Name: a multi-compartment cns neuron-glia co-culture microfluidic platform
Uploaded: 2009-09-10T16:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Multi-compartment CNS Neuron-glia Co-culture Microfluidic Platform at JoVE.com

وأيد هذا العمل من قبل المعاهد الوطنية للصحة / المعهد الوطني للصحة العقلية (NIH / NIMH) منحة # 1R21MH085267.

الجزء 1 : إعداد قالب الرئيسي لمقصورة متعددة الخلايا العصبية تصنيع الجهاز المشترك الثقافة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الخطوة الأولى لافتعال PMMA الرئيسي هو جعل 3،5 مم مقصورات العميق. يتم تعريف واحد وستة مقصورة سوما مقصورات محوار / الدبقية على كتلة PMM...

<ol>
	<li>Sherman, D. L., Brophy, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+axon+ensheathment+and+myelin+growth.">Mechanisms of axon ensheathment and myelin growth.</a> Nature Reviews. 6, 683-690 (2005).</li><li>Xia, Y., Whitesides, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Soft+Lithography.">Soft Lithography.</a> Angew. Chem. 37, 550-575 (1998).</li><li>Taylor, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+culture+platform+for+neuroscience+research.">Microfluidic culture platform for neuroscience research.</a> Nature Methods. 2, 599-605 (2005).</li><li>Li, J., Baud, O., Vartanian, T., Volpe, J. J., Rosenberg, P. A., A, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peroxynitrite+generated+by+inducible+nitric+oxide+synthase+and+NADPH+oxidase+mediates+microglial+toxicity+to+oligodendrocytes.">Peroxynitrite generated by inducible nitric oxide synthase and NADPH oxidase mediates microglial toxicity to oligodendrocytes.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 102, 9936-9941 (2005).</li></ol>

وقد طورنا حجرة متعددة شاركت في الثقافة منصة لدراسة الثدييات CNS محوار - الدبقية التفاعل. وقد تم عزل بنجاح CNS المحاوير من الخلية العصبية الهيئات / التشعبات ، وكانت بنجاح oligodendrocytes المشترك تربيتها داخل الجهاز. يمكن أن تختلف كثافة الخلايا العصبية من قبل التطبيقات ، ولكن تر?...

a multi-compartment cns neuron-glia co-culture microfluidic platform

نقدم رواية متعددة المقصورة منصة عصبون الميكروسيستم المشترك للثقافة في الجهاز العصبي المركزي البحوث المختبرية التفاعل محوار - الدبقية ، وقادرة على إجراء ما يصل إلى ست تجارب مستقلة في موازية لسرعة أعلى ،. طورنا طريقة تصنيع جديدة لخلق وجود هياكل الأجهزة ميكروفلويديك النطاق الجزئي والكلي على حد سواء داخل الجهاز نفسه من خلال عملية الطباعة الحجرية الناعمة واحد ، مما يمكن تلفيق الشامل مع التكرار جيدة. وتتكون المقصورة متعددة ميكروفلويديك شارك في الثقافة منصة واحدة لمقصورة سوما الخلايا العصبية وستة مقصورات محوار / الدبقية لoligodendrocytes (شريان الحياة). ترتبط مقصورة سوما ومحوار / الدبقية المقصورات بها سلسلة من محور عصبي في توجيه microchannels التي تؤدي وظيفة الحواجز المادية لحصر العصبية سوما سوما في المقصورة ، في حين يسمح لتنمو لتصبح المحاوير محوار / الدبقية المقصورات. ويمكن تحميلها في عملية شريان الحياة محوار / الدبقية مقصورات تتفاعل فقط مع محاور عصبية ولكن ليس مع سوما أو التشعبات العصبية ، وتمكين التفاعل الدراسات المترجمة محوار - الدبقية. كما مكنت هذه microchannels fluidic العزلة بين المقصورات ، مما يسمح أجريت ست تجارب مستقلة على جهاز واحد لأعلى إنتاجية. لينة الطباعة الحجرية باستخدام بولي (dimethylsiloxane) (PDMS) هي تقنية تستخدم عادة في الأجهزة بالغة الصغر الطبية الحيوية. وتعرف عادة الخزانات على هذه الأجهزة التي اللكم اليدوي. على الرغم من البساطة ، والمحاذاة الفقراء وقتا طويلا من طبيعة العملية يجعل من هذه العملية لا تصلح عند عدد كبير من الخزانات يجب أن تكون خلقت مرارا وتكرارا. لم الأسلوب وضعت حديثا لا تتطلب اللكم دليل الخزانات ، والتغلب على هذه القيود. الأولى ، وسبعة خزانات (العمق : 3.5 ملم) وأدلى على كتلة بولي (PMMA) (ميثاكريلات الميثيل) باستخدام آلة طحن الصغرى. ثم ، كانت صفائف المجهرية التلال ، وملفقة على ركيزة الزجاج ، وتنقش على الساخن ضد كتلة PMMA لتحديد microchannels التي تربط محور عصبي وسوما / الدبقية المقصورات. أدت هذه العملية في الماكرو النطاق الخزانات (3.5 ملم) والصغيرة الحجم قنوات (2.5 ميكرومتر) ليتزامن داخل الماجستير PMMA واحد. تم الحصول على نسخة PDMS الذي كان بمثابة القالب الرئيسي باستخدام الطباعة الحجرية الناعمة وكان جهاز نسخ PDMS النهائي من هذا الماجستير. تم تحميلها من الخلايا العصبية الأولية E16 - 18 الفئران إلى مقصورة سوما والمثقفين لمدة أسبوعين. بعد أسبوع واحد من خلية ثقافة ، عبر محاور microchannels ، وشكلت طبقة الشبكة محواري فقط داخل المحوار / الدبقية المقصورات. أضيفت المحاوير نمت بشكل موحد في جميع أنحاء مقصورات محوار / الدبقية ستة وعملية شريان الحياة من P1 - 2 الفئران لمحوار / الدبقية مقصورات في 14 يوما في المختبر للثقافة المشترك.

Watch this Scientific Journal Video about A Multi-compartment CNS Neuron-glia Co-culture Microfluidic Platform at JoVE.com

A Multi-compartment CNS Neuron-glia Co-culture Microfluidic Platform

طورنا رواية متعددة المقصورة منصة عصبون الميكروسيستم المشترك لثقافة البحوث في المختبر CNS التفاعل محوار - الدبقية. منصة قادرة على اجراء تجارب تصل إلى ستة المستقلة بالتوازي وكانت ملفقة باستخدام المطورة حديثا الكلي / الجزئي أسلوب تلفيق الهجين.

حجرة متعددة الخلية العصبية الجهاز العصبي المركزي ، الدبقية منهاج ميكروفلويديك المشارك الثقافة

We present a novel multi-compartment neuron co-culture microsystem platform for in vitro CNS axon-glia interaction research, capable of conducting up to ...

Research

JoVE Journal

Biology

Dissection of Larval CNS in Drosophila Melanogaster

تشريح الجهاز العصبي المركزي اليرقات في Melanogaster ذبابة الفاكهة

The central nervous system (CNS) of Drosophila larvae is complex and poorly understood.  One way to investigate the CNS is to use immunohistochemistry to ...

A Gradient-generating Microfluidic Device for Cell Biology

جهاز لتوليد التدرج ميكروفلويديك لبيولوجيا الخلية

 The fabrication and operation of a gradient-generating microfluidic device for studying cellular behavior is described.  A microfluidic platform is an ...

Cell Capture Using a Microfluidic Device

القبض على خلية باستخدام جهاز ميكروفلويديك

A Neuronal and Astrocyte Co-Culture Assay for High Content Analysis of Neurotoxicity

والخلايا العصبية ونجمية المشارك الثقافة الفحص لتحليل محتوى عال من العصبية

High Content Analysis (HCA) assays combine cells and detection reagents with automated imaging and powerful image analysis algorithms, allowing ...

The Microfluidic Probe: Operation and Use for Localized Surface Processing

ودقق ميكروفلويديك : تشغيل واستخدام لتصنيع السطحي المترجمة

Microfluidic devices allow assays to be performed using minute amounts of sample and have recently been used to control the microenvironment of cells. ...

Platelet Adhesion and Aggregation Under Flow using Microfluidic Flow Cells

التصاق وتكدس الصفيحات تحت التدفق باستخدام خلايا تدفق ميكروفلويديك

Platelet aggregation occurs in response to vascular injury where the extracellular matrix below the endothelium has been exposed. The platelet adhesion ...

Microfluidic Co-culture of Epithelial Cells and Bacteria for Investigating Soluble Signal-mediated Interactions

ميكروفلويديك المشارك ثقافة الخلايا الظهارية والبكتيريا للتحقيق في ذوبان الإشارات بوساطة التفاعلات

The human gastrointestinal (GI) tract is a unique environment in which intestinal epithelial cells and non-pathogenic (commensal) bacteria coexist. It has ...

A Microfluidic Device for Quantifying Bacterial Chemotaxis in Stable Concentration Gradients

جهاز ميكروفلويديك الانجذاب الكيميائي لقياس تركيز البكتيريا في التدرجات مستقرة

Chemotaxis allows bacteria to approach sources of attractant chemicals or to avoid sources of repellent chemicals. Bacteria constantly monitor the ...

Modified ES / OP9 Co-Culture Protocol Provides Enhanced Characterization of Hematopoietic Progeny

تعديل ES / OP9 المشارك الثقافة ينص البروتوكول خصائص محسنة من النسل للدم

The in vitro differentiation of ES cells towards a hematopoietic cell fate is useful when studying cell populations that are difficult to access in vivo ...

Endothelial Cell Co-culture Mediates Maturation of Human Embryonic Stem Cell to Pancreatic Insulin Producing Cells in a Directed Differentiation Approach

البطانية نضوج خلية يتوسط المشارك ثقافة الإنسان الخلايا الجذعية الجنينية إلى خلايا البنكرياس المنتجة للأنسولين في نهج التفاضل إخراج

Embryonic stem cells (ESC) have two main characteristics: they can be indefinitely propagated in vitro in an undifferentiated state and they are ...