Name: fluorescence in situ hybridization (fish) protocol in human sperm
Uploaded: 2009-09-01T11:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Fluorescence in situ hybridization FISH Protocol in Human Sperm at JoVE.com

यह काम Generalitat de Catalunya (2005 SGR00437) द्वारा समर्थित किया गया था. लेखकों उनके पर्यवेक्षण और प्रोत्साहन, और अपनी तकनीकी सहायता के लिए जे लुकास के लिए जे Blanco और एफ विडाल करने के लिए धन्यवाद.

मैं नमूना प्रसंस्करण और सेल निर्धारण <ol><li> द्रवीकरण जब तक 20 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर बाँझ कंटेनर में वीर्य का नमूना छोड़ो. </li><li> एक अपकेंद्रित्र ट्यूब नमूना स्थानांतरण और 1000g पर यह 5 मिनट के लिए स्पिन. </li><...

<ol>
	<li>Blanco, J., Egozcue, J., Vidal, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incidence+of+chromosome+21+disomy+in+human+spermatozoa+as+determined+by+fluorescent+in-situ+hybridization.">Incidence of chromosome 21 disomy in human spermatozoa as determined by fluorescent in-situ hybridization.</a> Hum. Reprod. 11, 722-726 (1996).</li></ol>

इस प्रोटोकॉल का वर्णन कैसे शुक्राणु मछली तैयारी प्राप्त करने के लिए मानव वीर्य के नमूनों की प्रक्रिया है. इस प्रोटोकॉल का उपयोग करना यह संभव है कि पुरुष gametes में गुणसूत्र असामान्यताओं का विश्लेषण. शुक्?...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>1,4-Dithiothreitol (DTT)</td>
<td>Material</td>
<td>Roche</td>
<td>10197777001</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>2-Amino-2-(hydroxymethyl)-1,3-propanediol</td>
<td>Material</td>
<td>Roche</td>
<td>10708976001</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Acetic acid</td>
<td>Material</td>
<td>Merck</td>
<td>100.063</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>AneuVysion&reg; Multicolor DNA Probe Kit<ul style="padding:2px;"><li>20xSaline-Sodium Citrate</li><li>4,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI II)</li><li>CEP 18/X/Y DNA probe</li><li>NP-40</li><li>LSI 13/21 DNA probe</li></ul></td>
<td>Material</td>
<td>Vysis Inc.</td>
<td>32-161075 <ul style="padding:2px;"><li>30-805850</li><li>30-804941 </li><li>30-171077</li><li>30-804820</li><li>30-171078</li></ul></td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Centrifuge 5804R</td>
<td>Tool</td>
<td>Eppendorf</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Centrifuge tube</td>
<td>Material</td>
<td>Nunc</td>
<td>347856</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Coplin jar (glass)</td>
<td>Material</td>
<td>Barloworld Scientific</td>
<td>Hellendahl (ZCT278)</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Coplin jar (plastic)</td>
<td>Material</td>
<td>Deltalab</td>
<td>191087</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Cover slips (15x15)</td>
<td>Material</td>
<td>Knittel gl&auml;ser</td>
<td>4600115</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Cover slips (18x18)</td>
<td>Material</td>
<td>Knittel gl&auml;ser</td>
<td>4600118</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Diamond pencil</td>
<td>Material</td>
<td>Hammacher</td>
<td>335117010</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Ethanol</td>
<td>Material</td>
<td>Merck</td>
<td>100.983</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Formamide</td>
<td>Material</td>
<td>Roche</td>
<td>11814320001</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Freezer</td>
<td>Tool</td>
<td>Zanussi</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Gloves</td>
<td>Material</td>
<td>Sanyc</td>
<td>101/3300</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>HYBrite&trade;</td>
<td>Tool</td>
<td>Vysis Inc.</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Immersion Oil</td>
<td>Material</td>
<td>Olympus</td>
<td>35505</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Incubator</td>
<td>Tool</td>
<td>Heraeus</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Methanol</td>
<td>Material</td>
<td>Merck</td>
<td>106.009</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Micropipette</td>
<td>Material</td>
<td>Labsystems</td>
<td>Finnpipette (4500000)</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Micropipette replacement tip</td>
<td>Material</td>
<td>Daslab</td>
<td>16-2001</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Nail varnish</td>
<td>Material</td>
<td>Quo-cosmetics</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Olympus BX60 epifluorescence microscope</td>
<td>Tool</td>
<td>Olympus</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Equipped with a triple-band filter for DAPI/Texas Red/FITC and single-band filters for Aqua, FITC and Texas Red.</td>
</tr>
<tr>
<td>Pasteur Pipette</td>
<td>Material</td>
<td>Rubilabor</td>
<td>211.0230</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Phase contrast microscope</td>
<td>Tool</td>
<td>Nikon Diaphot</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Plastic pipette (3ml)</td>
<td>Material</td>
<td>Deltalab</td>
<td>200007</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Potassium chloride (KCl)</td>
<td>Material</td>
<td>Fluka</td>
<td>60128</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Rubber cement</td>
<td>Material</td>
<td>Best-test</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Slides</td>
<td>Material</td>
<td>Knittel gl&auml;ser</td>
<td>4520022</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Slide Saver Boxes</td>
<td>Material</td>
<td>Deltalab</td>
<td>19276.1</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sterile container</td>
<td>Material</td>
<td>Deltalab</td>
<td>409726</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Syringe</td>
<td>Material</td>
<td>PentaFerte</td>
<td>002022300</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Thermometer</td>
<td>Material</td>
<td>Comark Instruments, Inc</td>
<td>KM12</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Tri-distilled water</td>
<td>Material</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Triton X-100</td>
<td>Material</td>
<td>Sigma</td>
<td>9002-93-1</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Tweezers</td>
<td>Material</td>
<td>B/Braun</td>
<td>Aesculap (BD224R)</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Vertical laminar flow hood</td>
<td>Tool</td>
<td>Burdinola</td>
<td>OR-ST 1500</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Vortex mixer</td>
<td>Tool</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>FB15012</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Water bath</td>
<td>Tool</td>
<td>Raypa&reg;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

fluorescence in situ hybridization (fish) protocol in human sperm

Aneuploidies मनुष्यों में सबसे अक्सर गुणसूत्र असामान्यताओं हैं. इन असामान्यताएं के अधिकांश माता पिता में gametogenic प्रक्रिया के दौरान meiotic त्रुटियों से परिणाम. मानव पुरुषों में, इन त्रुटियों को संख्यात्मक गुणसूत्र असामान्यताएं जो संतानों के लिए इन विसंगतियों का संचारण का एक बढ़ा जोखिम का प्रतिनिधित्व करते हैं के साथ शुक्राणु के उत्पादन के लिए नेतृत्व कर सकते हैं. इस कारण से, शुक्राणु नाभिक पर स्वस्थानी संकरण (मछली) में प्रतिदीप्ति की तकनीक एक नैदानिक ​​निदान के संदर्भ में व्यापक रूप से शामिल प्रोटोकॉल बन गया है. इस अभ्यास के रोगियों है कि आनुवंशिक प्रजनन सलाह के लिए तलाश के gametes में संख्यात्मक गुणसूत्र असामान्यताओं की आवृत्तियों के एक अनुमान प्रदान करती है. तिथि करने के लिए, सबसे अक्सर शुक्राणु मछली विश्लेषण में शामिल गुणसूत्रों गुणसूत्रों एक्स, वाई, 13, 18 और 21 हैं. यह वीडियो आलेख वर्णन करता है, कदम से कदम, कैसे प्रक्रिया और एक मानव वीर्य नमूना ठीक है, कैसे decondense और शुक्राणु chromatin, कैसे करने के लिए शुक्राणु मछली की तैयारी को प्राप्त करने के लिए आगे बढ़ना denature, और माइक्रोस्कोप पर परिणामों की कल्पना कैसे. सबसे अधिक प्रासंगिक कदम की विशेष टिप्पणी के लिए सबसे अच्छा परिणाम प्राप्त करने के लिए दिया जाता है.

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Fluorescence in situ hybridization FISH Protocol in Human Sperm

यह वीडियो आलेख वर्णन करता है, कदम से कदम, कैसे एक वीर्य नमूना प्रक्रिया करने के लिए अच्छी गुणवत्ता वाले प्रतिदीप्ति प्राप्त करने<em&gt; बगल में</emमानव शुक्राणु&gt; संकरण. प्राप्त तैयारी aneuploidy स्क्रीनिंग के लिए नैदानिक ​​निदान के संदर्भ में इस्तेमाल किया जा सकता है.

प्रतिदीप्ति बगल में</emमानव शुक्राणु में> संकरण (मछली) प्रोटोकॉल

Aneuploidies are the most frequent chromosomal abnormalities in humans. Most of these abnormalities result from meiotic errors during the gametogenic ...

Research

JoVE Journal

Biology

Fluorescence in situ hybridization (FISH) Protocol in Human Sperm

Non-radioactive in situ Hybridization Protocol Applicable for Norway Spruce and a Range of Plant Species

Non-radioactive in situ Hybridization Protocol Applicable for Norway Spruce and a Range of Plant Species

गैर रेडियोधर्मी बगल में संकरण नॉर्वे Spruce के लिए लागू प्रोटोकॉल और संयंत्र प्रजाति की एक रेंज

The high-throughput expression analysis technologies available today give scientists an overflow of expression profiles but their resolution in terms of ...

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

Ca इमेजिंग तकनीक के लिए 2 + मानव शुक्राणु में संकेतन

Fluorescence microscopy of cells loaded with fluorescent, Ca2+-sensitive dyes is used for measurement of spatial and temporal aspects of Ca2+ signaling in ...

Detection of Viral RNA by Fluorescence in situ Hybridization (FISH)

Detection of Viral RNA by Fluorescence in situ Hybridization FISH

वायरल शाही सेना के प्रतिदीप्ति द्वारा जांच<em&gt; बगल में</em&gt; संकरण (मछली)

Viruses  that infect cells elicit specific changes to normal cell functions which serve  to divert energy and resources for viral replication. Many ...

Analysis of Single-cell Gene Transcription by RNA Fluorescent In Situ Hybridization (FISH)

Analysis of Single-cell Gene Transcription by RNA Fluorescent In Situ Hybridization FISH

एकल कोशिका के जीन प्रतिलेखन की शाही सेना प्रतिदीप्त द्वारा विश्लेषण<em&gt; स्वस्थानी</em&gt; संकरण (मछली)

Adhesion of Plasmodium falciparum infected erythrocytes (IE) to human endothelial receptors during malaria infections is mediated by expression of PfEMP1 ...

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

प्रतिदीप्ति का प्रयोग mRNA अणुओं के दृश्य और विश्लेषण<em&gt; स्वस्थानी</emमें&gt; संकरण<em&gt; Saccharomyces cerevisiae</em

The Fluorescence in situ Hybridization (FISH) method allows one to detect nucleic acids in the native cellular environment. Here we provide a protocol for ...

Combined DNA-RNA Fluorescent In situ Hybridization (FISH) to Study X Chromosome Inactivation in Differentiated Female Mouse Embryonic Stem Cells

Combined DNA-RNA Fluorescent In situ Hybridization FISH to Study X Chromosome Inactivation in Differentiated Female Mouse Embryonic Stem Cells

संयुक्त डीएनए शाही सेना फ्लोरिसेंट<em&gt; सीटू</em&gt; संकरण (मछली) विभेदित महिला माउस भ्रूणीय स्टेम कोशिकाओं में एक्स गुणसूत्र निष्क्रियता अध्ययन करने के लिए

Fluorescent in situ hybridization (FISH) is a molecular technique which enables the detection of nucleic acids in cells. DNA FISH is often used in ...

Quick Fluorescent In Situ Hybridization Protocol for Xist RNA Combined with Immunofluorescence of Histone Modification in X-chromosome Inactivation

Quick Fluorescent In Situ Hybridization Protocol for Xist RNA Combined with Immunofluorescence of Histone Modification in X-chromosome Inactivation

त्वरित फ्लोरोसेंट<em&gt; बगल में</emएक्स गुणसूत्र निष्क्रियता में Histone संशोधन के इम्यूनोफ्लोरेसेंस साथ Xist आरएनए कम्बाइंड के लिए&gt; संकरण प्रोटोकॉल

Combining RNA fluorescent in situ hybridization (FISH) with immunofluorescence (immuno-FISH) creates a technique that can be employed at the single cell ...

Simple Method for Fluorescence DNA In Situ Hybridization to Squashed Chromosomes

Simple Method for Fluorescence DNA In Situ Hybridization to Squashed Chromosomes

प्रतिदीप्ति डीएनए के लिए सरल तरीका<em&gt; बगल में</em&gt; कुचल गुणसूत्रों को संकरण

DNA in situ hybridization (DNA ISH) is a commonly used method for mapping sequences to specific chromosome regions. This approach is particularly ...

Observation and Quantification of Telomere and Repetitive Sequences Using Fluorescence In Situ Hybridization (FISH) with PNA Probes in Caenorhabditis elegans

Observation and Quantification of Telomere and Repetitive Sequences Using Fluorescence In Situ Hybridization FISH with PNA Probes in Caenorhabditis elegans

अवलोकन और टेलोमेर की मात्रा और दोहराव दृश्यों का उपयोग प्रतिदीप्ति<em&gt; बगल में</em&gt; संकरण (मछली) में PNA जांच के साथ<em&gt; Caenorhabditis एलिगेंस</em

Telomere is a ribonucleoprotein structure that protects chromosomal ends from aberrant fusion and degradation. Telomere length is maintained by telomerase ...

Method for Labeling Transcripts in Individual Escherichia coli Cells for Single-molecule Fluorescence In Situ Hybridization Experiments

Method for Labeling Transcripts in Individual Escherichia coli Cells for Single-molecule Fluorescence In Situ Hybridization Experiments

सीटू संकरण प्रयोगों में एकल-अणु प्रतिदीप्ति के लिए व्यक्तिगत ई कोलाई कोशिकाओं में लेबलिंग टेप के लिए विधि

A method is described for labeling individual messenger RNA (mRNA) transcripts in fixed bacteria for use in single-molecule fluorescence in situ ...

प्रतिदीप्ति बगल में संकरण (मछली) प्रोटोकॉल