Name: electrophysiological recording in the drosophila embryo
Uploaded: 2009-05-21T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo at JoVE.com

KB stöds av NIH bidrag GM54544.

Del 1: Utrustning och tillbehör <ol><li> Elektrofysiologiska inspelning från Drosophila embryon kräver först kunskaper i embryonala dissektion tekniker, som beskrivs i en annan JUPITER video. </li><li> Elektrofysiologiska inspelning från Drosophila embryon använder standard patch konfigurationer klämma inspelning. Patch clamp färdskrivare och programvara som lämpar sig för många andra preparat är också lämplig för inspelning från Drosophila embryon. Eftersom Drosophila</e...

Elektrofysiologiska inspelning från Drosophila embryon kräver manuell manipulation och dissektion. Hälsa förberedelser, och därmed kvaliteten på inspelningarna, beror på en att snabbt kunna och prydligt förbereda den ömtåliga embryonala vävnader för inspelning, och sedan köra experimentet. Praktiker bör ha goda kunskaper i både embryonala dissektioner och patch clamp elektrofysiologi innan du försöker att ta itu med båda samtidigt. Inspelningar kan göras på en av...

electrophysiological recording in the drosophila embryo

Drosophila är en förstklassig genetisk modell för studier av såväl embryonal utveckling och funktionell neurovetenskap. Tidigare har dessa fält helt isolerade från varandra, med i stort sett oberoende historia och vetenskapliga samfund. Dock är gränssnittet mellan dessa oftast skilda områden utvecklingsarbetet program som ligger bakom förvärvet av funktionella elektriska signalering egenskaper och differentiering av funktionella kemiska synapser under de sista faserna av neural krets bildas. Detta gränssnitt är ett mycket viktigt område för utredning. I Drosophila, dessa faser av funktionell utveckling sker under en period av &lt;8 timmar (vid 25 ° C) under den sista tredjedelen av fosterutvecklingen. Denna sena utveckling period ansågs länge svårlösta för undersökning på grund av deponering av en tuff och tät yta epidermal nagelband. Ett genombrott förskott var tillämpningen av vatten-polymerisation kirurgiskt lim som kan vara lokalt tillämpas på nagelbanden för att kontrollerad dissekering av sena embryon. Med ett rygg-längsgående snitt, kan embryot läggas platt, utsätta den ventrala nerven sladden och kropp vägg muskulatur till experimentella undersökningar. Hela-cell patch-clamp teknik kan sedan användas för att spela in från individuellt identifierbara nervceller och somatiska muskler. Dessa inspelning konfigurationer har använts för att spåra utseende och mognad av joniska strömmar och aktionspotential utbredning i både nervceller och muskler. Genetiska mutationer som påverkar dessa elektriska egenskaper har präglats för att avslöja den molekylära sammansättningen av jonkanaler och tillhörande signalering komplex, och att börja utforska de molekylära mekanismerna av funktionella differentiering. Särskilt fokus har varit montering av synapsförbindelser, både i det centrala nervsystemet och periferi. Den glutamaterg neuromuskulära förbindelsen (NMJ) är mest tillgänglig för en kombination av optisk avbildning och elektrofysiologiska inspelning. Ett glas sug elektrod används för att stimulera de perifera nerver, med excitatoriska trafikplats ström (EJC) inspelningar i spännings spänns-muskler. Denna inspelning konfiguration har använts för att kartlägga funktionella differentiering av synapsen, och spåra utseende och mognaden av presynaptiska fastigheter glutamat release. Dessutom kan postsynaptiska egenskaper analyseras oberoende via jontoforetiskt eller tryck tillämpning av glutamat direkt till muskeln ytan, för att mäta utseende och mognaden av glutamat receptorn fält. Således kan både pre-och postsynaptiska element övervakas separat eller i kombination under embryonala synaptogenesis. Detta system har varit starkt användas för att isolera och karakterisera genetiska mutanter som försämrar embryonala synaps bildning, och därmed avslöjar de molekylära mekanismer som styr specifikation och differentiering av synaps anslutningar och funktionella synaptisk signalering egenskaper.

Watch this Scientific Journal Video about Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo at JoVE.com

Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo

Elektrofysiologiska inspelningar från<em&gt; Drosophila</em&gt; Embryon gör analyser för att utveckla muskler och neuron elektriska egenskaper, samt karaktärisering av funktionella synaptogenesis på glutamaterg neuromuskulära förbindelsen och centrala kolinerga och GABAergic synapser.

Elektrofysiologiska Inspelning i Drosophila Embryo

Drosophila is a premier genetic model for the study of both embryonic development and functional neuroscience. Traditionally, these fields are quite ...

Research

JoVE Journal

Biology

Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo

Assay for Neural Induction in the Chick Embryo

Assay för Neural induktion i Chick Embryo

The chick embryo is a valuable tool in the study of early embryonic development. Its transparency, accessibility and ease of manipulation, make it an ...

Electrophysiological Methods for Recording Synaptic Potentials from the NMJ of Drosophila Larvae

Elektrofysiologiska metoder för inspelning Synaptic Potentials från NMJ av Drosophila Larver

In this video, we describe the electrophysiological methods for recording synaptic transmission at the neuromuscular junction (NMJ) of Drosophila larva. ...

Harvesting and Preparing Drosophila Embryos for Electrophysiological Recording and Other Procedures

Harvesting and Preparing Drosophila Embryos for Electrophysiological Recording and Other Procedures

Skörd och förbereda Drosophila Embryon för Elektrofysiologiska inspelning och andra förfaranden

Microinjection Techniques for Studying Mitosis in the Drosophila melanogaster Syncytial Embryo

Microinjection Techniques for Studying Mitosis in the Drosophila melanogaster Syncytial Embryo

Mikroinjektion Tekniker för att studera Mitos i Drosophila melanogaster Syncytial Embryo

This protocol describes the use of the Drosophila melanogaster syncytial embryo  for studying mitosis1.  Drosophila has useful genetics with a sequenced ...

Visualizing the Beating Heart in Drosophila

Visualizing the Beating Heart in Drosophila

Visualisera bultande hjärta i Drosophila</em

The Drosophila heart has recently emerged as a good model system for examining the genetic, cellular, and molecular mechanisms underlying function in ...

Preparation of embryos for Electron Microscopy of the Drosophila embryonic heart tube

Preparation of embryos for Electron Microscopy of the Drosophila embryonic heart tube

Beredning av embryon för elektronmikroskopi av Drosophila Embryonala hjärta tub

The morphogenesis of the Drosophila  embryonic heart tube has emerged as a valuable model system for studying cell migration, cell-cell adhesion and cell ...

Ambulatory ECG Recording in Mice

Ambulatoriska EKG-registrering hos möss

Telemetric ECG recording in mice is essential to understanding the mechanisms behind arrhythmias, conduction disorders, and sudden cardiac death. Although ...

Optimized Transfection Strategy for Expression and Electrophysiological Recording of Recombinant Voltage-Gated Ion Channels in HEK-293T Cells

Optimerad Transfektion Strategi för Expression och elektrofysiologiska Inspelningen av rekombinanta spänningskänsliga jonkanaler i HEK-293T celler

The in vitro expression and electrophysiological recording of recombinant voltage-gated ion channels in cultured human embryonic kidney cells (HEK-293T) ...

Tracking Morphogenetic Tissue Deformations in the Early Chick Embryo

Spårning Deformationer Morphogenetic Tissue i tidig Chick Embryo

Embryonic epithelia undergo complex deformations (e.g. bending, twisting, folding, and stretching) to form the primitive organs of the early embryo. ...

Live Imaging of Apoptotic Cell Clearance during Drosophila Embryogenesis

Live Imaging of Apoptotic Cell Clearance during Drosophila Embryogenesis

Live avbildning av Apoptotic Cell Utförsäljning under<em&gt; Drosophila</em&gt; Embryogenesis

The  proper elimination of unwanted or aberrant cells through apoptosis and  subsequent phagocytosis (apoptotic cell clearance) is crucial for normal  ...