Name: purification of mitochondria from yeast cells
Uploaded: 2009-08-24T16:00:00
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この作品は、CIHRとカナダのNSERCからの補助金によって支えられている。 VITはCIHR新調査官とゲノミクスのコンコルディア大学のリサーチチェア、細胞生物学と高齢化です。

材料および方法酵母菌株及び成長条件野生型株BY4742（MATαhis3Δ1leu2Δ0lys2Δ0ura3Δ0が ）豊富なYEPD培地（1％酵母エキス、2％ペプトン、2％グルコース）で増殖させた。細胞を30℃で回転が5:1の&quot;フラスコの体積/培地体積&quot;比での三角フラスコで200 rpmで振盪しながら培養した。 原油ミトコンドリア分画の単離<ol><li> 48時間野生?...

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	<li>Voet, D., Voet, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biochemistry.">Biochemistry.</a> , (2004).</li><li>Suen, D. -. F., Norris, K. L., Youle, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+dynamics+and+apoptosis.">Mitochondrial dynamics and apoptosis.</a> Genes Dev. 22, 1577-1590 (2008).</li><li>Cheng, W. C., Berman, S. B., Ivanovska, I., Jonas, E. A., Lee, S. J., Chen, Y., Kaczmarek, L. K., Pineda, F. &. a. m. p. ;. a. m. p., Hardwick, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+factors+with+dual+roles+in+death+and+survival.">Mitochondrial factors with dual roles in death and survival.</a> Oncogene. 25, 4697-4705 (2006).</li><li>Detmer, S. A., Chan, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functions+and+dysfunctions+of+mitochondrial+dynamics.">Functions and dysfunctions of mitochondrial dynamics.</a> Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 8, 870-879 (2007).</li><li>McBride, H. M., Neuspiel, M., Wasiak, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondria:+more+than+just+a+powerhouse.">Mitochondria: more than just a powerhouse.</a> Curr. Biol. 16, R551-R560 (2006).</li><li>Balaban, R. S., Nemoto, S., Finkel, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondria,+oxidants,+and+aging.">Mitochondria, oxidants, and aging.</a> Cell. 120, 483-495 (2005).</li></ol>

このメソッドは、酵母細胞から純粋なミトコンドリアの高収量を可能にします。この方法で精製したミトコンドリアは、他の小器官で、本質的に汚染の自由であり、その精製後、構造と機能の整合性を保持。本質的なミトコンドリアのプロセスの無細胞再構成に適しているミトコンドリアに記載の方法利回り。これらの高純度のミトコンドリアは、ミトコンドリアの構造と機能、ミトコンド?...

purification of mitochondria from yeast cells

ミトコンドリアは、真核生物、非光合成細胞における好気的代謝の間にATPの生産の主なサイトです。<sup&gt; 1</sup&gt;。これらの複雑な細胞小器官もアポトーシス細胞死の重要な役割を果たして<sup&gt; 2</sup&gt;、細胞の生存<sup&gt; 3</sup&gt;、哺乳類の開発<sup&gt; 4</sup&gt;、ニューロンの発達と機能<sup&gt; 4</sup&gt;、細胞内シグナル伝達<sup&gt; 5</sup&gt;、および寿命調節<sup&gt; 6</sup&gt;。ミトコンドリアによって制御されるこれらの複雑な生物学的プロセスについての我々の理解は、その形態、それらのタンパク質と脂質組成、彼らのDNAの完全性、およびそれらの数多くの重要な機能を評価するための堅牢な方法に依存しています。出芽酵母<em&gt;サッカロマイセスセレビシエ</em&gt;、注釈付きのゲノムと明確に定義されたプロテオームとの遺伝的および生化学的に操作可能な単細胞真核生物は、ミトコンドリアの本質的な生物学的機能の根底にある分子細胞メカニズムを研究するための貴重なモデルです。このような種類の勉強のために、それは高純度のミトコンドリアを持つことが重要です。ここでは、酵母ミトコンドリアの精製のための迅速かつ効果的な方法の詳細な説明を提示する。このメソッドは、他の細胞小器官による汚染の本質的に自由であり、それらの精製後、構造と機能の整合性を維持する高純度のミトコンドリアの分離が可能になります。この方法で精製したミトコンドリアは、本質的なミトコンドリアのプロセスの無細胞再構成に適しており、ミトコンドリアの構造と機能、ミトコンドリアプロテオームとlipidome、およびミトコンドリアDNAの解析に使用することができます。

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Purification of Mitochondria from Yeast Cells

我々は、酵母からのミトコンドリアの精製のための迅速かつ効果的な方法を説明します<em&gt;サッカロマイセスセレビシエ</em&gt;。このメソッドは、他の細胞小器官による汚染の本質的に自由であり、それらの精製後、構造と機能の整合性を維持する純粋なミトコンドリアの高収量を可能にします。

酵母細胞からミトコンドリアの精製

Mitochondria are the main site of ATP production during aerobic metabolism in eukaryotic non-photosynthetic cells1. These complex organelles also play ...

Research

JoVE Journal

Biology

Isolation of CD4+ T cells from Mouse Lymph Nodes Using Miltenyi MACS Purification

CD4 +ミルテニーMACS精製を使用してマウスのリンパ節からT細胞の分離

Isolation of cells from the primary source is a necessary step in many more complex protocols. Miltenyi offers kits to isolate cells from several ...

Staining of Proteins in Gels with Coomassie G-250 without Organic Solvent and Acetic Acid

クーマシー有機溶媒および酢酸のないG - 250でゲル中のタンパク質の染色

In classical protein staining protocols using Coomassie Brilliant Blue (CBB), solutions with high contents of toxic and flammable organic solvents ...

Purification of Progenitors from Skeletal Muscle

骨格筋からの前駆体の精製

Skeletal muscle contains multiple progenitor populations of distinct embryonic origins and developmental potential. Myogenic progenitors, usually residing ...

Chromatographic Purification of Highly Active Yeast Ribosomes

高活性酵母のリボソームのクロマトグラフィー精製

Eukaryotic ribosomes are much more labile as compared to their eubacterial and archael counterparts, thus posing a significant challenge to researchers.  ...

Confocal Imaging of Single Mitochondrial Superoxide Flashes in Intact Heart or In Vivo

Confocal Imaging of Single Mitochondrial Superoxide Flashes in Intact Heart or In Vivo

シングルミトコンドリアスーパーオキシド無傷ハートや点滅の共焦点イメージング<em&gt;インビボ</em

Mitochondrion is a critical intracellular organelle responsible for energy production and intracellular signaling in eukaryotic systems. Mitochondrial ...

Isolation of mRNAs Associated with Yeast Mitochondria to Study Mechanisms of Localized Translation

ローカライズされた翻訳のメカニズムを研究するために酵母ミトコンドリアでのmRNA関連のアイソレーション

Most of mitochondrial proteins are encoded in the nucleus and need to be imported into the organelle. Import may occur while the protein is synthesized ...

Rapid Isolation And Purification Of Mitochondria For Transplantation By Tissue Dissociation And Differential Filtration

組織解離と差動濾過により移植のためにミトコンドリアの迅速な単離および精製

Previously described mitochondrial isolation methods using differential centrifugation and/or Ficoll gradient centrifugation require 60 to 100 min to ...

Isolation and Functional Analysis of Mitochondria from Cultured Cells and Mouse Tissue

培養細胞およびマウス組織から単離とミトコンドリアの機能解析

Comparison between two or more distinct groups, such as healthy vs. disease, is necessary to determine cellular status. Mitochondria are at the nexus of ...

Genome-wide Purification of Extrachromosomal Circular DNA from Eukaryotic Cells

真核細胞から体外の環状DNAのゲノムワイドな精製

Extrachromosomal circular DNAs (eccDNAs) are common genetic elements in Saccharomyces cerevisiae and are reported in other eukaryotes as well. EccDNAs ...

MitoCeption: Transferring Isolated Human MSC Mitochondria to Glioblastoma Stem Cells

MitoCeption：神経膠芽腫幹細胞に単離されたヒトMSCミトコンドリアの転送

Mitochondria play a central role for cell metabolism, energy production and control of apoptosis. Inadequate mitochondrial function has been found ...