Name: harvesting and preparing drosophila embryos for electrophysiological recording and other procedures
Uploaded: 2009-05-20T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Harvesting and Preparing Drosophila Embryos for Electrophysiological Recording and Other Procedures at JoVE.com

KB wordt ondersteund door NIH subsidie ​​GM54544.

Deel 1: Uitrusting en Proviand <ol><li> Een goede dissectie microscoop nodig is voor embryo dissecties, 40x vergroting wordt voorgesteld, met 25x eye-stukken te verhogen tot maximaal vergroting. </li><li> Fijn pincet (nummer 5) zijn vereist voor handmatige selectie van embryo&#39;s en devitellinization van embryo&#39;s. </li><li> Apparatuur te maken en aan te passen goed glas naalden is noodzakelijk. Getrokken glas naalden nodig zijn voor de dissectie. Wij geven de voorkeur stevig glas voor dissectie (langer), maar st...

Nauwkeurige stadiëring van embryo&#39;s is van cruciaal belang te wijten aan de snelle rijping van de functionele eigenschappen over het tijdsverloop van slechts enkele uren. Aantal problemen compliceren deze enscenering. De eerste, de meeste onderzoekers gebruiken getimed ei legt op het podium embryo&#39;s, maar het ei leggen de tijd kan enorm variëren van dier tot dier in verschillende omstandigheden (Broadie et al.. 1992). In het bijzonder vrouwen op een beperkt dieet de neiging om bevruchte eieren gedurende langer...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Embryo Collection Cages</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Genesee Scientific (www.flystuff.com)</td>
<td>59-100 (for 60 mm dish; other sizes available)</td>
<td>Cages can also be home made using punctured tri-pour beakers, as shown in video</td>
</tr>
<tr>
<td>Sylgard 184</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Dow Corning</td>
<td>Available from various companies</td>
<td>Surgical glue adheres better to sylgard-coated coverslips</td>
</tr>
<tr>
<td>Fine glass tubing, outer diameter 1.0-1.5 mm</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>various</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>For pulling into fine glass needles for dissection and tubes for glue delivery</td>
</tr>
<tr>
<td>Plastic tubing, to attach to glass pipette for mouth suction and glue application</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Tygon</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Tubing inner diameter needs to match glass outer diameter.</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>

harvesting and preparing drosophila embryos for electrophysiological recording and other procedures

Drosophila is een vooraanstaande genetisch model voor de studie van zowel de embryonale ontwikkeling en functionele neurowetenschappen. Traditioneel worden deze velden geïsoleerd nogal van elkaar, met grotendeels onafhankelijke geschiedenis en wetenschappelijke gemeenschappen. Echter, de interface tussen deze vaak uiteenlopende terreinen is de ontwikkelingsprogramma&#39;s ten grondslag liggen aan de verwerving van functionele elektrische signaal-eigenschappen en de differentiatie van de functionele chemische synapsen tijdens de laatste fasen van neurale circuit formatie. Deze interface is een uitermate belangrijk gebied voor onderzoek. In Drosophila, deze fasen van de functionele ontwikkeling optreden tijdens een periode van &lt;8 uur (bij 25 ° C) tijdens het laatste derde deel van de embryogenese. Deze late ontwikkelingsfase werd lang beschouwd als hardnekkige het onderzoek als gevolg van de afzetting van een zware, ondoordringbare epidermale cuticula. Een doorbraak van tevoren was de toepassing van de water-polymeriseren chirurgische lijm die lokaal kan worden toegepast op de cuticula om gecontroleerde dissectie van de laat-stadium embryo&#39;s mogelijk te maken. Met een dorsale longitudinale incisie, kan het embryo te plat, waardoor de ventrale zenuw snoer en de lichaamswand spieren aan experimenteel onderzoek. Dit systeem is zwaar gebruikt voor het isoleren en karakteriseren van genetische mutanten dat embryonale synapsvorming aantasten, en dus onthullen de moleculaire mechanismen voor de specificatie en differentiatie van synaps verbindingen en functionele synaptische signalering eigenschappen.

Watch this Scientific Journal Video about Harvesting and Preparing Drosophila Embryos for Electrophysiological Recording and Other Procedures at JoVE.com

Harvesting and Preparing Drosophila Embryos for Electrophysiological Recording and Other Procedures

Deze techniek onthult de Drosophila embryonale neuromusculature voor immunohistochemie of elektrofysiologische opname. Het is handig voor het bestuderen van vroege gebeurtenissen in neuromusculaire ontwikkeling of het uitvoeren van elektrofysiologie in mutanten die niet kan uitkomen.

Oogsten en voorbereiden Drosophila Embryo&#39;s voor elektrofysiologische opname en andere procedures

Drosophila is a premier genetic model for the study of both embryonic development and functional neuroscience. Traditionally, these fields are quite ...

Research

JoVE Journal

Biology

Harvesting and Preparing Drosophila Embryos for Electrophysiological Recording and Other Procedures

Harvesting Sperm and Artificial Insemination of Mice

Oogsten Sperma en kunstmatige inseminatie van Muizen

Rodents of the genus Peromyscus (deer mice) are the most prevalent native North American mammals.  Peromyscus species are used in a wide range of research ...

Preparation of Neuronal Cultures from Midgastrula Stage Drosophila Embryos

De voorbereiding van Neuronale Culturen van Midgastrula Stage Drosophila embryo&#39;s

This video illustrates the procedure for making primary neuronal cultures from midgastrula stage Drosophila embryos. The methods for collecting embryos ...

Electrophysiological Methods for Recording Synaptic Potentials from the NMJ of Drosophila Larvae

Elektrofysiologische methoden voor opname Synaptic Potentials van de NMJ van Drosophila Larven

In this video, we describe the electrophysiological methods for recording synaptic transmission at the neuromuscular junction (NMJ) of Drosophila larva. ...

Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo

Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo

Elektrofysiologische opname in de Drosophila Embryo

Preparation of embryos for Electron Microscopy of the Drosophila embryonic heart tube

Preparation of embryos for Electron Microscopy of the Drosophila embryonic heart tube

De voorbereiding van embryo&#39;s voor Elektronenmicroscopie van de Drosophila Embryonale hart buis

The morphogenesis of the Drosophila  embryonic heart tube has emerged as a valuable model system for studying cell migration, cell-cell adhesion and cell ...

In-vivo Centrifugation of Drosophila Embryos

In-vivo Centrifugation of Drosophila Embryos

In-vivo Centrifugeren van Drosophila embryo&#39;s

A major strategy for purifying and isolating different types of intracellular organelles is to separate them from each other based on differences in ...

Upright Imaging of Drosophila Embryos

Upright Imaging of Drosophila Embryos

Rechtop beeldvorming van Drosophila Embryo&#39;s

Several well-known morphogenetic gradients and cellular movements occur along the dorsal/ventral axis of the Drosophila embryo. However, the current ...

Optimized Transfection Strategy for Expression and Electrophysiological Recording of Recombinant Voltage-Gated Ion Channels in HEK-293T Cells

Geoptimaliseerd transfectie strategie voor Expressie en elektrofysiologische opname van recombinant voltage-gated ion kanalen in HEK-293T cellen

The in vitro expression and electrophysiological recording of recombinant voltage-gated ion channels in cultured human embryonic kidney cells (HEK-293T) ...

Isolation and Purification of Kinesin from Drosophila Embryos

Isolation and Purification of Kinesin from Drosophila Embryos

Isolatie en zuivering van kinesine uit Drosophila Embryo&#39;s

Motor proteins move cargos along microtubules, and transport them to specific sub-cellular locations. Because altered transport is suggested to underlie a ...

Preparing Individual Drosophila Egg Chambers for Live Imaging

Preparing Individual Drosophila Egg Chambers for Live Imaging

Voorbereiden Individuele Drosophila Egg Chambers voor Live Imaging

Live cell imaging is an important technique applied to a number of Drosophila tissues used as models to investigate topics such as axis specification, ...