Name: purification of mitochondria from yeast cells
Uploaded: 2009-08-24T16:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Purification of Mitochondria from Yeast Cells at JoVE.com

Bu çalışma CIHR ve Kanada NSERC hibe ile desteklendi. VIT CIHR Yeni Araştırmacı ve Genomik Concordia Üniversitesi Araştırma Başkanı, Hücre Biyolojisi ve Yaşlanma.

Gereç ve yöntem Maya suşları ve büyüme koşulları Yabani tip suşu BY4742 (MATα his3Δ1 leu2Δ0 lys2Δ0 ura3Δ0) (% 1 maya özü,% 2 pepton,% 2 glukoz), zengin bir YEPD ortamda yetişmiştir . Hücreler, 30 ° C dönüş 05:01 &quot;balon hacim / orta hacimli&quot; oranı Erlenmeyer matara 200 rpm&#39;de sallayarak kültüre edildi. Ham mitokondrial fraksiyon izolasyonu <ol><li> 48 saat için 1 L yabani tip suşu BY4742 ...

<ol>
	<li>Voet, D., Voet, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biochemistry.">Biochemistry.</a> , (2004).</li><li>Suen, D. -. F., Norris, K. L., Youle, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+dynamics+and+apoptosis.">Mitochondrial dynamics and apoptosis.</a> Genes Dev. 22, 1577-1590 (2008).</li><li>Cheng, W. C., Berman, S. B., Ivanovska, I., Jonas, E. A., Lee, S. J., Chen, Y., Kaczmarek, L. K., Pineda, F. &. a. m. p. ;. a. m. p., Hardwick, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+factors+with+dual+roles+in+death+and+survival.">Mitochondrial factors with dual roles in death and survival.</a> Oncogene. 25, 4697-4705 (2006).</li><li>Detmer, S. A., Chan, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functions+and+dysfunctions+of+mitochondrial+dynamics.">Functions and dysfunctions of mitochondrial dynamics.</a> Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 8, 870-879 (2007).</li><li>McBride, H. M., Neuspiel, M., Wasiak, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondria:+more+than+just+a+powerhouse.">Mitochondria: more than just a powerhouse.</a> Curr. Biol. 16, R551-R560 (2006).</li><li>Balaban, R. S., Nemoto, S., Finkel, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondria,+oxidants,+and+aging.">Mitochondria, oxidants, and aging.</a> Cell. 120, 483-495 (2005).</li></ol>

Bu yöntem, maya hücreleri saf mitokondri yüksek verimli izolasyon sağlar. Bu yöntemi ile saflaştırılmış Mitokondri kontaminasyon diğer organellerin aslında ücretsiz ve kendi arıtma sonrası yapısal ve fonksiyonel bütünlüğünü korumak. Temel mitokondriyal süreçlerin hücre sulandırıldıktan için uygun olan mitokondri açıklanan yöntem verim. Bu son derece saf mitokondri mitokondriyal yapı ve işlevleri, mitokondriyal proteom ve lipidome ve mitokondriyal DNA analizi için de kullanılabilir.

purification of mitochondria from yeast cells

Mitokondri, ATP üretimi ana site ökaryotik olmayan fotosentetik hücrelerde aerobik metabolizma sırasında<sup&gt; 1</sup&gt;. Bu kompleks organellere apoptotik hücre ölümü de önemli rol oynamaktadır<sup&gt; 2</sup&gt; Hücre sağkalım<sup&gt; 3</sup&gt; Memeli gelişme<sup&gt; 4</sup&gt; Nöronal gelişimi ve işlevi<sup&gt; 4</sup&gt;, Hücre içi sinyal<sup&gt; 5</sup&gt; Ve uzun ömürlü düzenleme<sup&gt; 6</sup&gt;. Mitokondri tarafından kontrol edilen bu karmaşık biyolojik süreçlerin anlayışımız, morfoloji, protein ve lipid bileşimi, onların DNA bütünlüğünü ve sayısız hayati fonksiyonlarını değerlendirmek için sağlam yöntemler dayanmaktadır. Maya<em&gt; Saccharomyces cerevisiae</em&gt; Açıklamalı genomu ve iyi tanımlanmış proteom, genetik ve biyokimyasal manipulable tek hücreli ökaryot mitokondri temel biyolojik fonksiyonları altında yatan moleküler ve hücresel mekanizmaları çalışmak için değerli bir model. Bu tür çalışmalar için, son derece saf mitokondri sahip olmak çok önemlidir. Burada mitokondri maya arıtma için hızlı ve etkili bir yöntemin ayrıntılı bir açıklama mevcut. Bu yöntem aslında diğer organeller tarafından kontaminasyon ücretsiz ve kendi arıtma sonrası yapısal ve işlevsel bütünlüğü korumak son derece saf mitokondri izolasyonu sağlar. Bu yöntem ile arındırılmış Mitokondri hücre sulandırıldıktan temel mitokondriyal süreçleri için uygundur ve mitokondriyal yapı ve işlevleri, mitokondriyal proteom ve lipidome ve mitokondriyal DNA analizi için kullanılabilir.

Watch this Scientific Journal Video about Purification of Mitochondria from Yeast Cells at JoVE.com

Purification of Mitochondria from Yeast Cells

Biz maya mitokondri arıtma için hızlı ve etkili bir yöntem tarif<em&gt; Saccharomyces cerevisiae</em&gt;. Bu yöntem aslında diğer organeller tarafından kontaminasyon ücretsiz ve kendi arıtma sonrası yapısal ve fonksiyonel bütünlüğünü korumak saf mitokondri yüksek verimli izolasyon sağlar.

Maya hücreleri Mitokondri saflaştırılması

Mitochondria are the main site of ATP production during aerobic metabolism in eukaryotic non-photosynthetic cells1. These complex organelles also play ...

Research

JoVE Journal

Biology

Isolation of CD4+ T cells from Mouse Lymph Nodes Using Miltenyi MACS Purification

CD4 İzolasyon Miltenyi MACS Arıtma Fare lenf düğümleri + T hücreleri

Isolation of cells from the primary source is a necessary step in many more complex protocols. Miltenyi offers kits to isolate cells from several ...

Staining of Proteins in Gels with Coomassie G-250 without Organic Solvent and Acetic Acid

Organik Solvent ve Asetik Asit olmadan Jeller Coomassie G-250 ile Proteinlerin Boyama

In classical protein staining protocols using Coomassie Brilliant Blue (CBB), solutions with high contents of toxic and flammable organic solvents ...

Purification of Progenitors from Skeletal Muscle

İskelet Kası progenitörlerin saflaştırılması

Skeletal muscle contains multiple progenitor populations of distinct embryonic origins and developmental potential. Myogenic progenitors, usually residing ...

Chromatographic Purification of Highly Active Yeast Ribosomes

Yüksek Aktif Maya Ribozomlar Kromatografik Arıtma

Eukaryotic ribosomes are much more labile as compared to their eubacterial and archael counterparts, thus posing a significant challenge to researchers.  ...

Confocal Imaging of Single Mitochondrial Superoxide Flashes in Intact Heart or In Vivo

Confocal Imaging of Single Mitochondrial Superoxide Flashes in Intact Heart or In Vivo

Tek Mitokondriyal süperoksit Bozulmamış Kalp Flaşlar veya konfokal Görüntüleme<em&gt; In Vivo</em

Mitochondrion is a critical intracellular organelle responsible for energy production and intracellular signaling in eukaryotic systems. Mitochondrial ...

Isolation of mRNAs Associated with Yeast Mitochondria to Study Mechanisms of Localized Translation

Lokalize Çeviri Mekanizmaları Eğitim için Maya Mitokondri ile mRNAlarının Associated İzolasyonu

Most of mitochondrial proteins are encoded in the nucleus and need to be imported into the organelle. Import may occur while the protein is synthesized ...

Rapid Isolation And Purification Of Mitochondria For Transplantation By Tissue Dissociation And Differential Filtration

Doku Ayrışma Ve Diferansiyel süzülerek Nakli İçin Mitokondri Of Rapid İzolasyon ve saflaştırma

Previously described mitochondrial isolation methods using differential centrifugation and/or Ficoll gradient centrifugation require 60 to 100 min to ...

Isolation and Functional Analysis of Mitochondria from Cultured Cells and Mouse Tissue

İzolasyon ve Kültür Hücrelerinin ve Fare Doku gelen Mitokondri Fonksiyonel Analizi

Comparison between two or more distinct groups, such as healthy vs. disease, is necessary to determine cellular status. Mitochondria are at the nexus of ...

Genome-wide Purification of Extrachromosomal Circular DNA from Eukaryotic Cells

Ökaryotik Hücrelerde gelen ekstrakromozomal dairesel DNA genom Arıtma

Extrachromosomal circular DNAs (eccDNAs) are common genetic elements in Saccharomyces cerevisiae and are reported in other eukaryotes as well. EccDNAs ...

MitoCeption: Transferring Isolated Human MSC Mitochondria to Glioblastoma Stem Cells

MitoCeption: Glioblastoma Kök Hücreleri için İzole İnsan MSC kondriyayı aktarma

Mitochondria play a central role for cell metabolism, energy production and control of apoptosis. Inadequate mitochondrial function has been found ...