Name: an in vitro skin irritation test (sit) using the epiderm reconstructed human epidermal (rhe) model
Uploaded: 2009-07-13T21:00:00
Duration: 21 min 16 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about An In Vitro Skin Irritation Test SIT using the EpiDerm Reconstructed Human Epidermal RHE Model at JoVE.com

Авторы хотели бы поблагодарить ZEBET на BfR (Германия), BASF SE (Германия), IIVS Inc (США), Зет-LSL (Австрия) для участия в Multi-центр Международный Проверка Изучение изменения эпидермиса SIT (5 ).

<ol>
	<li>Kand&#225;rov&#225;, H., Liebsch, M., Genschow, E., Gerner, I. n. g. r. i. d., Traue, D., Slawik, B., Spielmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+the+EpiDerm+Test+Protocol+for+the+upcoming+ECVAM+Validation+Study+on+In+Vitro+Skin+Irritation+Tests.">Optimization of the EpiDerm Test Protocol for the upcoming ECVAM Validation Study on In Vitro Skin Irritation Tests.</a> ALTEX. 21, 107-114 (2004).</li><li>Kand&#225;rov&#225;, H., Liebsch, M., Gerner, I., Schmidt, E., Genschow, E., Traue, D., Spielmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EpiDerm+Skin+Irritation+Test+Protocol+-+Assessment+of+the+performance+of+the+optimized+test.">EpiDerm Skin Irritation Test Protocol - Assessment of the performance of the optimized test.</a> ATLA. 33, 351-367 (2005).</li><li>Kand&#225;rov&#225;, H., Hayden, P., Klausner, M., Kubilus, J., Kearney, P., Sheasgreen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+Vitro+Skin+Irritation+Test:+Improving+the+Sensitivity+of+the+EpiDerm+Skin+Irritation+Test+Protocol.Accepted+for+publication.">In Vitro Skin Irritation Test: Improving the Sensitivity of the EpiDerm Skin Irritation Test Protocol.Accepted for publication.</a> ATLA. , (2009).</li><li>Spielmann, H., Hoffmann, S., Liebsch, M., Botham, P., Fentem, J., Eskes, C., Roguet, R., Cotovi, J., Cole, T., Worth, A., Heylings, J., Jones, P., Robles, C., Kand&#225;rov&#225;, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ECVAM+International+Validation+Study+on+In+Vitro+Tests+for+Acute+Skin+Irritation:+Report+on+the+Validity+of+the+EPISKIN+and+EpiDerm+Assays+and+on+the+Skin+Integrity+Function+Test.">The ECVAM International Validation Study on In Vitro Tests for Acute Skin Irritation: Report on the Validity of the EPISKIN and EpiDerm Assays and on the Skin Integrity Function Test.</a> ATLA. 35, 559-601 (2007).</li><li>Liebsch, M., Gamer, A., Curren, R., Frank, J., Genschow, E., Tharmann, J., Remmele, M., Bauer, B., Raabe, H., Barnes, N., Hilberer, A., Wilt, N., Lornejad-Sch&#228;fer, M. R., Sch&#228;fer, C., Spiller, E., Hayden, P., Kand&#225;rov&#225;, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Follow-up+validation+of+the+modified+EpiDerm+Skin+Irritation+Test+(SIT):+results+of+a+multicentre+study+of+twenty+reference+test+substances.">Follow-up validation of the modified EpiDerm Skin Irritation Test (SIT): results of a multicentre study of twenty reference test substances.</a> , (2008).</li><li>United Nations. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Globally Harmonized System of Classification and Labeling of Chemicals (GHS). , (2007).</li><li>ESAC. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Statement on the Scientific Validity of In-Vitro Tests for Skin Irritation Testing. , (2008).</li><li>Gupta, K., Rispin, A., Stitzel, K., Coecke, S., Harbell, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ensuring+quality+of+in+vitro+alternative+test+methods:+Issues+and+answers.">Ensuring quality of in vitro alternative test methods: Issues and answers.</a> Regul Toxicol Pharmacol. 43, 219-224 (2005).</li><li>Rispin, A., Stitzel, K., Harbell, J., Klausner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ensuring+quality+of+in+vitro+alternative+test+methods:+Current+practice.">Ensuring quality of in vitro alternative test methods: Current practice.</a> Regul Toxicol Pharmacol. 45, 97-103 (2006).</li></ol>

The authors are employees of MatTek corporation which produce reagents and tools used in this article.

В этом видео, мы продемонстрировали, раздражение эпидермиса кожи испытаний (эпидермиса SIT) разработаны и утверждены для экстракорпорального раздражение кожи испытания химических веществ, в том числе косметических и фармацевтических ингредиентов. При выполнении этого метода, очень важно для работы в асептических условиях и строго соблюдать протокол проверки, так как отклонение от протокола может привести к различным результатам. Некоторые модификации данного метода возможны, однако, изменения в протоколе должны обсуждаться непосредственно с авторами. Единственным ограничением этого метода является возможное вмешательство испытуемого вещества с конечной точкой МТТ. Цветные испытуемого вещества или тот, который непосредственно уменьшает МТТ (и тем самым имитирует активность дегидрогеназы сотовой митохондрии) могут помешать МТТ конечной точки. Однако, эти испытания вещества проблемой, только если на момент теста МТТ (т.е. 42 часов после испытания воздействия вещества) достаточное количество испытуемого вещества все еще присутствуют на (или в) тканей. В случае, если этого маловероятном случае, (истина), метаболические снижение МТТ и вклад цветного материала теста или (ложь) прямого восстановления МТТ по тестового материала может быть количественно процедура подробно описана в анализе Стандартная процедура Операция предоставляемые Маттек корпорации

an in vitro skin irritation test (sit) using the epiderm reconstructed human epidermal (rhe) model

Раздражение кожи эпидермиса тест (эпидермиса SIT) была разработана<sup&gt; (1,2,3)</sup&gt; И утверждены<sup&gt; (4,5)</sup&gt; Для<em&gt; В пробирке</em&gt; Раздражение кожи испытания химических веществ, в том числе косметических и фармацевтических ингредиентов. SIT эпидермиса использует 3D<em&gt; В пробирке</em&gt; Реконструированы человеческого эпидермиса (RHE) модель эпидермиса. Процедура, описанная в этом протоколе позволяет дискриминации между раздражителями категории СГС 2 и не раздражающие<sup&gt; (6)</sup&gt;. Тест выполняется в течение 4-дневный период времени, состоящий из предварительной инкубации, 60 минут воздействия, 42 часа после инкубации и анализа МТТ жизнеспособность. После получения тканей и ночевка предварительной инкубации (день 0), ткани местно воздействию испытаний химических веществ (день 1), которая может быть жидкой, полутвердых, твердых или воском. Три ткани используются для каждого теста химической, а также для положительного контроля (5% водн. SDS раствора), и отрицательного контроля (DPBS). Химическое воздействие длится 60 минут, 35 минут которой тканей находятся в инкубаторе при температуре 37 ° C. Испытание веществ удаляется из тканей поверхности обширных процедуру мытья. Ткани вставки уничтожены и переданы в свежую среду. После 24 ч инкубации период (день 2), средний которой они обмениваются. Среды могут быть сохранены для дальнейшего анализа цитокинов или других конечных точек интереса. После среда обмена, ткани инкубировали в течение еще 18 часов. В конце всей 42h после инкубации (день 3), тканей, передаются в желтый раствор МТТ и инкубировали в течение 3 часов. Результирующая фиолетово-синие формазана соль, формируется в основном по митохондриальной обмен веществ, добывается в течение 2 часов при использовании изопропанола. Оптическая плотность извлеченные формазана определяется с помощью спектрофотометра. Химические классифицируется как раздражитель, если жизнеспособности тканей по отношению к отрицательным контролем лечение тканей снижается ниже 50%. Эта процедура может быть использована в качестве полной замены в естественных условиях кролика раздражение кожи тест для определения опасности и маркировки химических веществ в соответствии с нормами ЕС<sup&gt; (7)</sup&gt;.

Watch this Scientific Journal Video about An In Vitro Skin Irritation Test SIT using the EpiDerm Reconstructed Human Epidermal RHE Model at JoVE.com

An In Vitro Skin Irritation Test SIT using the EpiDerm Reconstructed Human Epidermal RHE Model

В этом видео, мы демонстрируем раздражение эпидермиса кожи испытаний (эпидермиса SIT) разработаны и утверждены для<em&gt; В пробирке</em&gt; Раздражение кожи испытания химических веществ, в том числе косметических и фармацевтических ингредиентов.

In Vitro Раздражение кожи испытаний (ГСИ), используя эпидермиса реконструкции человеческого эпидермального (RHE) Модель

The EpiDerm Skin Irritation test (EpiDerm SIT) was developed (1,2,3) and validated (4,5) for in vitro skin irritation testing of chemicals, including ...

Research

JoVE Journal

Biology

An In Vitro Skin Irritation Test (SIT) using the EpiDerm Reconstructed Human Epidermal (RHE) Model

Christopher Hughes:  An in vitro model for the Study of Angiogenesis (Interview)

Christopher Hughes:  An in vitro model for the Study of Angiogenesis Interview

Кристофер Хьюз: в пробирке модель для изучения ангиогенеза (Интервью)

Christopher C.W. Hughes describes the utility of his culture system for studying angiogenesis in vitro.  He explains the importance of fibroblasts that ...

Mouse Epidermal Neural Crest Stem Cell (EPI-NCSC) Cultures

Mouse Epidermal Neural Crest Stem Cell EPI-NCSC Cultures

Мышь эпидермального нервного гребня стволовых клеток (EPI-NCSC) Культур

EPI-NCSC are remnants of the embryonic neural crest in an adult location, the bulge of hair follicles. They are multipotent stem cells that have the ...

An Allele-specific Gene Expression Assay to Test the Functional Basis of Genetic Associations

Аллель-специфичная Анализ экспрессии генов для тестирования функциональной основе генетических ассоциаций

The number of significant genetic associations with common complex traits is constantly increasing. However, most of these associations have not been ...

Imaging C. elegans Embryos using an Epifluorescent Microscope and Open Source Software

Imaging C. elegans Embryos using an Epifluorescent Microscope and Open Source Software

Изображений С. Элеганс Эмбрионы использованием Epifluorescent Микроскоп и открытое программное обеспечение

Cellular processes, such as chromosome assembly, segregation and cytokinesis,are inherently dynamic. Time-lapse imaging of living cells, using ...

Long-term Lethal Toxicity Test with the Crustacean Artemia franciscana

Long-term Lethal Toxicity Test with the Crustacean Artemia franciscana

Долгосрочные Смертельное испытания токсичности с ракообразных Артемия franciscana</em

Our research activities target the use of biological methods for the evaluation of environmental quality, with particular reference to saltwater/brackish ...

Differentiation of Newborn Mouse Skin Derived Stem Cells into Germ-like Cells In vitro

Differentiation of Newborn Mouse Skin Derived Stem Cells into Germ-like Cells In vitro

Дифференциация новорожденных кожи мышей стволовые клетки в зародышевые-подобных клеток<em&gt; В пробирке</em

Studying  germ cell formation and differentiation has traditionally been very difficult  due to low cell numbers and their location deep within developing ...

Using Caenorhabditis elegans as a Model System to Study Protein Homeostasis in a Multicellular Organism

Using Caenorhabditis elegans as a Model System to Study Protein Homeostasis in a Multicellular Organism

The folding and assembly of proteins is essential for protein function, the long-term health of the cell, and longevity of the organism. Historically, the ...

An In Vitro Model for Studying Cellular Transformation by Kaposi Sarcoma Herpesvirus

An In Vitro Model for Studying Cellular Transformation by Kaposi Sarcoma Herpesvirus

В Vitro модель для изучения клеточных трансформации, саркома Капоши герпеса

Kaposi sarcoma (KS) is an unusual tumor composed of proliferating spindle cells that is initiated by infection of endothelial cells (EC) with KSHV, and ...

Isolation of Mouse Epidermal Keratinocytes and Their In Vitro Clonogenic Culture

Изоляция мыши Эпидермальных кератиноцитов и их в пробирке клоногенной культуры

The protocol described here is a reliable method of harvesting primary keratinocytes from adult female mice (54 &#177; 2 days old) yielding approximately ...

A Murine Model of a Burn Wound Reconstructed with an Allogeneic Skin Graft

Мурин Модель ожога раны реконструирована с аллогенной кожи трансплантата

Trivial superficial wounds heal without complications by primary intention. Deep wounds, such as full thickness burns, heal by secondary intention and ...