Name: an in vitro skin irritation test (sit) using the epiderm reconstructed human epidermal (rhe) model
Uploaded: 2009-07-13T21:00:00
Duration: 21 min 16 s
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लेखकों को संशोधित Epiderm एसआईटी (5 मल्टी केंद्र अंतर्राष्ट्रीय मान्यता अध्ययन में भाग लेने के के लिए (जर्मनी) BfR, BASF एसई (जर्मनी), IIVS इंक (यूएसए), Zet - LSL (ऑस्ट्रिया) में ZEBET धन्यवाद करना चाहते हैं ).

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	<li>Kand&#225;rov&#225;, H., Liebsch, M., Genschow, E., Gerner, I. n. g. r. i. d., Traue, D., Slawik, B., Spielmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+the+EpiDerm+Test+Protocol+for+the+upcoming+ECVAM+Validation+Study+on+In+Vitro+Skin+Irritation+Tests.">Optimization of the EpiDerm Test Protocol for the upcoming ECVAM Validation Study on In Vitro Skin Irritation Tests.</a> ALTEX. 21, 107-114 (2004).</li><li>Kand&#225;rov&#225;, H., Liebsch, M., Gerner, I., Schmidt, E., Genschow, E., Traue, D., Spielmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EpiDerm+Skin+Irritation+Test+Protocol+-+Assessment+of+the+performance+of+the+optimized+test.">EpiDerm Skin Irritation Test Protocol - Assessment of the performance of the optimized test.</a> ATLA. 33, 351-367 (2005).</li><li>Kand&#225;rov&#225;, H., Hayden, P., Klausner, M., Kubilus, J., Kearney, P., Sheasgreen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+Vitro+Skin+Irritation+Test:+Improving+the+Sensitivity+of+the+EpiDerm+Skin+Irritation+Test+Protocol.Accepted+for+publication.">In Vitro Skin Irritation Test: Improving the Sensitivity of the EpiDerm Skin Irritation Test Protocol.Accepted for publication.</a> ATLA. , (2009).</li><li>Spielmann, H., Hoffmann, S., Liebsch, M., Botham, P., Fentem, J., Eskes, C., Roguet, R., Cotovi, J., Cole, T., Worth, A., Heylings, J., Jones, P., Robles, C., Kand&#225;rov&#225;, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ECVAM+International+Validation+Study+on+In+Vitro+Tests+for+Acute+Skin+Irritation:+Report+on+the+Validity+of+the+EPISKIN+and+EpiDerm+Assays+and+on+the+Skin+Integrity+Function+Test.">The ECVAM International Validation Study on In Vitro Tests for Acute Skin Irritation: Report on the Validity of the EPISKIN and EpiDerm Assays and on the Skin Integrity Function Test.</a> ATLA. 35, 559-601 (2007).</li><li>Liebsch, M., Gamer, A., Curren, R., Frank, J., Genschow, E., Tharmann, J., Remmele, M., Bauer, B., Raabe, H., Barnes, N., Hilberer, A., Wilt, N., Lornejad-Sch&#228;fer, M. R., Sch&#228;fer, C., Spiller, E., Hayden, P., Kand&#225;rov&#225;, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Follow-up+validation+of+the+modified+EpiDerm+Skin+Irritation+Test+(SIT):+results+of+a+multicentre+study+of+twenty+reference+test+substances.">Follow-up validation of the modified EpiDerm Skin Irritation Test (SIT): results of a multicentre study of twenty reference test substances.</a> , (2008).</li><li>United Nations. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Globally Harmonized System of Classification and Labeling of Chemicals (GHS). , (2007).</li><li>ESAC. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Statement on the Scientific Validity of In-Vitro Tests for Skin Irritation Testing. , (2008).</li><li>Gupta, K., Rispin, A., Stitzel, K., Coecke, S., Harbell, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ensuring+quality+of+in+vitro+alternative+test+methods:+Issues+and+answers.">Ensuring quality of in vitro alternative test methods: Issues and answers.</a> Regul Toxicol Pharmacol. 43, 219-224 (2005).</li><li>Rispin, A., Stitzel, K., Harbell, J., Klausner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ensuring+quality+of+in+vitro+alternative+test+methods:+Current+practice.">Ensuring quality of in vitro alternative test methods: Current practice.</a> Regul Toxicol Pharmacol. 45, 97-103 (2006).</li></ol>

The authors are employees of MatTek corporation which produce reagents and tools used in this article.

इस वीडियो में, हम Epiderm त्वचा जलन (Epiderm एसआईटी) परीक्षण विकसित और कॉस्मेटिक और दवा सामग्री सहित रसायनों के इन विट्रो त्वचा जलन परीक्षण में के लिए मान्य प्रदर्शन किया है. जब इस पद्धति का प्रदर्शन, यह महत्वपूर्ण है सड़न रोकनेवाला परिस्थितियों में काम करने के लिए और सख्ती से मान्य प्रोटोकॉल का पालन करें, प्रोटोकॉल से विचलन के बाद से अलग परिणामों का कारण हो सकता है. परख के कुछ संशोधनों संभव हो रहे हैं, तथापि, लेखकों के साथ प्रोटोकॉल के लिए परिवर्तन सीधे चर्चा की जानी चाहिए. इस पद्धति का ही सीमा MTT endpoint के साथ परीक्षण पदार्थ के एक संभव हस्तक्षेप है. एक रंग का पदार्थ परीक्षण या एक है (और इस तरह सेलुलर mitochondria के डिहाइड्रोजनेज गतिविधि mimics) है कि सीधे MTT कम कर देता है MTT endpoint के साथ हस्तक्षेप कर सकते हैं. हालांकि, इन परीक्षण पदार्थ एक समस्या केवल MTT (यानी 42 घंटे परीक्षण पदार्थ प्रदर्शन के बाद) परीक्षण परीक्षण पदार्थ की पर्याप्त मात्रा के समय में अगर पर अभी भी मौजूद हैं (या) ऊतकों हैं. इस अप्रत्याशित घटना है, (सही) चयापचय MTT कमी और एक रंग का परीक्षण सामग्री द्वारा योगदान या (झूठी) परीक्षण सामग्री द्वारा प्रत्यक्ष MTT कमी परख मानक ऑपरेशन द्वारा प्रदान की प्रक्रिया में विस्तार में वर्णित प्रक्रिया द्वारा मात्रा निर्धारित किया जा सकता है है के मामले में MatTek कॉर्प

an in vitro skin irritation test (sit) using the epiderm reconstructed human epidermal (rhe) model

Epiderm त्वचा जलन परीक्षण (Epiderm एसआईटी) विकसित किया गया था<sup&gt; (1,2,3)</sup&gt; वैधीकृत और<sup&gt; (4,5)</sup&gt; के लिए<em&gt; इन विट्रो में</emरसायनों के&gt; त्वचा जलन परीक्षण कॉस्मेटिक और दवा सामग्री सहित,. Epiderm एसआईटी 3 डी का इस्तेमाल<em&gt; इन विट्रो में</em&gt; खंगाला मानव epidermal (rhe) मॉडल Epiderm. इस प्रोटोकॉल में वर्णित प्रक्रिया GHS श्रेणी के परेशानी 2 और गैर परेशानी के बीच भेदभाव के लिए अनुमति देता है<sup&gt; (6)</sup&gt;. परीक्षण एक 4 दिन समय अवधि के पाठ्यक्रम पर किया जाता है, पूर्व ऊष्मायन, 60 मिनट के जोखिम, 42 घंटे बाद ऊष्मायन और MTT व्यवहार्यता परख के शामिल है. ऊतक रसीद और रातोंरात ऊष्मायन - पूर्व (0 दिन) के बाद, ऊतकों topically परीक्षण (1 दिन) रसायन है, जो तरल, अर्द्ध ठोस, ठोस या मोम किया जा सकता है उजागर कर रहे हैं. तीन ऊतकों प्रत्येक परीक्षण रासायनिक, सकारात्मक नियंत्रण (5%. Aq समाधान एसडीएस) के लिए के रूप में के रूप में अच्छी तरह से, और एक नकारात्मक नियंत्रण (DPBS) के लिए उपयोग किया जाता है. 60 मिनट, ° जिनमें से 35 मिनट के ऊतकों एक मशीन में 37 में रखा जाता है सी. के लिए रासायनिक जोखिम रहता है परीक्षण पदार्थों तब एक व्यापक धोने प्रक्रिया द्वारा ऊतक सतह से हटा कर रहे हैं. ऊतक आवेषण blotted और ताजा माध्यम से तबादला. एक 24 घंटा ऊष्मायन अवधि (दिन 2) के बाद, मध्यम विमर्श किया है. मध्यम साइटोकिन्स या ब्याज की अन्य endpoints के आगे के विश्लेषण के लिए बचाया जा सकता है है. मध्यम आदान - प्रदान के बाद, ऊतकों को एक अतिरिक्त 18 घंटे के लिए incubated हैं. पूरे 42h पोस्ट ऊष्मायन (3 दिन) के अंत में, ऊतकों पीला MTT समाधान में स्थानांतरित कर रहे हैं और 3 घंटे के लिए incubated. परिणामी बैंगनी नीले formazan नमक, mitochondrial चयापचय द्वारा मुख्य रूप से गठन, 2 घंटे isopropanol का उपयोग कर के लिए निकाला जाता है. निकाले formazan ऑप्टिकल घनत्व एक स्पेक्ट्रोफोटोमीटर का उपयोग करने के लिए निर्धारित किया जाता है. एक रासायनिक एक अड़चन है अगर ऊतक नकारात्मक नियंत्रण ऊतकों का इलाज करने के लिए सापेक्ष व्यवहार्यता का 50% से नीचे कम है के रूप में वर्गीकृत है. इस प्रक्रिया में यूरोपीय संघ के नियमों के साथ कतार में vivo में खरगोश त्वचा जलन परीक्षण में खतरा और रसायनों की पहचान लेबलिंग के लिए के पूर्ण स्थानापन्न के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है<sup&gt; (7)</sup&gt;.

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An In Vitro Skin Irritation Test SIT using the EpiDerm Reconstructed Human Epidermal RHE Model

इस वीडियो में, हम Epiderm त्वचा जलन (Epiderm एसआईटी) परीक्षण के लिए विकसित और मान्य का प्रदर्शन<em&gt; इन विट्रो में</emरसायनों के&gt; त्वचा जलन परीक्षण कॉस्मेटिक और दवा सामग्री सहित,.

एक इन विट्रो में त्वचा जलन टेस्ट (एसआईटी) Epiderm का उपयोग मानव Epidermal मॉडल (rhe) खंगाला

The EpiDerm Skin Irritation test (EpiDerm SIT) was developed (1,2,3) and validated (4,5) for in vitro skin irritation testing of chemicals, including ...

Research

JoVE Journal

Biology

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