Name: making gynogenetic diploid zebrafish by early pressure
Uploaded: 2009-06-30T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Making Gynogenetic Diploid Zebrafish by Early Pressure at JoVE.com

In vitro fertilizasyon ve gynogenetic diploitler Yöntemleri Charline Walker tarafından 1970&#39;lerde ve 1980&#39;lerde Oregon Üniversitesi&#39;nden George Streisinger laboratuarında zebrafish için geliştirilmiştir. Burada anlatılan yöntemi Charline Zebra balığı Kitap 3 tam mevcuttur protokollerini değişmez. In vitro fertilizasyon ve gynogenetic diploitler Yöntemleri Charline Walker tarafından 1970&#39;lerde ve 1980&#39;lerde Oregon Üniversitesi&#39;nden George Streisinger laboratuarında zebrafish için geliştirilmiştir. Burada anlatılan yöntemi Charline Zebra balığı Kitap 3 tam mevcuttur protokollerini değişmez.

Erken basınç Genel Bakış Not: tricaine, balık suyu ve Hanks, tuzlu su gibi, bu protokolde kullanılan reaktiflerin çoğu için yemek tarifleri Zebra balığı Kitap 3 (bölüm 10 <a href="http://zfin.org/zf_info/zfbook/zfbk.html">online</a> http://zfin.org/zf_info/zfbook/zfbk.html ) <ol><li> UV inaktive sperm kullanılarak in vitro fertilizasyon embriyolar üretin. </li><li> Hemen yumurta su ile ağzına kadar dolu bir cam flakon (plastik bir ek bileşenini kap ile birlikt...

<ol>
	<li>Streisinger, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Segregation+analyses+and+gene-centromere+distances+in+zebrafish.">Segregation analyses and gene-centromere distances in zebrafish.</a> Genetics. 112 (2), 311-311 (1986).</li><li>Streisinger, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+of+clones+of+homozygous+diploid+zebra+fish+(Brachydanio+rerio).">Production of clones of homozygous diploid zebra fish (Brachydanio rerio).</a> Nature. 291 (5813), 293-293 (1981).</li><li>Westerfield, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Zebrafish Book: A guide for the laboratory use of zebrafish (Danio rerio). , (2000).</li><li>Johnson, S. L., Africa, D., Horne, S., Postlethwait, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Half-tetrad+analysis+in+zebrafish:+mapping+the+ros+mutation+and+the+centromere+of+linkage+group+I.">Half-tetrad analysis in zebrafish: mapping the ros mutation and the centromere of linkage group I.</a> Genetics. 139 (4), 1727-1727 (1995).</li><li>Beattie, C. E., Raible, D. W., Henion, P. D., Eisen, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+pressure+screens.">Early pressure screens.</a> Methods Cell Biol. 237 (71), 2575-25 (1999).</li><li>Johnson, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Centromere-linkage+analysis+and+consolidation+of+the+zebrafish+genetic+map.">Centromere-linkage analysis and consolidation of the zebrafish genetic map.</a> Genetics. 142 (4), 1277-1277 (1996).</li><li>Trede, N. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+mutants+with+disrupted+early+T-cell+and+thymus+development+identified+in+early+pressure+screen.">Zebrafish mutants with disrupted early T-cell and thymus development identified in early pressure screen.</a> Dev Dyn. 237 (9), 2575-2575 (1999).</li></ol>

Bu yöntemle üretilen embriyolar, gerçek gynogenetic diploitler olduğundan emin olmak için çok önemlidir. Kontrol grubu olarak normal diploid yumurta (UV inaktivasyon olmadan bazı sperm kenara tutmak) ve haploid embriyolar (AP prosedür yoluyla gitmeden UV sperm ile döllenmiş yumurta, bir debriyaj kenara tutarak) bir kavrama, bir debriyaj oluşturur. 1 gün sonrası döllenme haploid embriyolar azından kısa bir vücut ekseni, düzensiz beyin ve hücre gruplarının morfoloji var. Haploids 2-3 gün sonra canl?...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Tricaine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Watch glass</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>French Press</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Pressure cylinder</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Instant ocean</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Pasteur pipettes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cut off the narrow end, fire polish</td>
</tr>
<tr>
<td>UV cross-linker</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>microcapillaries</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

making gynogenetic diploid zebrafish by early pressure

Diploid ökaryotlarda Heterozigosite genellikle genetik çalışmalar hantal yapar. Heterozigot kadınlarda doğrudan uygulanabilir homozigot diploid yavrular meydana Yöntemleri F1 mutagenized kadınlarda ileri genetik hızlandırılmış bir ekran doğrudan zararlı mutasyonlar için taranmalıdır izin verir. Streisinger et al.<sup&gt; 1,2</sup&gt; Gynogenetic (homozigot) diploid zebrafish yapmak için ultraviyole ışık inaktive sperm ile zebrafish yumurta ve fiziksel tedavileri (ısı ve basınç) deploymerize mikrotübül kullanarak aktive ikinci mayotik veya ilk Zigotik hücre bölünmesi ya önlenmesi yöntemleri açıklanmıştır. Döllenmeden hemen sonra ortaya çıkan &quot;erken basıncı&quot; (EP) yöntemi bloklar mayoz II. AP yöntemi, her iki cinsiyetten verimli yetişkin gelişebilir yüksek oranda canlı embriyo üretir. Bu yöntem, mayoz I. homozigot mutasyonlar sentromerik lokusların için% 50 ve% 1&#39;den daha az telomerik lokuslar arasında EP kavramalar tespit sırasında rekombinasyon tarafından kendi sentromer ayrıldı dışında tüm lokuslar homozigot olan embriyolar üretir. Bu yöntem, Zebra balığı Kitap birebir çoğaltılamaz.<sup&gt; 3</sup&gt;.

Watch this Scientific Journal Video about Making Gynogenetic Diploid Zebrafish by Early Pressure at JoVE.com

Making Gynogenetic Diploid Zebrafish by Early Pressure

Bu ultraviyole ışık inaktive sperm döllenme hemen sonra ikinci mayoz bölünme bloke ederek gynogenetic diploid zebrafish embriyolar (sadece genetik katkı anneden gelen embriyolar) üretmek için kullanılan bir yöntemdir. EP embriyolarının ilk mayoz bölünme sırasında rekombinasyon nedeniyle tamamen homozigot değildir, ancak onlar kendi sentromer ayrılmış rekombinasyon henüz tüm lokuslar homozigot.

Erken Basınç Gynogenetic Diployid Zebra balığı

Heterozygosity in diploid eukaryotes often makes genetic studies cumbersome. Methods that produce viable homozygous diploid offspring directly from ...

Research

JoVE Journal

Biology

Live Imaging of the Zebrafish Embryonic Brain by Confocal Microscopy

Konfokal Mikroskop Zebra balığı Embriyonik Beyin Görüntüleme Canlı

In this video, we demonstrate the method our lab has developed to analyze the cell shape changes and rearrangements required to bend and fold the ...

Brain Banking: Making the Most of your Research Specimens

Beyin Bankacılık: Araştırma Örneklerinin En iyi şekilde

Unbiased stereology is a method for accurately and efficiently estimating the total neuron number (or other cell type) in a given area of interest1.  To ...

Measuring Blood Pressure in Mice using Volume Pressure Recording, a Tail-cuff Method

Cilt Basınç Kaydı, Kuyruk manşet Yöntemi kullanarak Fare Tansiyon Ölçüm

The CODA 8-Channel High Throughput Non-Invasive Blood Pressure system measures the blood pressure in up to 8 mice or rats simultaneously. The CODA ...

Making MR Imaging Child's Play - Pediatric Neuroimaging Protocol, Guidelines and Procedure

Pediatrik Nörogörüntüleme Protokol Kuralları ve Usulü - MR Görüntüleme Çocuk Oyunu

Within the last decade there has been an increase in the use of structural and functional magnetic resonance imaging (fMRI) to investigate the neural ...

Generating Chimeric Zebrafish Embryos by Transplantation

Transplantasyon Kimerik Zebra balığı Embriyolar Yaratma

One of the most powerful tools used to gain insight into complex developmental processes is the analysis of chimeric embryos. A chimera is defined as an ...

Atmospheric-pressure Molecular Imaging of Biological Tissues and Biofilms by LAESI Mass Spectrometry

Atmosferik basınç Moleküler Görüntüleme LAESI Kütle Spektrometresi Biyolojik Dokular ve Biyofilmler

Ambient ionization methods in mass spectrometry allow analytical investigations to be performed directly on a tissue or biofilm under native-like ...

Direct Analysis of Single Cells by Mass Spectrometry at Atmospheric Pressure

Doğrudan Atmosferik Basınç Kütle Spektrometresi Tek Hücre Analizi

Analysis of biochemicals in single cells is important for understanding cell metabolism, cell cycle, adaptation, disease states, etc. Even the same cell ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

Morpholinos in vivo Elektroporasyon Yetişkin Zebra balığı Retina

Many devastating inherited eye diseases result in progressive and irreversible blindness because humans cannot regenerate dying or diseased retinal ...

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

Yetişkin Fare Kalvaryal Kemik İliği içinde Hematopoietik kök hücrelerin Vivo 4-Boyutlu Takip

Through a delicate balance between quiescence and proliferation, self renewal and production of differentiated progeny, hematopoietic stem cells (HSCs) ...

Production of Haploid Zebrafish Embryos by In Vitro Fertilization

Production of Haploid Zebrafish Embryos by In Vitro Fertilization

Haploit Zebra balığı Embriyolar üretimi ile<em&gt; In Vitro</em&gt; Gübreleme

The zebrafish has become a mainstream vertebrate model that is relevant for many disciplines of scientific study. Zebrafish are especially well suited for ...