Name: in vivo ca2+- imaging of mushroom body neurons during olfactory learning in the honey bee
Uploaded: 2009-08-18T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In vivo Ca2+- Imaging of Mushroom Body Neurons During Olfactory Learning in the Honey Bee at JoVE.com

Dit werk wordt gefinancierd door de DFG.

Bee Voorbereiding en Back-fill <ol><li> Catch honingbij voedermachines bij bijenkorf en chillen op het ijs voor immobilisatie. </li><li> Mount in plexiglas opname kamers 3. Fix ogen en thorax aan de wanden van de opname kamer met een laag smeltpunt harde was. </li><li> Trek glazen capillairen zoals vaak gebruikt voor elektrofysiologie en breken bij de tip om een ​​tip diameter van ca. verkrijgen. 10μm. Cover topje van de capillair met kleurstof pasta. Dye pasta bestaat uit een 10:01 mengsel van Fura-2 ...

<ol>
	<li>Joerges, J., K&#252;ttner, A., Galizia, C. G., Menzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Representations+of+odors+and+odor+mixtures+visualized+in+the+honeybee+brain.">Representations of odors and odor mixtures visualized in the honeybee brain.</a> Nature. 387 (6630), 285-288 (1997).</li><li>Rehder, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+the+honeybee's+proboscis+reflex+by+electromyiographic+recordings.">Quantification of the honeybee's proboscis reflex by electromyiographic recordings.</a> J. Insect Physiol. 33, 501-507 (1987).</li><li>Galizia, C. G., Vetter, R. S., Christensen, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+Methods+for+Analyzing+Odor-Evoked+Activity+in+the+Insect+Brain.">Optical Methods for Analyzing Odor-Evoked Activity in the Insect Brain.</a> Methods in Insect Sensory Neuroscience. , 345-388 (2004).</li><li>Mauelshagen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+correlates+of+olfactory+learning+paradigms+in+an+identified+neuron+in+the+honeybee+brain.">Neural correlates of olfactory learning paradigms in an identified neuron in the honeybee brain.</a> J Neurophysiol. 69 (2), 609-625 (1993).</li><li>Kuwabara, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bildung+des+bedingten+Reflexes+von+Pavlovs+Typus+bei+der+Honigbiene+Apis+mellifica,+Hokaido+Univ.">Bildung des bedingten Reflexes von Pavlovs Typus bei der Honigbiene Apis mellifica, Hokaido Univ.</a> Zool. J. Sci. 13, 458-464 (1957).</li><li>Bitterman, M. E., Menzel, R., Fietz, A., Schafer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Classical+conditioning+of+proboscis+extension+in+honeybees+(Apis+mellifera.">Classical conditioning of proboscis extension in honeybees (Apis mellifera.</a> Journal of Comparative Psychology. 97 (2), 107-119 (1983).</li></ol>

In deze presentatie hebben we doorlopen alle stappen om te onderzoeken in vivo calcium signalen in de honingbij. We pasten deze techniek paddestoel lichaam neuronen, maar beeldvorming kan worden gedaan op alle neuronen waarvoor een kleuring techniek kan worden vastgesteld. Hebben we ons gericht op de neuronen in de olfactorische route van de honingbij. De experimenten zijn uitgevoerd in een donkere kamer. De set up is verlicht met een lange golf licht dat uit leugens van de optische waarneming bereik van de hon...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>low melting point hard wax Deiberit 502</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Dr. B&ouml;hme & Sch&ouml;ps Dental GmbH</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>FURA-2 dextran potassium salt, 10 000 MW</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen/Molecular Probes</td>
<td>F-3029</td>
<td>Protect from light.</td>
</tr>
<tr>
<td>tetramethylrhodamine dextran 10 000 MW</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen/Molecular Probes</td>
<td>D-3312</td>
<td>Protect from light.</td>
</tr>
<tr>
<td>n-eicosane</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>21, 927-4</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Kwik Sil Adhesive</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>WPI</td>
<td>KWIK SIL</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Imaging Set-up</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>TILL Photonics</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>CCD camera</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Imago</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>CED</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Texas Instruments</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

in vivo ca2+- imaging of mushroom body neurons during olfactory learning in the honey bee

De in vivo en semi-in vivo voorbereiding voor Calcium beeldvorming is ontwikkeld in ons laboratorium door Joerges, Kuttner en Galizia meer dan tien jaar geleden, aan geur opgeroepen activiteit te meten in de antennale lob 1. Vanaf dat moment is het voortdurend verfijnd en toegepast op verschillende neuropiles in de bij hersenen. We beschrijven hier de voorbereiding die momenteel worden gebruikt in het lab om de activiteit te meten in champignon lichaam neuronen met behulp van een dextran gekoppeld calcium-gevoelige kleurstof (Fura-2). We retrogradely vlek paddestoel lichaam neuronen door het injecteren van kleurstof in hun axonen of soma regio. Wij richten ons op het verminderen van de invasiviteit, om een ​​voorbereiding waarin het nog steeds mogelijk om te trainen met behulp van de bij PER conditionering te bereiken. Wij zijn in staat om toezicht te houden en te kwantificeren de gedragsmatige respons door het opnemen van electro-myograms van de spier die de PER (M17) 2 controles. Na de fysiologische experiment de verbeelde structuren worden onderzocht in meer detail met behulp van confocale scanning microscopie om de identiteit van de neuronen te pakken.

Watch this Scientific Journal Video about In vivo Ca2+- Imaging of Mushroom Body Neurons During Olfactory Learning in the Honey Bee at JoVE.com

In vivo Ca2+- Imaging of Mushroom Body Neurons During Olfactory Learning in the Honey Bee

Bijen kunnen worden geconditioneerd in een appetitief olfactorische leren paradigma (PER-conditioning). Het gebruik van geuren als prikkels, hebben we een methode waarin het gedrag wordt vastgelegd, terwijl tegelijkertijd Calcium Imaging wordt gebruikt om de geur oproept activiteit te meten in champignon lichaam neuronen<em&gt; In vivo</em&gt;.

In vivo Ca 2 + - Beeldvorming van Mushroom Body neuronen tijdens Olfactorische Leren in de Honey Bee

The in vivo and semi-in vivo preparation for Calcium imaging has been developed in our lab by Joerges, K&uuml;ttner and Galizia over ten years ago, to ...

Research

JoVE Journal

Biology

In vivo Ca2+- Imaging of Mushroom Body Neurons During Olfactory Learning in the Honey Bee

Micro-drive Array for Chronic in vivo Recording: Drive Fabrication

Micro-drive Array for Chronic in vivo Recording: Drive Fabrication

Micro-Array aandrijving voor chronische In vivo Opname: Drive Fabrication

Chronic recording of large populations of neurons is a valuable technique for studying the function of neuronal circuits in awake behaving rats. ...

Micro-drive Array for Chronic in vivo Recording: Tetrode Assembly

Micro-drive Array for Chronic in vivo Recording: Tetrode Assembly

Micro-Array aandrijving voor chronische In vivo Opname: Tetrode Assembly

The tetrode, a bundle of four electrodes, has proven to be a valuable tool for the simultaneous recording of multiple neurons in-vivo.  The differential ...

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

Technieken voor Imaging Ca 2 + Signalering in Human Sperm

Fluorescence microscopy of cells loaded with fluorescent, Ca2+-sensitive dyes is used for measurement of spatial and temporal aspects of Ca2+ signaling in ...

Rapid Genetic Analysis of Epithelial-Mesenchymal Signaling During Hair Regeneration

Snelle Genetische analyse van epitheliale-mesenchymale signalering tijdens haar regeneratie

Hair follicle morphogenesis, a complex process requiring interaction between epithelia-derived keratinocytes and the underlying mesenchyme, is an ...

Live Imaging of Apoptotic Cell Clearance during Drosophila Embryogenesis

Live Imaging of Apoptotic Cell Clearance during Drosophila Embryogenesis

Wonen Imaging van apoptotische cel Clearance tijdens<em&gt; Drosophila</em&gt; Embryogenese

The  proper elimination of unwanted or aberrant cells through apoptosis and  subsequent phagocytosis (apoptotic cell clearance) is crucial for normal  ...

Obtaining Specimens with Slowed, Accelerated and Reversed Aging in the Honey Bee Model

Het verkrijgen van exemplaren met vertraagd, versneld en Reversed Aging in de Honey Bee Model

Societies of highly social animals feature vast lifespan differences between closely related individuals. Among social insects, the honey bee is the best ...

Methods for Comparing Nutrients in Beebread Made by Africanized and European Honey Bees and the Effects on Hemolymph Protein Titers

Methoden voor het vergelijken Voedingsstoffen in beebread Gemaakt door Africanized en Europese honingbijen en de Effecten op Hemolymfe Protein Titers

Honey bees obtain nutrients from pollen they collect and store in the hive as beebread. We developed methods to control the pollen source that bees ...

Imaging Local Ca2+ Signals in Cultured Mammalian Cells

Imaging Local Ca2+ Signals in Cultured Mammalian Cells

Imaging Lokale Ca<sup&gt; 2+</sup&gt; Signalen in gekweekte zoogdiercellen

Cytosolic Ca2+ ions regulate numerous aspects of cellular activity in almost all cell types, controlling processes as wide-ranging as gene transcription, ...

High-resolution Time-lapse Imaging and Automated Analysis of Microtubule Dynamics in Living Human Umbilical Vein Endothelial Cells

Hoge-resolutie time-lapse beeldvorming en geautomatiseerde analyse van de dynamiek van microtubuli in Living humane navelstreng endotheelcellen

The physiological process by which new vasculature forms from existing vasculature requires specific signaling events that trigger morphological changes ...

Dissection and Observation of Honey Bee Dorsal Vessel for Studies of Cardiac Function

Dissectie en observatie van Honey Bee Dorsale Vessel voor Studies van de hartfunctie

The European honey bee, Apis mellifera L., is a valuable agricultural and commercial resource noted for producing honey and providing crop pollination ...