Name: in vivo ca2+- imaging of mushroom body neurons during olfactory learning in the honey bee
Uploaded: 2009-08-18T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In vivo Ca2+- Imaging of Mushroom Body Neurons During Olfactory Learning in the Honey Bee at JoVE.com

Questo lavoro è finanziato dalla DFG.

Bee Preparazione e Back-riempiono <ol><li> Cattura api bottinatrici in arnia e freddo in ghiaccio per immobilizzazione. </li><li> Montaggio in plexiglass registrazione camere 3. Fissare gli occhi e torace alle pareti della camera di registrazione con la cera a basso punto di fusione dura. </li><li> Tirare in vetro capillari, comunemente usate per elettrofisiologia e rompere alla punta ad ottenere un diametro punta di ca. 10μm. Coprire punta del capillare con pasta colorante. Pasta colorante è costituito d...

<ol>
	<li>Joerges, J., K&#252;ttner, A., Galizia, C. G., Menzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Representations+of+odors+and+odor+mixtures+visualized+in+the+honeybee+brain.">Representations of odors and odor mixtures visualized in the honeybee brain.</a> Nature. 387 (6630), 285-288 (1997).</li><li>Rehder, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+the+honeybee's+proboscis+reflex+by+electromyiographic+recordings.">Quantification of the honeybee's proboscis reflex by electromyiographic recordings.</a> J. Insect Physiol. 33, 501-507 (1987).</li><li>Galizia, C. G., Vetter, R. S., Christensen, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+Methods+for+Analyzing+Odor-Evoked+Activity+in+the+Insect+Brain.">Optical Methods for Analyzing Odor-Evoked Activity in the Insect Brain.</a> Methods in Insect Sensory Neuroscience. , 345-388 (2004).</li><li>Mauelshagen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+correlates+of+olfactory+learning+paradigms+in+an+identified+neuron+in+the+honeybee+brain.">Neural correlates of olfactory learning paradigms in an identified neuron in the honeybee brain.</a> J Neurophysiol. 69 (2), 609-625 (1993).</li><li>Kuwabara, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bildung+des+bedingten+Reflexes+von+Pavlovs+Typus+bei+der+Honigbiene+Apis+mellifica,+Hokaido+Univ.">Bildung des bedingten Reflexes von Pavlovs Typus bei der Honigbiene Apis mellifica, Hokaido Univ.</a> Zool. J. Sci. 13, 458-464 (1957).</li><li>Bitterman, M. E., Menzel, R., Fietz, A., Schafer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Classical+conditioning+of+proboscis+extension+in+honeybees+(Apis+mellifera.">Classical conditioning of proboscis extension in honeybees (Apis mellifera.</a> Journal of Comparative Psychology. 97 (2), 107-119 (1983).</li></ol>

In questa presentazione abbiamo vissuto tutti i passaggi per indagare nei segnali di calcio in vivo l&#39;ape. Abbiamo applicato questa tecnica ai neuroni del corpo dei funghi, ma l&#39;imaging può essere fatto su tutti i neuroni per cui una tecnica di colorazione può essere stabilita. Ci siamo concentrati sui neuroni nel percorso olfattivo delle api. Gli esperimenti sono tutti eseguiti in una camera oscura. Il set up è illuminato con una luce onda lunga che si trova fuori dal campo della percezione...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>low melting point hard wax Deiberit 502</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Dr. B&ouml;hme & Sch&ouml;ps Dental GmbH</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>FURA-2 dextran potassium salt, 10 000 MW</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen/Molecular Probes</td>
<td>F-3029</td>
<td>Protect from light.</td>
</tr>
<tr>
<td>tetramethylrhodamine dextran 10 000 MW</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen/Molecular Probes</td>
<td>D-3312</td>
<td>Protect from light.</td>
</tr>
<tr>
<td>n-eicosane</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>21, 927-4</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Kwik Sil Adhesive</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>WPI</td>
<td>KWIK SIL</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Imaging Set-up</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>TILL Photonics</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>CCD camera</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Imago</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>CED</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Texas Instruments</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

in vivo ca2+- imaging of mushroom body neurons during olfactory learning in the honey bee

In vivo e semi-in preparazione per l&#39;imaging in vivo di calcio è stato sviluppato nel nostro laboratorio da Joerges, Kuttner e Galizia oltre dieci anni fa, per misurare l&#39;attività odore evocato nel lobo antennale 1. Da allora in poi, è stato continuamente perfezionato e applicato a diversi neuropiles nel cervello delle api. Qui, descriviamo la preparazione attualmente in uso in laboratorio per misurare l&#39;attività nei neuroni del corpo dei funghi con un accoppiato destrano calcio-sensibili colorante (Fura-2). Noi retrogrado macchia neuroni corpo funghi, iniettando colorante nella loro assoni o regione soma. Ci si concentra sulla riduzione della invasività, per ottenere una preparazione in cui è ancora possibile formare l&#39;ape utilizzando PER condizionata. Siamo in grado di monitorare e quantificare la risposta comportamentale di registrazione elettro-myograms dal muscolo che controlla il PER (M17) 2. Dopo l&#39;esperimento fisiologico delle strutture ripreso sono studiati in dettaglio utilizzando la microscopia confocale a scansione per affrontare l&#39;identità dei neuroni.

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In vivo Ca2+- Imaging of Mushroom Body Neurons During Olfactory Learning in the Honey Bee

Le api possono essere condizionate in un paradigma di apprendimento olfattivo appetitivo (PER condizionata). Utilizzando gli odori come stimoli, abbiamo stabilito un metodo in cui il comportamento viene registrato contemporaneamente Imaging calcio è utilizzato per misurare l&#39;attività odore evocato nei neuroni del corpo dei funghi<em&gt; In vivo</em&gt;.

In vivo Ca 2 + - Imaging di neuroni Corpo funghi durante l&#39;apprendimento olfattivo nel Honey Bee

The in vivo and semi-in vivo preparation for Calcium imaging has been developed in our lab by Joerges, K&uuml;ttner and Galizia over ten years ago, to ...

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