Name: in vivo ca2+- imaging of mushroom body neurons during olfactory learning in the honey bee
Uploaded: 2009-08-18T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In vivo Ca2+- Imaging of Mushroom Body Neurons During Olfactory Learning in the Honey Bee at JoVE.com

Detta arbete finansieras av DFG.

Bee Beredning och Back-fylla <ol><li> Catch fälthackar honungsbiet på bikupor och chill på is för immobilisering. </li><li> Montera i plexiglas inspelning kammare 3. Fäst ögon och bröstkorgen på väggarna av inspelningen kammare med låg smältpunkt hårt vax. </li><li> Dra glas kapillärer som vanligen används för elektrofysiologi och bryta i spetsen för att få ett tips diameter på ca. 10μm. Täck toppen av kapillär med färg pasta. Dye klistra består av en 10:01 blandning av Fura-2 dextran...

<ol>
	<li>Joerges, J., K&#252;ttner, A., Galizia, C. G., Menzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Representations+of+odors+and+odor+mixtures+visualized+in+the+honeybee+brain.">Representations of odors and odor mixtures visualized in the honeybee brain.</a> Nature. 387 (6630), 285-288 (1997).</li><li>Rehder, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+the+honeybee's+proboscis+reflex+by+electromyiographic+recordings.">Quantification of the honeybee's proboscis reflex by electromyiographic recordings.</a> J. Insect Physiol. 33, 501-507 (1987).</li><li>Galizia, C. G., Vetter, R. S., Christensen, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+Methods+for+Analyzing+Odor-Evoked+Activity+in+the+Insect+Brain.">Optical Methods for Analyzing Odor-Evoked Activity in the Insect Brain.</a> Methods in Insect Sensory Neuroscience. , 345-388 (2004).</li><li>Mauelshagen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+correlates+of+olfactory+learning+paradigms+in+an+identified+neuron+in+the+honeybee+brain.">Neural correlates of olfactory learning paradigms in an identified neuron in the honeybee brain.</a> J Neurophysiol. 69 (2), 609-625 (1993).</li><li>Kuwabara, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bildung+des+bedingten+Reflexes+von+Pavlovs+Typus+bei+der+Honigbiene+Apis+mellifica,+Hokaido+Univ.">Bildung des bedingten Reflexes von Pavlovs Typus bei der Honigbiene Apis mellifica, Hokaido Univ.</a> Zool. J. Sci. 13, 458-464 (1957).</li><li>Bitterman, M. E., Menzel, R., Fietz, A., Schafer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Classical+conditioning+of+proboscis+extension+in+honeybees+(Apis+mellifera.">Classical conditioning of proboscis extension in honeybees (Apis mellifera.</a> Journal of Comparative Psychology. 97 (2), 107-119 (1983).</li></ol>

I denna presentation har vi gått igenom alla steg för att undersöka in vivo kalcium signaler i honungsbiet. Vi tillämpat denna teknik för att svamp kroppens nervceller, men bildbehandling kan göras på alla nervceller som en målningsteknik kan fastställas. Vi har fokuserat på nervceller i lukt väg av honungsbiet. Experimenten är alla utförs i ett mörkrum. Inrättandet belyses med en lång våg ljus som ligger utanför optiska uppfattningen räckvidd bee och inte uppväcka färgämnen. Det är vikti...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>low melting point hard wax Deiberit 502</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Dr. B&ouml;hme & Sch&ouml;ps Dental GmbH</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>FURA-2 dextran potassium salt, 10 000 MW</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen/Molecular Probes</td>
<td>F-3029</td>
<td>Protect from light.</td>
</tr>
<tr>
<td>tetramethylrhodamine dextran 10 000 MW</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen/Molecular Probes</td>
<td>D-3312</td>
<td>Protect from light.</td>
</tr>
<tr>
<td>n-eicosane</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>21, 927-4</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Kwik Sil Adhesive</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>WPI</td>
<td>KWIK SIL</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Imaging Set-up</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>TILL Photonics</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>CCD camera</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Imago</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>CED</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Texas Instruments</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

in vivo ca2+- imaging of mushroom body neurons during olfactory learning in the honey bee

In vivo-och semi-in vivo inför Kalcium avbildning har utvecklats i vårt labb med Joerges, Kuttner och Galizia över tio år sedan, för att mäta lukt framkallade aktivitet i antennal lob 1. Från och med då har det varit hela tiden förfinats och används på olika neuropiles i biet hjärnan. Här beskriver vi förberedelserna för närvarande används i labbet för att mäta aktiviteten i svamp kroppen nervceller med hjälp av en dextran kopplad kalcium-känsliga färgämne (Fura-2). Vi fläcken retrogradely svamp kroppens nervceller genom att injicera färg i sina axoner eller soma regionen. Vi fokuserar på att minska invasivitet att uppnå ett preparat där det fortfarande är möjligt att träna biet med PER konditionering. Vi har möjlighet att övervaka och mäta beteendemässiga svar genom att spela in elektro-myograms från den muskeln som styr PER (M17) 2. Efter fysiologiska experimentet avbildade strukturer undersöks närmare med hjälp av konfokal scanning mikroskopi för att hantera identitet nervceller.

Watch this Scientific Journal Video about In vivo Ca2+- Imaging of Mushroom Body Neurons During Olfactory Learning in the Honey Bee at JoVE.com

In vivo Ca2+- Imaging of Mushroom Body Neurons During Olfactory Learning in the Honey Bee

Bin kan konditioneras i en appetitive lukt lärande (per-konditionering). Använda lukter som stimuli, etablerade vi en metod där beteende är inspelade samtidigt Kalcium Imaging används för att mäta lukt framkallade aktivitet i svamp kroppens nervceller<em&gt; In vivo</em&gt;.

In vivo Ca 2 + - avbildning av Svamp Body nervceller under Olfactory lära i Honey Bee

The in vivo and semi-in vivo preparation for Calcium imaging has been developed in our lab by Joerges, K&uuml;ttner and Galizia over ten years ago, to ...

Research

JoVE Journal

Biology

In vivo Ca2+- Imaging of Mushroom Body Neurons During Olfactory Learning in the Honey Bee

Micro-drive Array for Chronic in vivo Recording: Drive Fabrication

Micro-drive Array for Chronic in vivo Recording: Drive Fabrication

Micro-drive array för kronisk In vivo Inspelning: Kör Fabrication

Chronic recording of large populations of neurons is a valuable technique for studying the function of neuronal circuits in awake behaving rats. ...

Micro-drive Array for Chronic in vivo Recording: Tetrode Assembly

Micro-drive Array for Chronic in vivo Recording: Tetrode Assembly

Micro-drive array för kronisk In vivo Inspelning: Tetrode Assembly

The tetrode, a bundle of four electrodes, has proven to be a valuable tool for the simultaneous recording of multiple neurons in-vivo.  The differential ...

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

Tekniker för Imaging Ca 2 + Signalering i mänskliga spermier

Fluorescence microscopy of cells loaded with fluorescent, Ca2+-sensitive dyes is used for measurement of spatial and temporal aspects of Ca2+ signaling in ...

Rapid Genetic Analysis of Epithelial-Mesenchymal Signaling During Hair Regeneration

Snabb genetisk analys av Epithelial-mesenkymala Signaling Under Hair Regeneration

Hair follicle morphogenesis, a complex process requiring interaction between epithelia-derived keratinocytes and the underlying mesenchyme, is an ...

Live Imaging of Apoptotic Cell Clearance during Drosophila Embryogenesis

Live Imaging of Apoptotic Cell Clearance during Drosophila Embryogenesis

Live avbildning av Apoptotic Cell Utförsäljning under<em&gt; Drosophila</em&gt; Embryogenesis

The  proper elimination of unwanted or aberrant cells through apoptosis and  subsequent phagocytosis (apoptotic cell clearance) is crucial for normal  ...

Obtaining Specimens with Slowed, Accelerated and Reversed Aging in the Honey Bee Model

Skaffa Prover med avtagit Accelerated och Omvänd Aging i Honey Bee modell

Societies of highly social animals feature vast lifespan differences between closely related individuals. Among social insects, the honey bee is the best ...

Methods for Comparing Nutrients in Beebread Made by Africanized and European Honey Bees and the Effects on Hemolymph Protein Titers

Metoder för Jämföra Näringsämnen i Beebread Gjord av Africanized och europeiska honungsbin och Effekter på Hemolymph Protein Titrar

Honey bees obtain nutrients from pollen they collect and store in the hive as beebread. We developed methods to control the pollen source that bees ...

Imaging Local Ca2+ Signals in Cultured Mammalian Cells

Imaging Local Ca2+ Signals in Cultured Mammalian Cells

Imaging Lokala Ca<sup&gt; 2+</sup&gt; Signaler i odlade däggdjursceller

Cytosolic Ca2+ ions regulate numerous aspects of cellular activity in almost all cell types, controlling processes as wide-ranging as gene transcription, ...

High-resolution Time-lapse Imaging and Automated Analysis of Microtubule Dynamics in Living Human Umbilical Vein Endothelial Cells

Högupplöst time-lapse avbildning och automatiserad analys av mikrotubuli Dynamics i Living Human navelsträngsvenendotelceller

The physiological process by which new vasculature forms from existing vasculature requires specific signaling events that trigger morphological changes ...

Dissection and Observation of Honey Bee Dorsal Vessel for Studies of Cardiac Function

Dissekering och Observation Honey Bee Rygg fartyg för studier av hjärtfunktionen

The European honey bee, Apis mellifera L., is a valuable agricultural and commercial resource noted for producing honey and providing crop pollination ...