Name: making gynogenetic diploid zebrafish by early pressure
Uploaded: 2009-06-30T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Making Gynogenetic Diploid Zebrafish by Early Pressure at JoVE.com

تم تطوير أساليب التخصيب في المختبر وdiploids gynogenetic لالزرد ووكر Charline في مختبر جورج Streisinger في جامعة اوريجون في 1970s و 1980s. الطريقة الموضحة هنا هي من دون تغيير بروتوكولات Charline والتي تتوفر في كتاب الكامل في اسماك الزرد 3. تم تطوير أساليب التخصيب في المختبر وdiploids gynogenetic لالزرد ووكر Charline في مختبر جورج Streisinger في جامعة اوريجون في 1970s و 1980s. الطريقة الموضحة هنا هي من دون تغيير بروتوكولات Charline والتي تتوفر في كتاب الكامل في اسماك الزرد 3.

نظرة عامة على الضغط المبكر ملاحظة : وصفات للعديد من الكواشف المستخدمة في هذا البروتوكول مثل tricaine ، أسماك المياه المالحة ، وهانكس على شبكة الإنترنت في الفصل 10 من كتاب اسماك الزرد 3 ( <a href="http://zfin.org/zf_info/zfbook/zfbk.html">http://zfin.org/zf_info/zfbook...

<ol>
	<li>Streisinger, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Segregation+analyses+and+gene-centromere+distances+in+zebrafish.">Segregation analyses and gene-centromere distances in zebrafish.</a> Genetics. 112 (2), 311-311 (1986).</li><li>Streisinger, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+of+clones+of+homozygous+diploid+zebra+fish+(Brachydanio+rerio).">Production of clones of homozygous diploid zebra fish (Brachydanio rerio).</a> Nature. 291 (5813), 293-293 (1981).</li><li>Westerfield, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Zebrafish Book: A guide for the laboratory use of zebrafish (Danio rerio). , (2000).</li><li>Johnson, S. L., Africa, D., Horne, S., Postlethwait, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Half-tetrad+analysis+in+zebrafish:+mapping+the+ros+mutation+and+the+centromere+of+linkage+group+I.">Half-tetrad analysis in zebrafish: mapping the ros mutation and the centromere of linkage group I.</a> Genetics. 139 (4), 1727-1727 (1995).</li><li>Beattie, C. E., Raible, D. W., Henion, P. D., Eisen, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+pressure+screens.">Early pressure screens.</a> Methods Cell Biol. 237 (71), 2575-25 (1999).</li><li>Johnson, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Centromere-linkage+analysis+and+consolidation+of+the+zebrafish+genetic+map.">Centromere-linkage analysis and consolidation of the zebrafish genetic map.</a> Genetics. 142 (4), 1277-1277 (1996).</li><li>Trede, N. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+mutants+with+disrupted+early+T-cell+and+thymus+development+identified+in+early+pressure+screen.">Zebrafish mutants with disrupted early T-cell and thymus development identified in early pressure screen.</a> Dev Dyn. 237 (9), 2575-2575 (1999).</li></ol>

فمن المهم للتأكد من أن الأجنة التي تنتجها هذه الطريقة هي diploids gynogenetic صحيحا. والضوابط ، وتوليد مخلب مضاعفا من البيض العادي (عن طريق الحفاظ على ادخار بعض الحيوانات المنوية دون تعطيل الأشعة فوق البنفسجية) ومجموعة من الأجنة فرداني (عن طريق الحفاظ على مخلب جانبا من البويضا...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Tricaine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Watch glass</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>French Press</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Pressure cylinder</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Instant ocean</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Pasteur pipettes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cut off the narrow end, fire polish</td>
</tr>
<tr>
<td>UV cross-linker</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>microcapillaries</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

making gynogenetic diploid zebrafish by early pressure

تغاير الزيجوت في حقيقيات النوى مضاعفا كثيرا ما يجعل الدراسات الجينية مرهقة. الأساليب التي تنتج ذرية صالحة ضعفاني متماثل مباشرة من الإناث متخالف يسمح فحص الإناث mutagenized F1 مباشرة عن الطفرات الضارة في الشاشة تسارع الوراثية إلى الأمام. Streisinger وآخرون.<sup&gt; 1،2</supوصف&gt; طرق لجعل gynogenetic الزرد مضاعفا (متماثل) من خلال تفعيل البيض الزرد مع الحيوانات المنوية للضوء الأشعة فوق البنفسجية ومنع المعطل إما الانتصافي الثانية أو الدرجة الاولى لاقحي الخلية باستخدام العلاجات الفيزيائية (الحرارة أو الضغط) التي ميكروتثبول deploymerize. &quot;الضغط المبكر&quot; (EP) كتل الأسلوب الثاني الانقسام المنصف ، والذي يحدث بعد فترة قصيرة من الإخصاب. الطريقة EP تنتج نسبة عالية من أجنة قابلة للحياة التي يمكن أن تتطور إلى البالغين خصبة من كلا الجنسين. الأسلوب يولد الأجنة التي يتم متماثل في جميع مواضع باستثناء تلك التي تم فصلها عن السنترومير من خلال إعادة التركيب خلال الانقسام الاختزالي أولا يتم الكشف عن طفرات متماثل الجينات في براثن EP ما بين 50 ٪ للمواضع القسيم المركزي ، وأقل من 1 ٪ لمواضع telomeric. ويرد هذا الأسلوب حرفيا من كتاب اسماك الزرد<sup&gt; 3</sup&gt;.

Watch this Scientific Journal Video about Making Gynogenetic Diploid Zebrafish by Early Pressure at JoVE.com

Making Gynogenetic Diploid Zebrafish by Early Pressure

هذا هو أسلوب لتوليد اجنة gynogenetic الزرد مضاعفا (الأجنة التي الوراثية فقط المساهمة يأتي من الأم) من خلال منع الانتصافي الدرجة الثانية مباشرة بعد التسميد مع الحيوانات المنوية للضوء فوق البنفسجي المعطل. EP الأجنة ليست متماثلة اللواقح تماما بسبب إعادة التركيب خلال تقسيم الانتصافي الأولى ، ومع ذلك فهي متماثل في جميع مواضع التي لم يتم فصلها عن السنترومير من خلال إعادة التركيب.

جعل Gynogenetic اسماك الزرد ضعفاني بواسطة الضغط المبكر

Heterozygosity in diploid eukaryotes often makes genetic studies cumbersome. Methods that produce viable homozygous diploid offspring directly from ...

Research

JoVE Journal

Biology

Live Imaging of the Zebrafish Embryonic Brain by Confocal Microscopy

يعيش تصوير الدماغ الجنينية اسماك الزرد بواسطة الميكروسكوب متحد البؤر

In this video, we demonstrate the method our lab has developed to analyze the cell shape changes and rearrangements required to bend and fold the ...

Brain Banking: Making the Most of your Research Specimens

الخدمات المصرفية للدماغ : جعل معظم العينات بحوث الخاص

Unbiased stereology is a method for accurately and efficiently estimating the total neuron number (or other cell type) in a given area of interest1.  To ...

Measuring Blood Pressure in Mice using Volume Pressure Recording, a Tail-cuff Method

قياس ضغط الدم في الفئران باستخدام تسجيل حجم الضغط ، وهو أسلوب الذيل الكفة

The CODA 8-Channel High Throughput Non-Invasive Blood Pressure system measures the blood pressure in up to 8 mice or rats simultaneously. The CODA ...

Making MR Imaging Child's Play - Pediatric Neuroimaging Protocol, Guidelines and Procedure

صنع اللعب MR التصوير الطفل -- البروتوكول تصوير الأعصاب للأطفال ، والمبادئ التوجيهية والإجراءات

Within the last decade there has been an increase in the use of structural and functional magnetic resonance imaging (fMRI) to investigate the neural ...

Generating Chimeric Zebrafish Embryos by Transplantation

توليد الأجنة اسماك الزرد همي بواسطة زرع

One of the most powerful tools used to gain insight into complex developmental processes is the analysis of chimeric embryos. A chimera is defined as an ...

Atmospheric-pressure Molecular Imaging of Biological Tissues and Biofilms by LAESI Mass Spectrometry

الضغط الجوي التصوير الجزيئي من الأنسجة البيولوجية والأغشية الحيوية التي LAESI طيف الكتلة

Ambient ionization methods in mass spectrometry allow analytical investigations to be performed directly on a tissue or biofilm under native-like ...

Direct Analysis of Single Cells by Mass Spectrometry at Atmospheric Pressure

التحليل المباشر للخلايا واحدة بواسطة الطيف الكتلي في الضغط الجوي

Analysis of biochemicals in single cells is important for understanding cell metabolism, cell cycle, adaptation, disease states, etc. Even the same cell ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

في الجسم الحي من Electroporation Morpholinos في شبكية العين اسماك الزرد الكبار

Many devastating inherited eye diseases result in progressive and irreversible blindness because humans cannot regenerate dying or diseased retinal ...

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

في فيفو تتبع 4 الأبعاد للالجذعية المكونة للدم والسلف الكبار في خلايا الفأر قبي نخاع العظم

Through a delicate balance between quiescence and proliferation, self renewal and production of differentiated progeny, hematopoietic stem cells (HSCs) ...

Production of Haploid Zebrafish Embryos by In Vitro Fertilization

Production of Haploid Zebrafish Embryos by In Vitro Fertilization

إنتاج فرداني الزرد الأجنة عن طريق<em&gt; في المختبر</em&gt; التسميد

The zebrafish has become a mainstream vertebrate model that is relevant for many disciplines of scientific study. Zebrafish are especially well suited for ...