Name: an in vitro skin irritation test (sit) using the epiderm reconstructed human epidermal (rhe) model
Uploaded: 2009-07-13T21:00:00
Duration: 21 min 16 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about An In Vitro Skin Irritation Test SIT using the EpiDerm Reconstructed Human Epidermal RHE Model at JoVE.com

فإن الكتاب أود أن أشكر لZEBET في BFR (ألمانيا) ، BASF SE (ألمانيا) ، IIVS شركة (الولايات المتحدة) ، Zet LSL - (النمسا) للمشاركة في موضوع الوسط الدراسي التحقق الدولية للSIT البشرة التعديل (5 ).

<ol>
	<li>Kand&#225;rov&#225;, H., Liebsch, M., Genschow, E., Gerner, I. n. g. r. i. d., Traue, D., Slawik, B., Spielmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+the+EpiDerm+Test+Protocol+for+the+upcoming+ECVAM+Validation+Study+on+In+Vitro+Skin+Irritation+Tests.">Optimization of the EpiDerm Test Protocol for the upcoming ECVAM Validation Study on In Vitro Skin Irritation Tests.</a> ALTEX. 21, 107-114 (2004).</li><li>Kand&#225;rov&#225;, H., Liebsch, M., Gerner, I., Schmidt, E., Genschow, E., Traue, D., Spielmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EpiDerm+Skin+Irritation+Test+Protocol+-+Assessment+of+the+performance+of+the+optimized+test.">EpiDerm Skin Irritation Test Protocol - Assessment of the performance of the optimized test.</a> ATLA. 33, 351-367 (2005).</li><li>Kand&#225;rov&#225;, H., Hayden, P., Klausner, M., Kubilus, J., Kearney, P., Sheasgreen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+Vitro+Skin+Irritation+Test:+Improving+the+Sensitivity+of+the+EpiDerm+Skin+Irritation+Test+Protocol.Accepted+for+publication.">In Vitro Skin Irritation Test: Improving the Sensitivity of the EpiDerm Skin Irritation Test Protocol.Accepted for publication.</a> ATLA. , (2009).</li><li>Spielmann, H., Hoffmann, S., Liebsch, M., Botham, P., Fentem, J., Eskes, C., Roguet, R., Cotovi, J., Cole, T., Worth, A., Heylings, J., Jones, P., Robles, C., Kand&#225;rov&#225;, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ECVAM+International+Validation+Study+on+In+Vitro+Tests+for+Acute+Skin+Irritation:+Report+on+the+Validity+of+the+EPISKIN+and+EpiDerm+Assays+and+on+the+Skin+Integrity+Function+Test.">The ECVAM International Validation Study on In Vitro Tests for Acute Skin Irritation: Report on the Validity of the EPISKIN and EpiDerm Assays and on the Skin Integrity Function Test.</a> ATLA. 35, 559-601 (2007).</li><li>Liebsch, M., Gamer, A., Curren, R., Frank, J., Genschow, E., Tharmann, J., Remmele, M., Bauer, B., Raabe, H., Barnes, N., Hilberer, A., Wilt, N., Lornejad-Sch&#228;fer, M. R., Sch&#228;fer, C., Spiller, E., Hayden, P., Kand&#225;rov&#225;, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Follow-up+validation+of+the+modified+EpiDerm+Skin+Irritation+Test+(SIT):+results+of+a+multicentre+study+of+twenty+reference+test+substances.">Follow-up validation of the modified EpiDerm Skin Irritation Test (SIT): results of a multicentre study of twenty reference test substances.</a> , (2008).</li><li>United Nations. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Globally Harmonized System of Classification and Labeling of Chemicals (GHS). , (2007).</li><li>ESAC. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Statement on the Scientific Validity of In-Vitro Tests for Skin Irritation Testing. , (2008).</li><li>Gupta, K., Rispin, A., Stitzel, K., Coecke, S., Harbell, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ensuring+quality+of+in+vitro+alternative+test+methods:+Issues+and+answers.">Ensuring quality of in vitro alternative test methods: Issues and answers.</a> Regul Toxicol Pharmacol. 43, 219-224 (2005).</li><li>Rispin, A., Stitzel, K., Harbell, J., Klausner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ensuring+quality+of+in+vitro+alternative+test+methods:+Current+practice.">Ensuring quality of in vitro alternative test methods: Current practice.</a> Regul Toxicol Pharmacol. 45, 97-103 (2006).</li></ol>

The authors are employees of MatTek corporation which produce reagents and tools used in this article.

في هذا الفيديو ، لقد أثبتنا في تهيج الجلد البشرة الاختبار (البشرة SIT) المتقدمة والمصادق عليها في المختبر اختبار الجلد تهيج للمواد الكيميائية ، بما في ذلك مكونات مستحضرات التجميل والصناعات الدوائية. عند تنفيذ هذا الأسلوب ، فإنه من المهم للعمل في ظروف معقمة ومتابعة صارمة لبروتوكول التحقق ، لأن الانحراف عن البروتوكول قد يسبب نتائج مختلفة. بعض التعديلات للمقايسة ممكنة ، ومع ذلك ، ينبغي أن تناقش تعديلات على بروتوكول مباشرة مع المؤلفين. والقيد الوحيد لهذه الطريقة هو احتمال حدوث تدخل من المواد الخاضعة للاختبار مع نقطة النهاية MTT. ويجوز للاختبار مادة ملونة أو أحد أن يقلل من MTT مباشرة (وبالتالي يحاكي نشاط نازعة من الميتوكوندريا الخلوية) تتداخل مع نقطة النهاية MTT. ومع ذلك ، فإن هذه المادة المختبرة هي مشكلة فقط إذا في وقت الاختبار MTT (أي 42 ساعة بعد التعرض للمادة الاختبار) كميات كافية من المواد الخاضعة للاختبار لا تزال موجودة على (أو في) الأنسجة. في حالة من هذا الحدث غير المحتمل ، و(صحيح) خفض MTT الأيضية ومساهمة من قبل اختبار المواد الملونة أو (كاذبة) خفض MTT المباشر للمواد الاختبار يمكن قياسها كميا بواسطة إجراء وصفه بالتفصيل في عملية إجراء الفحص القياسية التي توفرها شركة ماتيك

an in vitro skin irritation test (sit) using the epiderm reconstructed human epidermal (rhe) model

تم تطوير اختبار البشرة تهيج الجلد (البشرة SIT)<sup&gt; (1،2،3)</sup&gt; والتحقق من صحتها<sup&gt; (4،5)</sup&gt; ل<em&gt; في المختبر</em&gt; اختبار حساسية الجلد للمواد الكيميائية ، بما في ذلك مكونات مستحضرات التجميل والصناعات الدوائية. وSIT البشرة تستخدم 3D<em&gt; في المختبر</em&gt; إعادة بناء الإنسان البشرة (ري) نموذج البشرة. الإجراء الموصوفة في هذا البروتوكول يسمح للتمييز بين المواد المهيجة للفئة 2 GHS والمهيجات غير<sup&gt; (6)</sup&gt;. يتم إجراء اختبار على مدار فترة زمنية 4 ايام ، ويتألف من ما قبل الحضانة ، و 60 دقيقة من التعرض ، 42 ساعة بعد الحضانة وMTT فحص قدرتها على البقاء. بعد استلام الأنسجة وبين عشية وضحاها ما قبل الحضانة (يوم 0) ، تتعرض الأنسجة موضعيا لاختبار المواد الكيميائية (يوم 1) ، والتي يمكن أن تكون سائلة أو شبه صلبة أو صلبة أو الشمع. وتستخدم ثلاثة أنسجة لاختبار كل مادة كيميائية ، فضلا عن السيطرة الايجابية (5 ٪ AQ حل SDS) ، والتحكم السلبية (DPBS). التعرض للمواد الكيميائية يستمر لمدة 60 دقيقة ، 35 دقيقة منها إبقاء الأنسجة في حاضنة عند 37 درجة مئوية. ثم تتم إزالة المواد اختبار من سطح الانسجة بواسطة إجراء الغسيل واسعة النطاق. ونشف يدرج الأنسجة ونقل إلى متوسطة جديدة. بعد فترة حضانة المرض 24 ساعة (يوم 2) ، ويتم تبادلها في المتوسط. يمكن حفظ المتوسطة لمزيد من التحليل أو السيتوكينات النهاية الأخرى ذات الاهتمام. بعد تبادل المتوسط ​​، يتم تحضين الأنسجة لمدة 18 ساعة إضافية. في نهاية 42h كامل بعد الحضانة (3 أيام) ، يتم نقل الأنسجة في حل MTT الصفراء والمحتضنة لمدة 3 ساعات. يتم استخراج الملح الناتجة formazan الأرجواني والأزرق ، التي شكلت أساسا الأيض الميتوكوندريا ، لمدة 2 ساعة باستخدام الأيزوبروبانول. يتم تحديد الكثافة البصرية للformazan المستخرجة باستخدام مقياس الطيف الضوئي. ويصنف باعتباره مادة كيميائية مهيجة إذا تم تخفيض قابلية الأنسجة النسبي للأنسجة السيطرة السلبية معاملة أقل من 50 ٪. ويمكن استخدام هذا الإجراء والاستبدال الكامل للأرنب في الجسم الحي تهيج الجلد اختبار لتحديد المخاطر ووضع العلامات للمواد الكيميائية في تمشيا مع لوائح الاتحاد الأوروبي<sup&gt; (7)</sup&gt;.

Watch this Scientific Journal Video about An In Vitro Skin Irritation Test SIT using the EpiDerm Reconstructed Human Epidermal RHE Model at JoVE.com

An In Vitro Skin Irritation Test SIT using the EpiDerm Reconstructed Human Epidermal RHE Model

في هذا الفيديو ، نبدي تهيج الجلد البشرة الاختبار (البشرة SIT) المتقدمة والتحقق من صحتها ل<em&gt; في المختبر</em&gt; اختبار حساسية الجلد للمواد الكيميائية ، بما في ذلك مكونات مستحضرات التجميل والصناعات الدوائية.

و في المختبر</emأعيد بناؤها> اختبار حساسية الجلد (SIT) باستخدام البشرة البشرة الإنسان (ري) الموديل

The EpiDerm Skin Irritation test (EpiDerm SIT) was developed (1,2,3) and validated (4,5) for in vitro skin irritation testing of chemicals, including ...

Research

JoVE Journal

Biology

An In Vitro Skin Irritation Test (SIT) using the EpiDerm Reconstructed Human Epidermal (RHE) Model

Christopher Hughes:  An in vitro model for the Study of Angiogenesis (Interview)

Christopher Hughes:  An in vitro model for the Study of Angiogenesis Interview

كريستوفر هيوز : حدث في نموذج المختبر لدراسة الأوعية الدموية (مقابلة)

Christopher C.W. Hughes describes the utility of his culture system for studying angiogenesis in vitro.  He explains the importance of fibroblasts that ...

Mouse Epidermal Neural Crest Stem Cell (EPI-NCSC) Cultures

Mouse Epidermal Neural Crest Stem Cell EPI-NCSC Cultures

الماوس البشرة الجذعية العصبية خلية كريست (EPI - NCSC) الثقافات

EPI-NCSC are remnants of the embryonic neural crest in an adult location, the bulge of hair follicles. They are multipotent stem cells that have the ...

An Allele-specific Gene Expression Assay to Test the Functional Basis of Genetic Associations

الأليل محددة التعبير الجيني الفحص لفحص الأسس الفنية للجمعيات الوراثية

The number of significant genetic associations with common complex traits is constantly increasing. However, most of these associations have not been ...

Imaging C. elegans Embryos using an Epifluorescent Microscope and Open Source Software

Imaging C. elegans Embryos using an Epifluorescent Microscope and Open Source Software

التصوير C. ايليجانس الأجنة باستخدام مجهر Epifluorescent وبرمجيات المصدر المفتوح

Cellular processes, such as chromosome assembly, segregation and cytokinesis,are inherently dynamic. Time-lapse imaging of living cells, using ...

Long-term Lethal Toxicity Test with the Crustacean Artemia franciscana

Long-term Lethal Toxicity Test with the Crustacean Artemia franciscana

على المدى الطويل اختبار السمية المهلكة مع القشريات الأرتيميا franciscana</em

Our research activities target the use of biological methods for the evaluation of environmental quality, with particular reference to saltwater/brackish ...

Differentiation of Newborn Mouse Skin Derived Stem Cells into Germ-like Cells In vitro

Differentiation of Newborn Mouse Skin Derived Stem Cells into Germ-like Cells In vitro

التفريق بين الأطفال حديثي الولادة ماوس خلايا الجلد الجذعية المشتقة في مثل جرثومة خلايا<em&gt; في المختبر</em

Studying  germ cell formation and differentiation has traditionally been very difficult  due to low cell numbers and their location deep within developing ...

Using Caenorhabditis elegans as a Model System to Study Protein Homeostasis in a Multicellular Organism

Using Caenorhabditis elegans as a Model System to Study Protein Homeostasis in a Multicellular Organism

The folding and assembly of proteins is essential for protein function, the long-term health of the cell, and longevity of the organism. Historically, the ...

An In Vitro Model for Studying Cellular Transformation by Kaposi Sarcoma Herpesvirus

An In Vitro Model for Studying Cellular Transformation by Kaposi Sarcoma Herpesvirus

نموذج في المختبر لدراسة التحول الخلوي من هربس كابوزي ساركوما

Kaposi sarcoma (KS) is an unusual tumor composed of proliferating spindle cells that is initiated by infection of endothelial cells (EC) with KSHV, and ...

Isolation of Mouse Epidermal Keratinocytes and Their In Vitro Clonogenic Culture

عزل الخلايا الكيراتينية البشرة الماوس وثقافتهم في المختبر Clonogenic

The protocol described here is a reliable method of harvesting primary keratinocytes from adult female mice (54 &#177; 2 days old) yielding approximately ...

A Murine Model of a Burn Wound Reconstructed with an Allogeneic Skin Graft

نموذج مورين من جرح حرق أعيد بناؤها مع الكسب غير المشروع الجلد الجيني

Trivial superficial wounds heal without complications by primary intention. Deep wounds, such as full thickness burns, heal by secondary intention and ...

و في المختبر اختبار حساسية الجلد (SIT) باستخدام البشرة البشرة الإنسان (ري) الموديل