Name: making gynogenetic diploid zebrafish by early pressure
Uploaded: 2009-06-30T00:00:00
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체외의 수정 및 gynogenetic의 diploids에 대한 방법은 1970 년대와 1980 년대 오레곤 대학의 조지 Streisinger의 실험실에 챠라인 워커에 의해 zebrafish를 위해 개발되었습니다. 방법은 여기에 설명된 것은 Zebrafish 도서 3 전체에서 사용할 수 있습니다 챠라인의 프로토콜에서 변하지입니다. 체외의 수정 및 gynogenetic의 diploids에 대한 방법은 1970 년대와 1980 년대 오레곤 대학의 조지 Streisinger의 실험실에 챠라인 워커에 의해 zebrafish를 위해 개발되었습니다. 방법은 여기에 설명된 것은 Zebrafish 도서 3 전체에서 사용할 수 있습니다 챠라인의 프로토콜에서 변하지입니다.

초기 압력의 개요 참고 사항 : tricaine, 생선 물 행크스 호수로이 프로토콜에서 사용되는 시약의 많은 요리법 Zebrafish 도서 3 조 (의 10 장에서 사용할 수있는 온라인 <a href="http://zfin.org/zf_info/zfbook/zfbk.html">http://zfin.org/zf_info/zfbook/zfbk.html</a> ) <ol><li> UV inactivated 정자를 사용하여 체외의 수정에 의해 배아를 생성합니다. </li><li> 즉시 계란 물을 브림에 가득찬 유리관 (플라?...

<ol>
	<li>Streisinger, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Segregation+analyses+and+gene-centromere+distances+in+zebrafish.">Segregation analyses and gene-centromere distances in zebrafish.</a> Genetics. 112 (2), 311-311 (1986).</li><li>Streisinger, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+of+clones+of+homozygous+diploid+zebra+fish+(Brachydanio+rerio).">Production of clones of homozygous diploid zebra fish (Brachydanio rerio).</a> Nature. 291 (5813), 293-293 (1981).</li><li>Westerfield, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Zebrafish Book: A guide for the laboratory use of zebrafish (Danio rerio). , (2000).</li><li>Johnson, S. L., Africa, D., Horne, S., Postlethwait, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Half-tetrad+analysis+in+zebrafish:+mapping+the+ros+mutation+and+the+centromere+of+linkage+group+I.">Half-tetrad analysis in zebrafish: mapping the ros mutation and the centromere of linkage group I.</a> Genetics. 139 (4), 1727-1727 (1995).</li><li>Beattie, C. E., Raible, D. W., Henion, P. D., Eisen, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+pressure+screens.">Early pressure screens.</a> Methods Cell Biol. 237 (71), 2575-25 (1999).</li><li>Johnson, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Centromere-linkage+analysis+and+consolidation+of+the+zebrafish+genetic+map.">Centromere-linkage analysis and consolidation of the zebrafish genetic map.</a> Genetics. 142 (4), 1277-1277 (1996).</li><li>Trede, N. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+mutants+with+disrupted+early+T-cell+and+thymus+development+identified+in+early+pressure+screen.">Zebrafish mutants with disrupted early T-cell and thymus development identified in early pressure screen.</a> Dev Dyn. 237 (9), 2575-2575 (1999).</li></ol>

이 방법에 의해 만들어진 배아 사실 gynogenetic의 diploids되었는지 확인하는 것이 중요합니다. 컨트롤로 정상 diploid 달걀 (UV - 불활 성화없이 정자의 일부를 별도로 유지하여)와 haploid 배아 (EP 절차를 거치지 않고 UV 정자와 함께 수정된 계란의 클러치를 별도로 유지하여)의 클러치의 클러치를 생성합니다. 일일 게시물 수정의 haploid의 배아에서 짧은 몸 축, 불규칙한 두뇌와 체절의 형태 있습니다. Haploi...

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		<div>
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		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Tricaine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Watch glass</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>French Press</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Pressure cylinder</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Instant ocean</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Pasteur pipettes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cut off the narrow end, fire polish</td>
</tr>
<tr>
<td>UV cross-linker</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>microcapillaries</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

making gynogenetic diploid zebrafish by early pressure

diploid의 eukaryotes에 Heterozygosity 종종 유전자 연구 성가신합니다. heterozygous 여성에서 직접 가능한 homozygous diploid의 자손을 생산 방법은 F1 mutagenized 여성이 가속 앞으로 유전 화면에 해로운 돌연변이 직접 검사를 할 수 있습니다. Streisinger 외.<sup&gt; 1,2</sup&gt;는 자외선 - inactivated 정자와 zebrafish 달걀을 활성화하고 물리 치료 (열 또는 압력)을 deploymerize microtubules를 사용하여 두 번째 meiotic 또는 첫 번째 접합자의 세포 분열 중 하나를 방지하여 gynogenetic (homozygous) diploid의 zebrafish를 만들기위한 방법을 설명했다. 빠른 시일 내에 수정 후 발생하는 &quot;초기 압력&quot;(EP) 메서드 블록 감수 분열 II. EP 방법도 섹스의 비옥한 성인 개발할 수 있습니다 가능한 배아의 높은 비율을 생산하고 있습니다. 방법은 세포의 감수 분열 I. Homozygous 변이가 centromeric loci 50 %와 telomeric loci에 대한 1 % 미만 사이에서 EP의 클러치에서 감지하는 동안 재조합하여 centromere에서 분리된 것을 제외한 모든 loci에 homozygous 아르 배아를 생성합니다. 이 방법은 Zebrafish 주소록에서 그대로 재현<sup&gt; 3</sup&gt;.

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Making Gynogenetic Diploid Zebrafish by Early Pressure

이것은 바로 자외선 - inactivated 정자와 수정 후 두 번째 meiotic 부서 차단하여 gynogenetic의 diploid의 zebrafish의 배아 (단 유전적 기여 어머니의 유래 배아)를 생성하는 방법입니다. EP의 배아는 첫 번째 meiotic 부문 중 재조합에 의해 완전히 homozygous하지 않습니다, 그러나 그들은 재조합하여 centromere에서 분리되지 않은 모든 loci에 homozygous 있습니다.

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