Name: denaturing urea polyacrylamide gel electrophoresis (urea page)
Uploaded: 2009-10-29T07:00:00
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Este trabajo fue apoyado por el consejo de investigación académica de Singapur (ARC) [número de concesión 90/07]. Damos las gracias por el apoyo radiodurans.

El protocolo de texto completo y detallado de este procedimiento experimental está disponible en los protocolos actuales en biología molecular. Detalladas paso a paso las instrucciones para el montaje del bocadillo de gel y gel para los aparatos se pueden encontrar en el sitio web BioRad 3. Equipo necesario: Placas de vidrio (interior y exterior) 10 cm de células: 10,1 x 7,3 cm (placa interior), 10,1 x 8,2 cm (la placa exterior), BioRad 20 cm de células: 2...

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	<li>Maniatis, T., Jeffrey, A., van deSande, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chain+length+determination+of+small+double-+and+single-stranded+DNA+molecules+by+polyacrylamide+gel+electrophoresis.">Chain length determination of small double- and single-stranded DNA molecules by polyacrylamide gel electrophoresis.</a> Biochemistry. 14, 3787-3794 (1975).</li><li>Albright, L. M., Slatko, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Denaturing+polyacrylamide+gel+electrophoresis.">Denaturing polyacrylamide gel electrophoresis.</a> Curr Protoc Nucleic Acid Chem. , (2001).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> PROTEAN II xi Cell and PROTEAN II xi 2-D Cell Instruction Manual. , (2001).</li></ol>

<ol><li> La nitidez de la banda depende de varios factores. El volumen de muestra cargada de bandas de fuerte debe ser lo más pequeña posible, es decir, lo ideal es entre 1.5 l. Sin embargo, hasta 15 l puede ser cargado que todavía asegura una resolución aceptable. Menos de resultados de la muestra de volumen en las bandas más nítida. </li><li> La calidad de la banda también depende del grosor del gel. Diluyente geles, como por ejemplo 0,75 mm muestran mejores resultados que los geles 1,5 mm de espesor. </li><li> La forma de las bandas t...

denaturing urea polyacrylamide gel electrophoresis (urea page)

PÁGINA urea o desnaturalización de poliacrilamida electroforesis en gel de urea cuenta con 8.6 M de urea, lo que desnaturaliza el ADN o ARN estructuras secundarias y se utiliza para su separación en una matriz de gel de poliacrilamida en base al peso molecular. Fragmentos de entre 2 y 500 bases, con las diferencias de longitud tan pequeño como un solo nucleótido, pueden ser separados utilizando este método 1. La migración de la muestra depende de la concentración de acrilamida elegido. Un mayor porcentaje de poliacrilamida se resuelve fragmentos de menor peso molecular. La combinación de urea y temperaturas de 45-55 ° C durante la ejecución del gel permite la separación de ADN no estructurados o moléculas de ARN. En general, este método es necesario para analizar o purificar el ADN de cadena sencilla o fragmentos de ARN, tales como los oligonucleótidos sintetizados o etiqueta o de los productos de las reacciones de escisión enzimática. En este artículo de vídeo que muestran cómo preparar y ejecutar los geles de poliacrilamida desnaturalizantes urea. Consejos técnicos se incluyen, además de los 1,2 del protocolo original.

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Denaturing Urea Polyacrylamide Gel Electrophoresis Urea PAGE

Poliacrilamida electroforesis en gel de urea se utiliza para separar una sola cadena de ADN o ARN, hasta un límite de 500 nucleótidos. Urea en combinación con el calor desnaturaliza las muestras y no estructurados cadenas simples migrar dentro de la matriz de gel de acuerdo a su peso molecular.

Poliacrilamida electroforesis en gel de urea (urea PÁGINA)

Urea PAGE or denaturing urea polyacrylamide gel electrophoresis employs 6-8 M urea, which denatures secondary DNA or RNA structures and is used for their ...

Research

JoVE Journal

Biology

Denaturing Urea Polyacrylamide Gel Electrophoresis (Urea PAGE)

Denaturing Gradient Gel Electrophoresis (DGGE)

Denaturing Gradient Gel Electrophoresis DGGE

Gradiente desnaturalizante electroforesis en gel (DGGE)

Investigación

Biología

Optimized Fibrin Gel Bead Assay for the Study of Angiogenesis

Optimizado de gel de fibrina bolas de ensayo para el Estudio de la angiogénesis

Angiogenesis is a complex multi-step process, where, in response to angiogenic stimuli, new vessels are created from the existing vasculature.  These ...

Assessing Neural Stem Cell Motility Using an Agarose Gel-based Microfluidic Device

La evaluación de la motilidad de células madre neurales uso de un gel de agarosa al dispositivo basado en microfluídica

While microfluidic technology is reaching a new level of maturity for macromolecular assays, cell-based assays are still at an infant stage1. This is ...

Screening for Amyloid Aggregation by Semi-Denaturing Detergent-Agarose Gel Electrophoresis

La detección de la agregación amiloide de Semi-desnaturalización electroforesis en gel de agarosa-detergente

Amyloid aggregation is associated with numerous protein misfolding pathologies and underlies the infectious properties of prions, which are ...

Fast and Sensitive Colloidal Coomassie G-250 Staining for Proteins in Polyacrylamide Gels

Rápido y sensible coloidal Coomassie G-250 La tinción de proteínas en geles de poliacrilamida

Coomassie Brilliant Blue (CBB) is a dye commonly used for the visualization of proteins separated by SDS-PAGE, offering a simple staining procedure and ...

Blue Native Polyacrylamide Gel Electrophoresis (BN-PAGE) for Analysis of Multiprotein Complexes from Cellular Lysates

Blue Native Polyacrylamide Gel Electrophoresis BN-PAGE for Analysis of Multiprotein Complexes from Cellular Lysates

Azul nativos electroforesis en gel de poliacrilamida (BN-PAGE) para el análisis de los complejos Multiproteinas de lisados ​​celulares

Multiprotein complexes (MPCs) play a crucial role in cell signalling, since most proteins can be found in functional or regulatory complexes with other ...

Pouring and Running a Protein Gel by reusing Commercial Cassettes

Verter y ejecución de un gel de proteínas mediante la reutilización de casetes comerciales

The evaluation of proteins using sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) analysis is a common technique used by biochemistry ...

Metabolic Pathway Confirmation and Discovery Through 13C-labeling of Proteinogenic Amino Acids

Metabolic Pathway Confirmation and Discovery Through 13C-labeling of Proteinogenic Amino Acids

Confirmación vía metabólica y el descubrimiento a través de 13 C-etiquetado de proteinogenic Aminoácidos

Microbes have complex metabolic pathways that can be investigated using biochemistry and functional genomics methods. One important technique to examine ...

Agarose Gel Electrophoresis for the Separation of DNA Fragments

Electroforesis en gel de agarosa para la separación de los fragmentos de ADN

Agarose gel electrophoresis is the most effective way of separating DNA fragments of varying sizes ranging from 100 bp to 25 kb1. Agarose is isolated from ...

Preparation of DNA-crosslinked Polyacrylamide Hydrogels

Preparación de ADN-poliacrilamida reticulada hidrogeles

Mechanobiology is an emerging scientific area that addresses the critical role of physical cues in directing cell morphology and function. For example, ...