Name: purification of mitochondria from yeast cells
Uploaded: 2009-08-24T16:00:00
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이 작품은 CIHR과 캐나다의 NSERC에서 보조금에 의해 지원되었다. VIT는 CIHR 새로운 인베스티게이터와 게놈의 콩코디아 대학 연​​구 위원장, 세포 생물학 및 노화입니다.

재료 및 방법 효모 변종과 성장 조건 야생 형 변형 BY4742는 (MATα his3Δ1 leu2Δ0 lys2Δ0 ura3Δ0) (1 % 효모 추출물, 펩톤 2 %, 2 % 포도당) 풍부한 YEPD 매체에서 재배되었다. 전지는 30 ° C 회전이 5시 1분의 &quot;플라스크 볼륨 / 볼륨 매체&quot;비율 Erlenmeyer flasks의 200 rpm으로 잡고 교양되었습니다. 원유 mitochondrial 분획의 분리 <ol><li> 48 H.위한 ?...

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	<li>Voet, D., Voet, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biochemistry.">Biochemistry.</a> , (2004).</li><li>Suen, D. -. F., Norris, K. L., Youle, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+dynamics+and+apoptosis.">Mitochondrial dynamics and apoptosis.</a> Genes Dev. 22, 1577-1590 (2008).</li><li>Cheng, W. C., Berman, S. B., Ivanovska, I., Jonas, E. A., Lee, S. J., Chen, Y., Kaczmarek, L. K., Pineda, F. &. a. m. p. ;. a. m. p., Hardwick, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+factors+with+dual+roles+in+death+and+survival.">Mitochondrial factors with dual roles in death and survival.</a> Oncogene. 25, 4697-4705 (2006).</li><li>Detmer, S. A., Chan, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functions+and+dysfunctions+of+mitochondrial+dynamics.">Functions and dysfunctions of mitochondrial dynamics.</a> Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 8, 870-879 (2007).</li><li>McBride, H. M., Neuspiel, M., Wasiak, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondria:+more+than+just+a+powerhouse.">Mitochondria: more than just a powerhouse.</a> Curr. Biol. 16, R551-R560 (2006).</li><li>Balaban, R. S., Nemoto, S., Finkel, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondria,+oxidants,+and+aging.">Mitochondria, oxidants, and aging.</a> Cell. 120, 483-495 (2005).</li></ol>

이 방법은 효모 세포에서 순수 mitochondria의 높은 수율 격리 수 있습니다. 이 방법에 의해 정화 Mitochondria 다른 organelles에 의해 오염의 기본적 자유 및 정화 후 자신의 구조와 기능 무결성을 유지합니다. 필수 mitochondrial 프로세스 셀 - 무료 reconstitution에 적합 mitochondria 설명한 방법 산출. 이 높은 순수 mitochondria는 mitochondrial 구조와 기능, mitochondrial 프로테옴 및 lipidome과 mitochondrial DNA의 분석에도 사용?...

purification of mitochondria from yeast cells

Mitochondria ATP 생산의 주요 사이트는 진핵세포 이외의 광합성 세포에 산소 신진 대사 중에 아르<sup&gt; 1</sup&gt;. 이러한 복잡한 organelles은 apoptotic 세포의 죽음에 필수적인 역할을<sup&gt; 2</sup&gt;, 세포 생존<sup&gt; 3</sup&gt; 포유 동물 개발<sup&gt; 4</sup&gt;의 연결을 개발 및 기능<sup&gt; 4</sup&gt;, 세포내 신호<sup&gt; 5</sup&gt;과 장수 규제<sup&gt; 6</sup&gt;. mitochondria에 의해 제어되는 이러한 복잡한 생물 학적 과정에 대한 우리의 이해는 형태, 그들의 단백질과 지질 조성, 그들의 DNA의 무결성, 그들의 수많은 중요한 기능을 평가하기위한 강력한 방법에 의존합니다. 신진 효모<em&gt; Saccharomyces cerevisiae</em&gt; 주석 게놈하고 잘 정의된 프로테옴과 유전자와 화학적으로 manipulable 단세포 진핵세포 생물은 mitochondria의 필수적인 생물 학적 기능을 기본 분자 및 세포 메커니즘을 연구를위한 가치있는 모델입니다. 연구 이러한 유형의 경우, 그것은 매우 순수한 mitochondria을 가지고 중요합니다. 여기 mitochondria 효모의 정화에 대한 신속하고 효과적인 방법에 대한 자세한 설명을 제시한다. 이 방법은 다른 organelles에 의해 오염의 기본적 자유 및 정화 후 자신의 구조와 기능 무결성을 유지 높은 순수 mitochondria의 절연을 수 있습니다. 이 방법에 의해 정화 Mitochondria은 필수 mitochondrial 프로세스의 셀 - 무료 reconstitution에 적합하고 mitochondrial 구조와 기능, mitochondrial 프로테옴 및 lipidome하고, mitochondrial DNA의 분석에 사용될 수 있습니다.

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Purification of Mitochondria from Yeast Cells

우리는 효모에서 mitochondria의 정화에 대한 신속하고 효과적인 방법을 설명<em&gt; Saccharomyces cerevisiae</em&gt;. 이 방법은 다른 organelles에 의해 오염의 기본적 자유 및 정화 후 자신의 구조와 기능 무결성을 유지 순수 mitochondria의 높은 수율 격리 수 있습니다.

효모 세포 Mitochondria의 정화

Mitochondria are the main site of ATP production during aerobic metabolism in eukaryotic non-photosynthetic cells1. These complex organelles also play ...

Research

JoVE Journal

Biology

Isolation of CD4+ T cells from Mouse Lymph Nodes Using Miltenyi MACS Purification

CD4의 분리 + Miltenyi 맥을 정제를 사용하여 마우스 림프절에서 T 세포

Isolation of cells from the primary source is a necessary step in many more complex protocols. Miltenyi offers kits to isolate cells from several ...

연구

생물학

Staining of Proteins in Gels with Coomassie G-250 without Organic Solvent and Acetic Acid

유기 용매 및 초산없이 쿠매시 G - 250로 젤의 단백질 염색법

In classical protein staining protocols using Coomassie Brilliant Blue (CBB), solutions with high contents of toxic and flammable organic solvents ...

Purification of Progenitors from Skeletal Muscle

골격근에서 Progenitors의 정화

Skeletal muscle contains multiple progenitor populations of distinct embryonic origins and developmental potential. Myogenic progenitors, usually residing ...

Chromatographic Purification of Highly Active Yeast Ribosomes

높은 활성 효모 변이의 색층 정화

Eukaryotic ribosomes are much more labile as compared to their eubacterial and archael counterparts, thus posing a significant challenge to researchers.  ...

Confocal Imaging of Single Mitochondrial Superoxide Flashes in Intact Heart or In Vivo

Confocal Imaging of Single Mitochondrial Superoxide Flashes in Intact Heart or In Vivo

단일 미토콘드리아 과산화물 온전한 마음에 점멸 또는 공 촛점 이미징<em&gt; 생체</em

Mitochondrion is a critical intracellular organelle responsible for energy production and intracellular signaling in eukaryotic systems. Mitochondrial ...

Isolation of mRNAs Associated with Yeast Mitochondria to Study Mechanisms of Localized Translation

현지화 번역의 메커니즘을 연구하는 효모 미토콘드리아와의 mRNA 관련의 분리

Most of mitochondrial proteins are encoded in the nucleus and need to be imported into the organelle. Import may occur while the protein is synthesized ...

Rapid Isolation And Purification Of Mitochondria For Transplantation By Tissue Dissociation And Differential Filtration

조직 해리 차동 여과 이식 미토콘드리아의 신속한 분리 및 정제

Previously described mitochondrial isolation methods using differential centrifugation and/or Ficoll gradient centrifugation require 60 to 100 min to ...

Isolation and Functional Analysis of Mitochondria from Cultured Cells and Mouse Tissue

분리 및 배양 세포 및 마우스 조직에서 미토콘드리아의 기능적 분석

Comparison between two or more distinct groups, such as healthy vs. disease, is necessary to determine cellular status. Mitochondria are at the nexus of ...

Genome-wide Purification of Extrachromosomal Circular DNA from Eukaryotic Cells

진핵 세포에서 염색체 외 원형 DNA의 게놈 차원의 정화

Extrachromosomal circular DNAs (eccDNAs) are common genetic elements in Saccharomyces cerevisiae and are reported in other eukaryotes as well. EccDNAs ...

MitoCeption: Transferring Isolated Human MSC Mitochondria to Glioblastoma Stem Cells

MitoCeption는 : 아교 모세포종 줄기 세포에 고립 된 인간의 MSC 미토콘드리아 전송

Mitochondria play a central role for cell metabolism, energy production and control of apoptosis. Inadequate mitochondrial function has been found ...