Name: electrophysiological recording in the drosophila embryo
Uploaded: 2009-05-21T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo at JoVE.com

KB wordt ondersteund door NIH subsidie ​​GM54544.

Deel 1: Uitrusting en Proviand <ol><li> Elektrofysiologische opname van Drosophila embryo&#39;s vereist in de eerste vaardigheid in het embryonale dissectie technieken, die worden beschreven in een ander Jupiter video. </li><li> Elektrofysiologische opname van Drosophila embryo&#39;s maakt gebruik van standaard patch-clamp-opname configuraties. Patch clamp opname apparatuur en software die geschikt zijn voor tal van andere preparaten is ook geschikt voor het opnemen van Drosophila embryo&#39...

Elektrofysiologische opname van Drosophila embryo&#39;s moet handmatig manipulatie en dissectie. De gezondheid van de voorbereiding, en de daaruit voortvloeiende de kwaliteit van de opnames, hangt af van een in staat om snel en netjes voor te bereiden de kwetsbare embryonale weefsels voor het opnemen, en voer vervolgens het experiment. Onderzoekers moet bedreven zijn in zowel de embryonale ontledingen en patch clamp electrofysiologie voordat je probeert om zowel aan te pakken tegelijk. <p class="jove_conten...

electrophysiological recording in the drosophila embryo

Drosophila is een vooraanstaande genetisch model voor de studie van zowel de embryonale ontwikkeling en functionele neurowetenschappen. Traditioneel worden deze velden geïsoleerd nogal van elkaar, met grotendeels onafhankelijke geschiedenis en wetenschappelijke gemeenschappen. Echter, de interface tussen deze vaak uiteenlopende terreinen is de ontwikkelingsprogramma&#39;s ten grondslag liggen aan de verwerving van functionele elektrische signaal-eigenschappen en de differentiatie van de functionele chemische synapsen tijdens de laatste fasen van neurale circuit formatie. Deze interface is een uitermate belangrijk gebied voor onderzoek. In Drosophila, deze fasen van de functionele ontwikkeling optreden tijdens een periode van &lt;8 uur (bij 25 ° C) tijdens het laatste derde deel van de embryogenese. Deze late ontwikkelingsfase werd lang beschouwd als hardnekkige het onderzoek als gevolg van de afzetting van een zware, ondoordringbare epidermale cuticula. Een doorbraak van tevoren was de toepassing van de water-polymeriseren chirurgische lijm die lokaal kan worden toegepast op de cuticula om gecontroleerde dissectie van de laat-stadium embryo&#39;s mogelijk te maken. Met een dorsale longitudinale incisie, kan het embryo te plat, waardoor de ventrale zenuw snoer en de lichaamswand spieren aan experimenteel onderzoek. Whole-cell patch-clamp technieken kunnen dan worden gebruikt om op te nemen van individueel herkenbare neuronen en somatische spieren. Deze opname configuraties zijn gebruikt om het uiterlijk en de rijping van de ionische stromen en actiepotentiaal voortplanting in zowel neuronen en spieren te volgen. Genetische mutanten die deze elektrische eigenschappen werden gekenmerkt om de moleculaire samenstelling van ionenkanalen en de bijbehorende signalering complexen onthullen, en om de verkenning van de moleculaire mechanismen van functionele differentiatie te beginnen. Een bijzondere focus is de montage van synaptische verbindingen, zowel in het centrale zenuwstelsel en periferie. De glutamaat neuromusculaire junctie (NMJ) is het meest toegankelijk is voor een combinatie van optische beeldvorming en elektrofysiologische opname. Een glas zuig elektrode wordt gebruikt om de perifere zenuw te stimuleren, met prikkelende knooppunt huidige (EJC) opnames gemaakt in de voltage-opgespannen spieren. Deze opname configuratie is gebruikt om de functionele differentiatie van de synaps grafiek en het uiterlijk en de rijping van presynaptische glutamaat afgifte eigenschappen track. Daarnaast kunnen postsynaptische eigenschappen onafhankelijk van elkaar worden getest via iontoforetische of druk de toepassing van glutamaat rechtstreeks naar de spier oppervlak, het uiterlijk en de rijping van de glutamaat receptor velden te meten. Zo kunnen zowel pre-en postsynaptische elementen afzonderlijk of in combinatie worden gevolgd tijdens de embryonale synaptogenese. Dit systeem is zwaar gebruikt voor het isoleren en karakteriseren van genetische mutanten dat embryonale synapsvorming aantasten, en dus onthullen de moleculaire mechanismen voor de specificatie en differentiatie van synaps verbindingen en functionele synaptische signalering eigenschappen.

Watch this Scientific Journal Video about Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo at JoVE.com

Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo

Elektrofysiologische opnamen van<em&gt; Drosophila</em&gt; Embryo&#39;s laten analyses van de ontwikkeling van spier-en neuron elektrische eigenschappen, evenals karakteriseren van functionele synaptogenese op de glutamaat neuromusculaire verbinding en centrale cholinerge en GABA-erge synapsen.

Elektrofysiologische opname in de Drosophila Embryo

Drosophila is a premier genetic model for the study of both embryonic development and functional neuroscience. Traditionally, these fields are quite ...

Research

JoVE Journal

Biology

Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo

Assay for Neural Induction in the Chick Embryo

Test voor Neurale Inductie in het kippenembryo

The chick embryo is a valuable tool in the study of early embryonic development. Its transparency, accessibility and ease of manipulation, make it an ...

Electrophysiological Methods for Recording Synaptic Potentials from the NMJ of Drosophila Larvae

Elektrofysiologische methoden voor opname Synaptic Potentials van de NMJ van Drosophila Larven

In this video, we describe the electrophysiological methods for recording synaptic transmission at the neuromuscular junction (NMJ) of Drosophila larva. ...

Harvesting and Preparing Drosophila Embryos for Electrophysiological Recording and Other Procedures

Harvesting and Preparing Drosophila Embryos for Electrophysiological Recording and Other Procedures

Oogsten en voorbereiden Drosophila Embryo&#39;s voor elektrofysiologische opname en andere procedures

Microinjection Techniques for Studying Mitosis in the Drosophila melanogaster Syncytial Embryo

Microinjection Techniques for Studying Mitosis in the Drosophila melanogaster Syncytial Embryo

Micro-injectie technieken voor het bestuderen van mitose in de Drosophila melanogaster Syncytieel Embryo

This protocol describes the use of the Drosophila melanogaster syncytial embryo  for studying mitosis1.  Drosophila has useful genetics with a sequenced ...

Visualizing the Beating Heart in Drosophila

Visualizing the Beating Heart in Drosophila

Het visualiseren van de Beating Heart in Drosophila</em

The Drosophila heart has recently emerged as a good model system for examining the genetic, cellular, and molecular mechanisms underlying function in ...

Preparation of embryos for Electron Microscopy of the Drosophila embryonic heart tube

Preparation of embryos for Electron Microscopy of the Drosophila embryonic heart tube

De voorbereiding van embryo&#39;s voor Elektronenmicroscopie van de Drosophila Embryonale hart buis

The morphogenesis of the Drosophila  embryonic heart tube has emerged as a valuable model system for studying cell migration, cell-cell adhesion and cell ...

Ambulatory ECG Recording in Mice

Ambulante ECG opnemen in Muizen

Telemetric ECG recording in mice is essential to understanding the mechanisms behind arrhythmias, conduction disorders, and sudden cardiac death. Although ...

Optimized Transfection Strategy for Expression and Electrophysiological Recording of Recombinant Voltage-Gated Ion Channels in HEK-293T Cells

Geoptimaliseerd transfectie strategie voor Expressie en elektrofysiologische opname van recombinant voltage-gated ion kanalen in HEK-293T cellen

The in vitro expression and electrophysiological recording of recombinant voltage-gated ion channels in cultured human embryonic kidney cells (HEK-293T) ...

Tracking Morphogenetic Tissue Deformations in the Early Chick Embryo

Tracking Morfogenetische Tissue vervormingen in de vroege Chick Embryo

Embryonic epithelia undergo complex deformations (e.g. bending, twisting, folding, and stretching) to form the primitive organs of the early embryo. ...

Live Imaging of Apoptotic Cell Clearance during Drosophila Embryogenesis

Live Imaging of Apoptotic Cell Clearance during Drosophila Embryogenesis

Wonen Imaging van apoptotische cel Clearance tijdens<em&gt; Drosophila</em&gt; Embryogenese

The  proper elimination of unwanted or aberrant cells through apoptosis and  subsequent phagocytosis (apoptotic cell clearance) is crucial for normal  ...