Name: denaturing urea polyacrylamide gel electrophoresis (urea page)
Uploaded: 2009-10-29T07:00:00
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Este trabalho foi financiado pela Academic Singapura Research Council (ARC) [número de concessão 90/07]. Agradecemos pelo apoio radiodurans.

O protocolo de texto completo e detalhado para este procedimento experimental está disponível em protocolos atuais em Biologia Molecular. Detalhadas passo-a-passo as instruções para a montagem do sanduíche de gel e gel para os aparelhos podem ser encontrados no site da BioRad 3. Equipamentos necessários: Placas de vidro (interno e externo) 10 células cm: 10,1 x 7.3 cm (placa interna), 10,1 x 8,2 cm (placa externa), BioRad 20 celulares cm: 20 x 20 cm (pl...

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	<li>Maniatis, T., Jeffrey, A., van deSande, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chain+length+determination+of+small+double-+and+single-stranded+DNA+molecules+by+polyacrylamide+gel+electrophoresis.">Chain length determination of small double- and single-stranded DNA molecules by polyacrylamide gel electrophoresis.</a> Biochemistry. 14, 3787-3794 (1975).</li><li>Albright, L. M., Slatko, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Denaturing+polyacrylamide+gel+electrophoresis.">Denaturing polyacrylamide gel electrophoresis.</a> Curr Protoc Nucleic Acid Chem. , (2001).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> PROTEAN II xi Cell and PROTEAN II xi 2-D Cell Instruction Manual. , (2001).</li></ol>

<ol><li> A nitidez da banda depende de vários fatores. O volume da amostra carregada para as bandas nítidas deve ser o menor possível, isto é, idealmente entre 1-5 mL. No entanto, até 15 mL podem ser carregados que ainda garante uma resolução aceitável. Resultados menos amostra de volume em faixas mais nítidas. </li><li> A qualidade da banda é também dependente da espessura do gel. Géis mais finas, como 0,75 milímetro mostram melhores resultados do que 1,5 milímetros de espessura géis. </li><li> A forma de bandas também pode ser...

denaturing urea polyacrylamide gel electrophoresis (urea page)

PAGE desnaturante uréia ou uréia eletroforese em gel de poliacrilamida emprega 6-8 M de uréia, que desnatura DNA secundário ou estruturas de RNA e é usado para a sua separação em uma matriz de gel de poliacrilamida com base no peso molecular. Fragmentos de 2 a 500 bases, com diferenças de comprimento tão pequeno quanto um único nucleotídeo, podem ser separados utilizando este método 1. A migração da amostra é dependente da concentração de acrilamida escolhido. A maior porcentagem de poliacrilamida resolve fragmentos menor peso molecular. A combinação de uréia e temperaturas de 45-55 ° C durante a execução gel permite a separação de DNA não estruturados ou moléculas de RNA. Em geral, este método é necessário para analisar ou purificar DNA de fita simples ou fragmentos de RNA, tais como oligonucleotídeos sintetizados ou rotulados ou produtos a partir de reações de clivagem enzimática. Neste artigo de vídeo vamos mostrar como preparar e executar o gel de poliacrilamida desnaturante uréia. Dicas técnicas estão incluídos, além dos 1,2 protocolo original.

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Denaturing Urea Polyacrylamide Gel Electrophoresis Urea PAGE

Desnaturação uréia eletroforese em gel de poliacrilamida é usado para separar single-stranded DNA ou RNA até um limite de 500 nucleotídeos. Uréia em combinação com amostras de calor desnatura e não estruturadas cadeias simples migrar dentro da matriz de gel de acordo com seu peso molecular.

Desnaturação Uréia Eletroforese em Gel de Poliacrilamida (PAGE Urea)

Urea PAGE or denaturing urea polyacrylamide gel electrophoresis employs 6-8 M urea, which denatures secondary DNA or RNA structures and is used for their ...

Research

JoVE Journal

Biology

Denaturing Urea Polyacrylamide Gel Electrophoresis (Urea PAGE)

Denaturing Gradient Gel Electrophoresis (DGGE)

Denaturing Gradient Gel Electrophoresis DGGE

Eletroforese em Gel de gradiente desnaturante (DGGE)

Biologia

Optimized Fibrin Gel Bead Assay for the Study of Angiogenesis

Otimizado de fibrina Gel Assay Bead para o Estudo da angiogênese

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Assessing Neural Stem Cell Motility Using an Agarose Gel-based Microfluidic Device

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Eletroforese em Gel de Poliacrilamida azul Nativo (BN-PAGE) para Análise de Complexos Multiproteicos de Lisados ​​Celular

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Pouring and Running a Protein Gel by reusing Commercial Cassettes

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Mechanobiology is an emerging scientific area that addresses the critical role of physical cues in directing cell morphology and function. For example, ...