çalışan dikişler (Ethicon, Norderstedt, Almanya) ile karın ve kesiler kapatın. Cilt dikişlerle hala Viacryl kullanılsa bile 7-14 gün içinde sökülmelidir. </li><li> Maksimum neointima oluşumu stent implantasyonu sonrası 6 hafta içinde gelişecektir. </li></ol> OCT görüntüleri analizi Ekim ölçümleri bir fare tabanlı arayüz ile Lightlab OCT görüntüleme tescilli yazılım kullanılarak yapılır. <ol><li> Sistem, bu sistem için standart kalibrasyon tekniği OCT görüntüleme tel, yansıması kalibre edin. </li><li> Trace lümen ve her biri 1.0 mm aralıklarla manuel stent kesitsel alanlar (CSA). </li><li> Lümen CSA çıkarılır stent CSA gibi plak kesit alanı hesaplayın. Stent CSA (%) bölünmesiyle plak CSA gibi yüzde plak alanını hesaplayınız. Ortalama yüzde plak alanları hesaplayın. </li></ol> OCT tekniği Geçerliliği Ekim sonuçlar histopatoloji (Şekil 1) ile ilişkilidir. Histolojik plak CSAS yukarıda açıklandığı gibi hesaplanır. Histoloji yüksek yoğunluklu ve iğ şeklinde hücreler sadece birkaç mononükleer inflamasyon hücreleri ile intimal hiperplazi ortaya koymaktadır. 6 hafta sonra, stentler tamamen neointimal granülasyon doku ile kaplıdır ve plak CSA önlemleri 1.3 ± 0.4 mm 2 2.5mm stent. <img src="/files/ftp_upload/1346/1346fig1tmb.jpg" border="0" /> Şekil 1: OCT (A) ve histolojik (B 16x büyütme) stent 6 hafta sonra dağıtım görüntüleri. OCT görüntüleri elde Plak CSA sonuçlar histopatoloji ile iyi bir korelasyon. Lütfen Şekil 1&#39;de bir büyük halini görmek için <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1346/1346fig1.jpg">buraya tıklayınız</a> .

<ol>
	<li>Langeveld, B., Roks, A. J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Commentary:+rat+restenosis+models:+means+for+thorough+restenosis+research.">Commentary: rat restenosis models: means for thorough restenosis research.</a> Journal of endovascular therapy. 12 (3), 343-345 (2005).</li><li>Roguin, A., Grenadier, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stent-based+percutaneous+coronary+interventions+in+small+coronary+arteries.">Stent-based percutaneous coronary interventions in small coronary arteries.</a> Acute Card Care. 8, 70-74 (2006).</li><li>Post, M. J., Waltenberger, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+Is+Beautiful:+A+Miniature+Stent+Model.">Small Is Beautiful: A Miniature Stent Model.</a> Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 27, 701-702 (2007).</li><li>Langeveld, B., Roks, A. J. M., Tio, R. A., Boven, A. J. v. a. n., Want, J. J. L. v. a. n. d. e. r., Henning, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+abdominal+aorta+stenting:+a+new+and+reliable+small+animal+model+for+in-stent+restenosis.">Rat abdominal aorta stenting: a new and reliable small animal model for in-stent restenosis.</a> Journal of vascular research. 41 (5), 377-386 (2004).</li><li>Lowe, H. C., Chesterman, C. N., Khachigian, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+aortic+stenting:+toward+a+simple+model+of+in-stent+restenosis.">Rat aortic stenting: toward a simple model of in-stent restenosis.</a> The American journal of cardiology. 88 (6), 720-721 (2001).</li><li>Groenewegen, R., Harst, R. v. a. n. d. e. r., Roks, R., Buikema, R., Zijlstra, R., Gilst, R. v. a. n. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+angiotensin+II+and+angiotensin+II+type+1+receptor+blockade+on+neointimal+formation+after+stent+implantation.">Effects of angiotensin II and angiotensin II type 1 receptor blockade on neointimal formation after stent implantation.</a> International Journal of Cardiology. , (2007).</li><li>de Smet, B. J. G. L., Zijlstra, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+look+at+drug+eluting+stents+with+optical+coherence+tomography.">A look at drug eluting stents with optical coherence tomography.</a> European Heart Journal. 28 (8), 918-919 (2007).</li><li>Pinto, T. L., Waksman, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+applications+of+optical+coherence+tomography.">Clinical applications of optical coherence tomography.</a> Journal of interventional cardiology. 19 (6), 566-573 (2006).</li><li>Matsumoto, D., Shite, J., Shinke, T., Otake, H., Tanino, Y., Ogasawara, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neointimal+coverage+of+sirolimus-eluting+stents+at+6-month+follow-up:+evaluated+by+optical+coherence+tomography.">Neointimal coverage of sirolimus-eluting stents at 6-month follow-up: evaluated by optical coherence tomography.</a> European Heart Journal. 28 (8), 961-967 (2007).</li><li>Kawase, Y., Suzuki, Y., Ikeno, F., Yoneyama, R., Hoshino, K., Ly, H. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+nonuniform+rotational+distortion+between+mechanical+IVUS+and+OCT+using+a+phantom+model.+Ultrasound+in+medicine+&amp;amp;+biology.">Comparison of nonuniform rotational distortion between mechanical IVUS and OCT using a phantom model. Ultrasound in medicine &amp;amp; biology.</a> 33 (1), 67-73 (2007).</li></ol>

Tüm sıçanlar standart sıcaklık, nem ve ışık koşulları altında Stanford Üniversitesi Tıp Merkezi (Stanford, Ca) hayvan bakım tesisi ev sahipliği ve yem ve su ad libitum verilmiştir. Soruşturma ABD Ulusal Sağlık Enstitüleri (NIH yayın No 85-23, 1996 revize) tarafından yayınlanan Laboratuvar Hayvanları Bakım ve Kullanım Kılavuzu nitelikteydi. Çalışma protokolü Laboratuar Hayvan Bakım Yönetim Paneli, Stanford Üniversitesi tarafından kabul edildi.

Tavşan iliak arter ve domuz koroner arter modelleri stent yerleştirilmesi 1, radyolojik ve cerrahi teçhizat gerekli bir kombinasyonu için kullanılan en sık olmakla birlikte, hayvan barınağı kapasitesi sınırlı ve satın alma maliyetleri yüksek. Sıçan stent model Sınırlamalar sıçanlar için gerekli özel olarak tasarlanmış stentlerin kullanımı, daha fazla vasküler yaralanma 2 metal-arter oranı ve tromboz (3) yapay olarak yüksek insidansı. Sıçan stent modeli, basit, ucuz, hızlı ve doğru bir preklinik model 4 . Lowe ve arkadaşları tarafından sıçan aort direkt stent ilk rapor sonra stent içi restenoz patofizyolojisi değerlendirilmesi için bu modelin 5, fizibilite ve uygunluk iyice 5,6 gösterilmiştir. Sıçan aort çapı, fizyolojik gemi mimari kesinti olmadan piyasada bulunan stentler genişleme sağlamak için yeterli. Bu tavşan ve domuz gibi trombüs oluşumu, inflamasyon, ve SMC çoğalması gibi patofizyolojik mekanizmaları, bu sıçan modelleri geliştirmek gösterilmiştir. Bu nedenle, bu modeller gerçek restenoz süreci iyi temsilleri. OCT yüksek çözünürlüklü görüntüleme teknolojisi intimal hiperplazi değerlendirmek için yararlıdır. Penetrasyon derinliği sadece 1.5-2 mm, ancak çözünürlüğü intravasküler ultrason (IVUS) 7,8 daha fazla büyüklükte bir emirdir. IVUS ile OCT karşılaştıran birçok çalışma, Ekim henüz stent implantasyonu 8-10 sonra neointimal hiperplazi değerlendirmek için tercih edilen bir teknik olduğu sonucuna varıldı. Özellikle küçük damar çapları küçük hayvanlar, yüksek çözünürlüklü OCT restenoz değerlendirme için en iyi görüntüleme yöntemidir vermektedir. Özetle, bu video gösteriyor (1) sıçan aort stent, kolayca uygulanabilir, (2) sıçan abdominal aorta stent ticari olarak üretilen stentler test etmek için uygundur ve (3) OCT görüntüleme stent boyuna izlenmesi için doğru ve zarif bir tekniktir restenoz.

imaging in-stent restenosis: an inexpensive, reliable, and rapid preclinical model

Restenoz preklinik modeller in-stent restenoz yol ve mevcut ve gelecekteki ilaç salınımlı stentlerin optimize etmek için patofizyolojik süreçleri aydınlatmak için çok önemlidir. Sıçanlarda çeşitli antikorlar ve transgenik ve nakavt suşları mevcuttur. Sonuç olarak, sıçan in-stent restenoz için bir model pathobiological ve patofizyolojik çalışmalar için uygun olacaktır. Bu videoda, biz tam prosedür mevcut ve yüksek verimlilik stent araştırma için uygun bir sıçan stent model çukur düşer. Biz stent cerrahi prosedürü ve en zarif OCT (Optik Koherens Tomografi) tekniği kullanılarak stent restenoz değerlendirilmesi gösterecektir. Bu teknik, plak CSAS değerlendirilmesinde yüksek doğruluk sağlar (kesit alanları) ve histolojik kesitlerde, özel ve zaman alıcı gömme ve kesit alma teknikleri gerektiren koreledir. OCT görüntüleme histoloji kullanarak bir kerelik anlık görüntü kıyasla daha aynı hayvan içinde stent restenoz gelişimi boyuna izlenmesine olanak sağlar.

Watch this Scientific Journal Video about Imaging In-Stent Restenosis: An Inexpensive, Reliable, and Rapid Preclinical Model at JoVE.com

Imaging In-Stent Restenosis: An Inexpensive, Reliable, and Rapid Preclinical Model

Bu video stent restenoz gelişimi pathobiological ve patofizyolojik süreçleri incelemek için ucuz ve güvenilir bir preklinik modeli nasıl kullanılacağını gösterir. OCT (Optik Koherens Tomografi) ve OCT görüntüleri analizi kullanarak in vivo izleme Boyuna da göstermiştir.

Görüntüleme-stent restenoz: Ucuz, güvenilir ve hızlı bir Preklinik Modeli

Preclinical models of restenosis are essential to unravel the pathophysiological processes that lead to in-stent restenosis and to optimize existing and ...

Research

JoVE Journal

Biology

Non-plasma Bonding of PDMS for Inexpensive Fabrication of Microfluidic Devices

Ucuz mikroakışkan Cihazlar İmalat PDMS Non-plazma Yapışma

In this video, we demonstrate how to use the neuron microfluidic device without plasma bonding.  In some cases it may be desirable to reversibly bond ...

Assembly, Loading, and Alignment of an Analytical Ultracentrifuge Sample Cell

Kurul, Yükleme ve Analitik ultrasantrifüjdeki Örnek Hücre Hizalama

The analytical ultracentrifuge (AUC) is a powerful biophysical tool that allows us to record macromolecular sedimentation profiles during high speed ...

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

In vivo Görüntüleme ve Yumurtalık Kanseri Ortotopik Fare Modeli Tedavi Tedaviler

Human cancer and response to therapy is better represented in orthotopic animal models.  This paper describes the development of an orthotopic mouse model ...

3D Printing of Preclinical X-ray Computed Tomographic Data Sets

Preklinik X-ışını bilgisayarlı tomografi Veri 3D Yazdırma Setleri

Three-dimensional printing allows for the production of highly detailed objects through a process known as additive manufacturing.  Traditional, ...

An Improved Method for Accurate and Rapid Measurement of Flight Performance in Drosophila

An Improved Method for Accurate and Rapid Measurement of Flight Performance in Drosophila

Uçuş Performans Doğru ve hızlı ölçüm için geliştirilmiş Yöntemi<em&gt; Drosophila</em

Drosophila has proven to be a useful model system for analysis of behavior, including flight. The initial flight tester involved dropping flies into an ...

Rapid Analysis and Exploration of Fluorescence Microscopy Images

Hızlı Analiz ve Floresans Mikroskopi Görüntüler Exploration

Despite rapid advances in high-throughput microscopy, quantitative image-based assays still pose significant challenges. While a variety of specialized ...

A Rapid Automated Protocol for Muscle Fiber Population Analysis in Rat Muscle Cross Sections Using Myosin Heavy Chain Immunohistochemistry

Miyosin Ağır Zincir İmünohistokimya kullanma Sıçan kas Çapraz Bölüm kas Elyaf Nüfus Analizi İçin Hızlı Otomatik Protokolü

Quantification of muscle fiber populations provides a deeper insight into the effects of disease, trauma, and various other influences on skeletal muscle ...

Benefits of Cardiac Resynchronization Therapy in an Asynchronous Heart Failure Model Induced by Left Bundle Branch Ablation and Rapid Pacing

Kardiyak resenkronizasyon sol paket şube ablasyon ve hızlı Pacing tarafından indüklenen bir zaman uyumsuz kalp yetmezliği modelindeki faydaları

It is now well recognized that heart failure (HF) patients with left bundle branch block (LBBB) derive substantial clinical benefits from cardiac ...

High-throughput Measurement of Gut Transit Time Using Larval Zebrafish

Yüksek işlem hacmi ölçüm larva zebra balığı kullanarak Gut Transit süre

Zebrafish are used as alternative model organisms for drug safety testing. The gastrointestinal (GI) tract of zebrafish has genetic, neuronal, and ...

Mass Spectrometry Analysis to Identify Ubiquitylation of EYFP-tagged CENP-A (EYFP-CENP-A)

Mass Spectrometry Analysis to Identify Ubiquitylation of EYFP-tagged CENP-A EYFP-CENP-A

EYFP etiketli CENP-A (EYFP-CENP-A) Ubiquitylation tanımlamak için Kütle Spektrometresi Analizi

Studying the structure and the dynamics of kinetochores and centromeres is important in understanding chromosomal instability (CIN) and cancer ...