Name: denaturing urea polyacrylamide gel electrophoresis (urea page)
Uploaded: 2009-10-29T07:00:00
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Ce travail a été soutenu par le conseil de Singapour académique de recherche (ARC) [numéro de la subvention 90/07]. Nous remercions pour le soutien radiodurans.

Le protocole de texte complet et détaillé de cette procédure expérimentale est disponible dans Current Protocols in Molecular Biology. Détaillées étape par étape les instructions pour l&#39;assemblage du sandwich de gel et pour les appareils de gel peut être trouvé sur le site BioRad 3. Équipement requis: Les plaques de verre (intérieur et extérieur) 10 cm de cellules: 10,1 x 7,3 cm (plaque interne), 10,1 x 8,2 cm (plaque extérieure), BioRad 20 c...

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	<li>Maniatis, T., Jeffrey, A., van deSande, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chain+length+determination+of+small+double-+and+single-stranded+DNA+molecules+by+polyacrylamide+gel+electrophoresis.">Chain length determination of small double- and single-stranded DNA molecules by polyacrylamide gel electrophoresis.</a> Biochemistry. 14, 3787-3794 (1975).</li><li>Albright, L. M., Slatko, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Denaturing+polyacrylamide+gel+electrophoresis.">Denaturing polyacrylamide gel electrophoresis.</a> Curr Protoc Nucleic Acid Chem. , (2001).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> PROTEAN II xi Cell and PROTEAN II xi 2-D Cell Instruction Manual. , (2001).</li></ol>

<ol><li> La netteté bande dépend de plusieurs facteurs. Le volume d&#39;échantillon chargé pour les bandes pointus devrait être aussi petit que possible, c&#39;est à dire idéalement entre 1-5 pl. Toutefois, jusqu&#39;à 15 ul ne peut être chargé qui assure toujours une résolution acceptable. Moins de résultats volume d&#39;échantillon plus nettes bandes. </li><li> La qualité bande est également dépendant de l&#39;épaisseur du gel. Diluant gels, tels que 0,75 mm montrent de meilleurs résultats que 1,5 mm d&#39;épaisseur des gel...

denaturing urea polyacrylamide gel electrophoresis (urea page)

PAGE urée ou électrophorèse sur gel dénaturant de polyacrylamide urée emploie 6-8 M d&#39;urée, qui dénature l&#39;ADN secondaire ou structures d&#39;ARN et est utilisé pour leur séparation dans une matrice de gel de polyacrylamide en fonction du poids moléculaire. Fragments de 2 à 500 bases, avec des différences de longueur aussi petite que d&#39;un seul nucléotide, peuvent être séparés en utilisant cette méthode 1. La migration de l&#39;échantillon est dépendante de la concentration d&#39;acrylamide choisi. Un pourcentage plus élevé de polyacrylamide résout fragments de poids moléculaire plus faible. La combinaison de l&#39;urée et des températures de 45-55 ° C pendant la course de gel permet la séparation de l&#39;ADN non structurées ou des molécules d&#39;ARN. En général, cette méthode est nécessaire d&#39;analyser ou de purifier l&#39;ADN simple brin ou de fragments d&#39;ARN, comme les oligonucléotides synthétisés ou étiquetés ou produits à partir des réactions de clivage enzymatique. Dans cet article, vidéo, nous montre comment préparer et exécuter les gels de polyacrylamide dénaturant l&#39;urée. Conseils techniques sont inclus, en plus des 1,2 protocole original.

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Denaturing Urea Polyacrylamide Gel Electrophoresis Urea PAGE

Électrophorèse sur gel dénaturant de polyacrylamide urée est utilisée pour séparer l&#39;ADN simple brin ou l&#39;ARN jusqu&#39;à une limite de 500 nucléotides. L&#39;urée en combinaison avec des échantillons dénature la chaleur et non structurées brins simples migrer dans la matrice de gel en fonction de leur poids moléculaire.

Électrophorèse sur gel dénaturant Urée polyacrylamide (PAGE urée)

Urea PAGE or denaturing urea polyacrylamide gel electrophoresis employs 6-8 M urea, which denatures secondary DNA or RNA structures and is used for their ...

Research

JoVE Journal

Biology

Denaturing Urea Polyacrylamide Gel Electrophoresis (Urea PAGE)

Denaturing Gradient Gel Electrophoresis (DGGE)

Denaturing Gradient Gel Electrophoresis DGGE

Électrophorèse sur gel dénaturant Dégradé (DGGE)

Recherche

Biologie

Optimized Fibrin Gel Bead Assay for the Study of Angiogenesis

Optimisé fibrine billes de gel d&#39;analyse pour l&#39;étude de l&#39;angiogenèse

Angiogenesis is a complex multi-step process, where, in response to angiogenic stimuli, new vessels are created from the existing vasculature.  These ...

Assessing Neural Stem Cell Motility Using an Agarose Gel-based Microfluidic Device

Évaluer la motilité Neural Stem Cell utilisant un gel d&#39;agarose à base dispositif microfluidique

While microfluidic technology is reaching a new level of maturity for macromolecular assays, cell-based assays are still at an infant stage1. This is ...

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Amyloid aggregation is associated with numerous protein misfolding pathologies and underlies the infectious properties of prions, which are ...

Fast and Sensitive Colloidal Coomassie G-250 Staining for Proteins in Polyacrylamide Gels

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Blue Native Polyacrylamide Gel Electrophoresis (BN-PAGE) for Analysis of Multiprotein Complexes from Cellular Lysates

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Bleu d&#39;électrophorèse sur gel de polyacrylamide natif (BN-PAGE) pour l&#39;analyse des complexes multiprotéiques de lysats cellulaires

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Pouring and Running a Protein Gel by reusing Commercial Cassettes

Verser et exécution d&#39;un gel de protéine en réutilisant Cassettes commerciaux

The evaluation of proteins using sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) analysis is a common technique used by biochemistry ...

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Confirmation des voies métaboliques et la découverte par 13 C-étiquetage des acides aminés protéinogènes

Microbes have complex metabolic pathways that can be investigated using biochemistry and functional genomics methods. One important technique to examine ...

Agarose Gel Electrophoresis for the Separation of DNA Fragments

Électrophorèse sur gel d&#39;agarose pour la séparation de fragments d&#39;ADN

Agarose gel electrophoresis is the most effective way of separating DNA fragments of varying sizes ranging from 100 bp to 25 kb1. Agarose is isolated from ...

Preparation of DNA-crosslinked Polyacrylamide Hydrogels

Préparation de l&#39;ADN réticulé polyacrylamide hydrogels

Mechanobiology is an emerging scientific area that addresses the critical role of physical cues in directing cell morphology and function. For example, ...