Name: generation of induced pluripotent stem cells by reprogramming mouse embryonic fibroblasts with a four transcription factor, doxycycline inducible lentiviral transduction system
Uploaded: 2009-11-13T20:00:00
Duration: 11 min 48 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Generation of Induced Pluripotent Stem Cells by Reprogramming Mouse Embryonic Fibroblasts with a Four Transcription Factor, Doxycycline Inducible Lentiviral T

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	<li>Takahashi, K., Yamanaka, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+pluripotent+stem+cells+from+mouse+embryonic+and+adult+fibroblast+cultures+by+defined+factors.">Induction of pluripotent stem cells from mouse embryonic and adult fibroblast cultures by defined factors.</a> Cell. 126, 663-676 (2006).</li><li>Aoi, T., Yae, K., Nakagawa, M., Ichisaka, T., Okita, K., Takahashi, K., Chiba, T., Yamanaka, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+pluripotent+stem+cells+from+adult+mouse+liver+and+stomach+cells.">Generation of pluripotent stem cells from adult mouse liver and stomach cells.</a> Science. 321, 699-702 (2008).</li><li>Yu, J., Vodyanik, M. A., Smuga-Otto, K., Antosiewicz-Bourget, J., Frane, J. L., Tian, S., Nie, J., Jonsdottir, G. A., Ruotti, V., Stewart, R., Slukvin, I. I., Thomson, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induced+pluripotent+stem+cell+lines+derived+from+human+somatic+cells.">Induced pluripotent stem cell lines derived from human somatic cells.</a> Science. 318, 1917-1920 (2007).</li><li>Murry, C. E., Keller, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differentiation+of+embryonic+stem+cells+to+clinically+relevant+populations:+lessons+from+embryonic+development.">Differentiation of embryonic stem cells to clinically relevant populations: lessons from embryonic development.</a> Cell. 132, 661-680 (2008).</li><li>Lerou, P. H., Daley, G. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+potential+of+embryonic+stem+cells.">Therapeutic potential of embryonic stem cells.</a> Blood Rev. 19, 321-331 (2005).</li><li>Wernig, M., Meissner, A., Foreman, R., Brambrink, T., Ku, M., Hochedlinger, K., Bernstein, B. E., Jaenisch, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+reprogramming+of+fibroblasts+into+a+pluripotent+ES-cell-like+state.">In vitro reprogramming of fibroblasts into a pluripotent ES-cell-like state.</a> Nature. 448, 318-324 (2007).</li></ol>

लेखक, ब्राड हैमिल्टन, Stemgent द्वारा नियोजित है कि अभिकर्मकों और इस लेख में इस्तेमाल उपकरणों का उत्पादन.

इन परिणामों दिखाना है कि Stemgent Dox inducible माउस TF lentivirus सेट करने के लिए कुशलतापूर्वक के अस्थानिक अभिव्यक्ति उत्प्रेरण द्वारा आईपीएस कालोनियों को उत्पन्न करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है माउस भ्रूणीय fibroblasts में प्रतिलेखन कारकों transduced. जब reprogramming प्रयोगों डिजाइन, कई चर reprogramming की दक्षता का अनुकूलन करने के लिए विचार किया जाना चाहिए. सबसे पहले, यह संभव है को बढ़ाने या पारगमन दक्षता में कमी, जिससे लक्ष्य सेल की आबादी में एकीकृत वायरस की संख्या को प्रभावित प्राथमिक संक्रमण चरण के दौरान सक्रिय कक्ष वायरस लक्ष्य अनुपात (यानी MOI) को संशोधित. दूसरा, कोशिकाओं Dox उजागर कर रहे हैं समय की लंबाई का समायोजन आईपीएस सेल कॉलोनी पीढ़ी की दक्षता को प्रभावित कर सकते हैं. तीसरा, reprogramming लक्ष्य कोशिकाओं की proliferative क्षमता प्रभाव, के रूप में कोशिकाओं जो सक्रिय रूप से बढ़ रहे हैं और विभाजित अधिक reprogramming करने के लिए उत्तरदायी हैं कर सकते हैं. अंत में, जब अलग सेल नंबर या अलग आकार ऊतक संस्कृति व्यंजन के लिए प्रोटोकॉल को संशोधित, यह अनुशंसा की जाती है कि लक्ष्य कक्ष संख्या आनुपातिक संस्कृति डिश की सतह क्षेत्र के लिए समायोजित किया जा.

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<td>DOX Inducible Mouse TF Concentrated Lentifirus Set</td>
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generation of induced pluripotent stem cells by reprogramming mouse embryonic fibroblasts with a four transcription factor, doxycycline inducible lentiviral transduction system

प्रतिलेखन कारकों और सेल संस्कृति शर्तों के एक परिभाषित सेट का प्रयोग, Yamanaka और उनके सहयोगियों ने दिखा दिया कि retrovirus की मध्यस्थता वितरण और Oct4 की अभिव्यक्ति, Sox2, सी Myc और Klf4 माउस fibroblasts में pluripotency उत्प्रेरण के लिए सक्षम है 1 इसके बाद रिपोर्ट उपयोगिता का प्रदर्शन डॉक्सीसाइक्लिन (Dox) दोनों को प्राथमिक और माध्यमिक अन्य वयस्क माउस दैहिक सेल प्रकार की एक किस्म से आईपीएस कोशिकाओं की पीढ़ी के लिए lentiviral वितरण प्रणाली inducible 2,3. प्रेरित pluripotent स्टेम सेल (आईपीएस) आकारिकी, प्रसार, और teratoma गठन को प्रेरित करने की क्षमता में भ्रूण स्टेम कोशिकाओं (ते) के लिए समान हैं. सेल के दोनों प्रकार के pluripotent पुनर्योजी चिकित्सा में विभेदित कोशिकाओं या ऊतकों की पीढ़ी के लिए सामग्री शुरू करने के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है 4-6 आईपीएस कोशिकाओं को भी ES कोशिकाओं पर एक विशिष्ट लाभ है के रूप में वे के नैतिक दुविधा बिना ES कोशिकाओं के प्रमुख गुण एक्ज़िबिट. भ्रूण विनाश. यहाँ हम Stemgent Dox inducible माउस TF lentivirus सेट के साथ माउस भ्रूण fibroblast कोशिकाओं (MEF) reprogramming के लिए प्रोटोकॉल का प्रदर्शन. हम यह भी दिखाना है कि Stemgent Dox inducible माउस TF lentivirus सेट MEFs में पारगमन पर चार प्रतिलेखन कारकों के प्रत्येक व्यक्त जिससे कि pluripotency ES कोशिकाओं की विशेषता मार्करों को प्रदर्शित करता है एक pluripotent स्टेम सेल राज्य उत्प्रेरण के लिए सक्षम है.

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Generation of Induced Pluripotent Stem Cells by Reprogramming Mouse Embryonic Fibroblasts with a Four Transcription Factor, Doxycycline Inducible Lentiviral Transduction System

Stemgent Dox inducible माउस TF lentivirus सेट माउस भ्रूणीय fibroblasts (MEFs) प्रेरित pluripotent स्टेम सेल (आईपीएस) के लिए reprogram कर सकते हैं. यहाँ हम माउस reprogramming में प्रतिलेखन Oct4 कारकों के Dox-inducible अभिव्यक्ति के लिए प्रोटोकॉल का प्रदर्शन, Sox2 Klf4, और सी Myc आईपीएस कालोनियों कि व्यक्त आम एमईएस pluripotency मार्करों उत्पन्न करने के लिए.

प्रेरित pluripotent स्टेम सेल के चार ट्रांसक्रिप्शन फैक्टर के साथ माउस भ्रूणीय Fibroblasts Reprogramming जनरेशन, डॉक्सीसाइक्लिन lentiviral transduction सिस्टम inducible

Using a defined set of transcription factors and cell culture conditions, Yamanaka and colleagues demonstrated that retrovirus-mediated delivery and ...

Research

JoVE Journal

Biology

Derivation of Human Embryonic Stem Cells by Immunosurgery

मानव भ्रूण स्टेम कोशिकाओं के Immunosurgery द्वारा व्युत्पत्ति

The ability of human embryonic stem cells to self-renew and differentiate into all cell types of 
the body suggests that they hold great promise for both ...

Generation of Induced Pluripotent Stem Cells by Reprogramming Human Fibroblasts with the Stemgent Human TF Lentivirus Set

Stemgent मानव TF lentivirus के साथ मानव Fibroblasts Reprogramming प्रेरित pluripotent स्टेम सेल की पीढ़ी सेट

In 2006, Yamanaka and colleagues first demonstrated that retrovirus-mediated delivery and expression of Oct4, Sox2, c-Myc and Klf4 is capable of inducing ...

Transfecting and Nucleofecting Human Induced Pluripotent Stem Cells

मानव प्रेरित pluripotent स्टेम सेल Transfecting और Nucleofecting

Genetic modification is continuing to be an essential tool in studying stem cell biology and in setting forth potential clinical applications of human ...

Efficient Derivation of Human Cardiac Precursors and Cardiomyocytes from Pluripotent Human Embryonic Stem Cells with Small Molecule Induction

लघु अणु प्रेरण के साथ pluripotent मानव भ्रूण स्टेम कोशिकाओं से मानव कार्डिएक व्यापारियों और cardiomyocytes के कुशल व्युत्पत्ति

To date, the lack of a suitable human cardiac cell source has been the major setback in regenerating the human myocardium, either by cell-based ...

Selecting and Isolating Colonies of Human Induced Pluripotent Stem Cells Reprogrammed from Adult Fibroblasts

मानव प्रेरित pluripotent स्टेम सेल का चयन और अलग कालोनियों वयस्क Fibroblasts से reprogrammed किया

Herein we present a protocol of reprogramming human adult fibroblasts into human induced pluripotent stem cells (hiPSC) using retroviral vectors encoding ...

Reprogramming Human Somatic Cells into Induced Pluripotent Stem Cells (iPSCs) Using Retroviral Vector with GFP

Reprogramming Human Somatic Cells into Induced Pluripotent Stem Cells iPSCs Using Retroviral Vector with GFP

मानव प्रेरित pluripotent स्टेम सेल (IPSCs) GFP साथ रेट्रोवायरल वैक्टर का उपयोग में दैहिक कोशिकाओं reprogramming

Human embryonic stem cells (hESCs) are pluripotent and an invaluable cellular sources for in vitro disease modeling and regenerative medicine1. It has ...

Preparation of Mouse Embryonic Fibroblast Cells Suitable for Culturing Human Embryonic and Induced Pluripotent Stem Cells

माउस भ्रूण fibroblast कोशिकाओं संवर्धन मानव भ्रूण और प्रेरित pluripotent स्टेम सेल के लिए उपयुक्त की तैयारी

In general, human embryonic stem cells (hESCs) and human induced pluripotent stem cells (hiPSCs)1 can be cultured under variable conditions. However, it ...

Generation of Mice Derived from Induced Pluripotent Stem Cells

प्रेरित pluripotent स्टेम सेल से व्युत्पन्न चूहों की पीढ़ी

The production of induced pluripotent stem cells (iPSCs) from somatic cells provides a means to create valuable tools for basic research and may also ...

Generation of Human Induced Pluripotent Stem Cells from Peripheral Blood Using the STEMCCA Lentiviral Vector

मानव परिधीय रक्त से प्रेरित pluripotent स्टेम सेल का प्रयोग STEMCCA lentiviral वेक्टर पीढ़ी

Through the ectopic expression of four transcription factors, Oct4, Klf4, Sox2 and cMyc, human somatic cells can be converted to a pluripotent state, ...

Generation of Human Cardiomyocytes: A Differentiation Protocol from Feeder-free Human Induced Pluripotent Stem Cells

मानव cardiomyocytes की पीढ़ी: फीडर से मुक्त मानव प्रेरित pluripotent स्टेम सेल से एक भेदभाव प्रोटोकॉल

In order to investigate the events driving heart development and to determine the molecular mechanisms leading to myocardial diseases in humans, it is ...