Name: fluorescent labeling of drosophila heart structures
Uploaded: 2009-10-13T23:30:00
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लेखकों एसआई Bernstein (सैन डिएगो स्टेट यूनिवर्सिटी) महत्वपूर्ण पढ़ने और इस पांडुलिपि की तैयारी के बारे में उपयोगी सुझाव के लिए धन्यवाद. यह काम एसआई Bernstein, SDSU, और आर Bodmer, BIMR NIH अनुदान द्वारा समर्थित था, और अमेरिकन हार्ट एसोसिएशन के पश्चिमी राज्य संबद्ध से जी Vogler और ए Cammarato के लिए एक के बाद डॉक्टरेट फैलोशिप द्वारा.

इससे पहले कि आप शुरू <ol><li> निम्न समाधानों को तैयार: <ol class="lalpha"><li> आराम बफर (कृत्रिम ड्रोसोफिला (ADH) hemolymph (देखें &quot;ड्रोसोफिला में दिल की धड़कन&quot; Visualizing) है कि 10 मिमी EGTA होता) </li><li> लगानेवाला (1x पीबीएस में 4% forma...

<ol>
	<li>Brent, J. R., Werner, K. M., McCabe, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+larval+NMJ+dissection.">Drosophila larval NMJ dissection.</a> J Vis Exp. , (2009).</li><li>Molina, M. R., Cripps, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ostia,+the+inflow+tracts+of+the+Drosophila+heart,+develop+from+a+genetically+distinct+subset+of+cardial+cells.">Ostia, the inflow tracts of the Drosophila heart, develop from a genetically distinct subset of cardial cells.</a> Mech Dev. 1, 51-59 (2001).</li><li>Dulcis, D., Levine, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glutamatergic+innervation+of+the+heart+initiates+retrograde+contractions+in+adult+Drosophila+melanogaster.">Glutamatergic innervation of the heart initiates retrograde contractions in adult Drosophila melanogaster.</a> J Neurosci. 2, 271-280 (2005).</li><li>Zeitouni, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Signalling+pathways+involved+in+adult+heart+formation+revealed+by+gene+expression+profiling+in+Drosophila.">Signalling pathways involved in adult heart formation revealed by gene expression profiling in Drosophila.</a> PLoS Genet. 10, 1907-1921 (2007).</li><li>Robertson, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+metamorphosis+of+Drosophila+melanogaster,+including+an+accurately+timed+account+of+the+principal+morphological+change.">The metamorphosis of Drosophila melanogaster, including an accurately timed account of the principal morphological change.</a> J. Morphol. 2, 351-399 (1936).</li><li>Miller, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The internal anatomy and histology of the imago of Drosophila melanogaster. , (1950).</li><li>Rizki, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+circulatory+system+and+associated+cells+and+tissues.">The circulatory system and associated cells and tissues.</a> , (1978).</li><li>Cammarato, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myosin+transducer+mutations+differentially+affect+motor+function,+myofibril+structure,+and+the+performance+of+skeletal+and+cardiac+muscles.">Myosin transducer mutations differentially affect motor function, myofibril structure, and the performance of skeletal and cardiac muscles.</a> Mol Biol Cell. 2, 553-562 (2008).</li><li>Taghli-Lamallem, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dystrophin+deficiency+in+Drosophila+reduces+lifespan+and+causes+a+dilated+cardiomyopathy+phenotype.">Dystrophin deficiency in Drosophila reduces lifespan and causes a dilated cardiomyopathy phenotype.</a> Aging Cell. 2, 237-249 (2008).</li><li>Kelso, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=a+database+documenting+a+GFP+protein-trap+insertion+screen+in+Drosophila+melanogaster.">a database documenting a GFP protein-trap insertion screen in Drosophila melanogaster.</a> Nucleic Acids Res. 32, D418-D420 (2004).</li><li>Dietzl, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+genome-wide+transgenic+RNAi+library+for+conditional+gene+inactivation+in+Drosophila.">A genome-wide transgenic RNAi library for conditional gene inactivation in Drosophila.</a> Nature. 7150, 151-156 (2007).</li><li>Mery, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Drosophila+muscle+LIM+protein,+Mlp84B,+is+essential+for+cardiac+function.">The Drosophila muscle LIM protein, Mlp84B, is essential for cardiac function.</a> J Exp Biol. 211, 15-23 (2008).</li></ol>

यहाँ हम एक तैयारी और धुंधला ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर पृष्ठीय पोत और फ्लोरोसेंट या confocal माइक्रोस्कोपी के माध्यम से इमेजिंग के लिए जुड़े ऊतकों के लिए उपयोगी प्रोटोकॉल उपस्थित थे. हम से परिष्कृत और अध...

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<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Ethylene glycol-bis (2-amino-ethylether) -N,N,N&#x2019;,N&#x2019;-tetra-acetic acid (EGTA)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma-Aldrich&reg;</td>
<td>E4378</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Formaldehyde, 10%, methanol free, Ultra Pure</td>
<td>Reagent</td>
<td>Polysciences Inc.</td>
<td>50-00-0</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Triton-X-100</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma-Aldrich&reg;</td>
<td>9002-93-1</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Alexa Fluor&reg; 594 phalloidin</td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen&trade;</td>
<td>A12381</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Vectashield&reg; Mounting Medium for Fluorescence with DAPI</td>
<td>Reagent</td>
<td>Vector Laboratories, Inc.</td>
<td>H-1200</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Tungsten pins</td>
<td>Reagent</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>26002-10</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Pin holder</td>
<td>Reagent</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>26018-17</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

fluorescent labeling of drosophila heart structures

<em&gt; ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर</em&gt; पृष्ठीय पोत, या दिल की, एक ट्यूबलर सिकुड़ा cardiomyocytes, pericardial कोशिकाओं है कि दिल की दीवार, सहायक alary मांसपेशियों और वयस्कों में, उदर अनुदैर्ध्य मांसपेशी कोशिकाओं की एक परत के प्रत्येक पक्ष के साथ संरेखित के एक एकल परत के शामिल संरचना है. सिकुड़ा फाइबर घर मांसपेशियों cytoarchitecture के myofibrils और cytoskeletal / submembranous प्रोटीन परिसरों, जो बाह्य मैट्रिक्स के मुताबिक़ घटकों के साथ बातचीत की घनी पैक बंडलों सहित घटक संरक्षित. यहाँ हम dissected लार्वा और अर्द्ध बरकरार वयस्क के दिलों से विशेष दौरे तत्वों का निर्धारण और फ्लोरोसेंट लेबलिंग के लिए एक प्रोटोकॉल का वर्णन<em&gt; ड्रोसोफिला</em&gt;. विशेष रूप से, हम लार्वा दिलों में एफ actin sarcomeric लेबलिंग और α-actinin के प्रदर्शित करता है. इसके अतिरिक्त, हम एफ actin और α-actinin मायोसिन-GFP में लेबलिंग वयस्क मक्खियों व्यक्त प्रदर्शन और α actinin और pericardin, एक प्रकार चतुर्थ कोशिकी मैट्रिक्स कोलेजन के जंगली प्रकार वयस्क दिल में. अर्द्ध बरकरार वयस्क दिल के लिए एक बढ़ते रणनीति है कि से निपटने के कम से कम है और हृदय ट्यूब और जुड़े ऊतकों की अखंडता बनाए रखने के लिए अवसर का अनुकूलन करने के लिए विशेष ध्यान दिया जाता है. ये तैयारियाँ फ्लोरोसेंट और confocal माइक्रोस्कोपी के माध्यम से इमेजिंग के लिए उपयुक्त हैं. कुल मिलाकर, यह प्रक्रिया एक शक्तिशाली आनुवंशिक रूप से विनयशील मॉडल प्रणाली से दिल के संरचनात्मक विशेषताओं के सावधान और विस्तृत विश्लेषण के लिए अनुमति देता है.

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Fluorescent Labeling of Drosophila Heart Structures

यहाँ हम लार्वा और वयस्क से दिल ट्यूबों के विभिन्न तत्वों के फ्लोरोसेंट लेबलिंग के लिए एक बुनियादी प्रोटोकॉल का वर्णन<em&gt; ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर</em&gt;. इन नमूनों में हैं फ्लोरोसेंट या confocal माइक्रोस्कोपी के माध्यम से इमेजिंग के लिए अच्छी तरह से अनुकूल है. इस तकनीक को एक शक्तिशाली मॉडल जीव से दिल की सुविधाओं का विस्तृत संरचनात्मक विश्लेषण परमिट.

के फ्लोरोसेंट लेबलिंग ड्रोसोफिला हार्ट संरचनाएं

The Drosophila melanogaster dorsal vessel, or heart, is a tubular structure comprised of a single layer of contractile cardiomyocytes, pericardial cells ...

Research

JoVE Journal

Biology

Fluorescent Labeling of Drosophila Heart Structures

Labeling Stem Cells with Fluorescent Dyes for non-invasive Detection with Optical Imaging

गैर इनवेसिव पता लगाने के लिए प्रतिदीप्त रंगों के साथ ऑप्टिकल इमेजिंग के साथ स्टेम सेल लेबल

Optical imaging (OI) is an easy, fast and inexpensive tool for in vivo monitoring of new stem cell based therapies. The technique is based on ex vivo ...

Visualizing the Live Drosophila Glial-neuromuscular Junction with Fluorescent Dyes

Visualizing the Live Drosophila Glial-neuromuscular Junction with Fluorescent Dyes

लाइव Visualizing ड्रोसोफिला फ्लोरोसेंट रंजक के साथ जंक्शन Glial neuromuscular

Our project identified GFP labeled glial structures at the developing larval fly neuromuscular synapse. To look at development of live glial-nerve-muscle ...

Visualizing the Beating Heart in Drosophila

Visualizing the Beating Heart in Drosophila

में दिल की धड़कन visualizing ड्रोसोफिला</em

The Drosophila heart has recently emerged as a good model system for examining the genetic, cellular, and molecular mechanisms underlying function in ...

Monitoring Heart Function in Larval Drosophila melanogaster for Physiological Studies

Monitoring Heart Function in Larval Drosophila melanogaster for Physiological Studies

निगरानी लारवल में हार्ट फंक्शन ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर शारीरिक अध्ययन के लिए

We present various methods to record cardiac function in the larval Drosophila. The approaches allow heart rate to be measured in unrestrained  and  ...

Preparation of embryos for Electron Microscopy of the Drosophila embryonic heart tube

Preparation of embryos for Electron Microscopy of the Drosophila embryonic heart tube

भ्रूण की इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी के लिए तैयार ड्रोसोफिला भ्रूण दिल ट्यूब

The morphogenesis of the Drosophila  embryonic heart tube has emerged as a valuable model system for studying cell migration, cell-cell adhesion and cell ...

Preparation of Drosophila Polytene Chromosome Squashes for Antibody Labeling

एंटीबॉडी लेबल के लिए ड्रोसोफिला Polytene क्रोमोजोम Squashes की तैयारी

Drosophila has long been a favorite model system for studying the relationship between chromatin structure and gene regulation due to the cytological ...

Fluorescent Labeling of COS-7 Expressing SNAP-tag Fusion Proteins for Live Cell Imaging

COS-7 के फ्लोरोसेंट लेबलिंग लाइव सेल इमेजिंग के लिए तस्वीर टैग फ्यूजन प्रोटीन व्यक्त

SNAP-tag and CLIP-tag protein labeling systems enable the specific, covalent attachment of molecules, including fluorescent dyes, to a protein of interest ...

Whole Mount RNA Fluorescent in situ Hybridization of Drosophila Embryos

Whole Mount RNA Fluorescent in situ Hybridization of Drosophila Embryos

पूरे माउंट आरएनए प्रतिदीप्त<em&gt; स्वस्थानी में</em&gt; संकरण<em&gt; ड्रोसोफिला</em&gt; भ्रूण

Assessing  the expression pattern of a gene, as well as the subcellular localization  properties of its transcribed RNA, are key features for ...

Intravital Microscopy for Imaging Subcellular Structures in Live Mice Expressing Fluorescent Proteins

फ्लोरोसेंट प्रोटीन व्यक्त करते रहते चूहों में इमेजिंग subcellular संरचनाओं के लिए intravital माइक्रोस्कोपी

Here we describe a procedure to image subcellular structures in live rodents that is based on the use of confocal intravital microscopy. As a model organ, ...

Drosophila Preparation and Longitudinal Imaging of Heart Function In Vivo Using Optical Coherence Microscopy (OCM)

Drosophila Preparation and Longitudinal Imaging of Heart Function In Vivo Using Optical Coherence Microscopy OCM

ड्रोसोफिला तैयारी और दिल समारोह विवो में ऑप्टिकल जुटना माइक्रोस्कोपी का उपयोग के अनुदैर्ध्य इमेजिंग (ओसीएम)

Longitudinal study of the heartbeat in small animals contributes to understanding structural and functional changes during heart development. Optical ...