Name: in vivo imaging of deep cortical layers using a microprism
Uploaded: 2009-08-27T16:00:00
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हम YFP चूहों प्रदान करने के लिए एंथनी जे Koleske, पीएचडी धन्यवाद.

भाग 1: Microprism प्रकाशिकी और माइक्रोस्कोप सेटअप <ol><li> microprisms का उपयोग हम 1 मिमी, सही कोण prisms BK7 Optosigma निगम (चित्रा 1) से खरीदा कांच से बने हैं. Microprisms संदंश का उपयोग जब भी संभव नियंत्रित किया जाता है. </li><li> microprism के कर्ण बढ़ाया च...

<ol>
	<li>Pologruto, T. A., Sabatini, B. L., Svoboda, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ScanImage:+flexible+software+for+operating+laser+scanning+microscopes.">ScanImage: flexible software for operating laser scanning microscopes.</a> Biomed Eng Online. 2, 13-13 (2003).</li><li>Feng, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+neuronal+subsets+in+transgenic+mice+expressing+multiple+spectral+variants+of+GFP.">Imaging neuronal subsets in transgenic mice expressing multiple spectral variants of GFP.</a> Neuron. 28 (1), 41-41 (2000).</li><li>Kleinfeld, D., Mitra, P. P., Helmchen, F., Denk, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluctuations+and+stimulus-induced+changes+in+blood+flow+observed+in+individual+capillaries+in+layers+2+through+4+of+rat+neocortex.">Fluctuations and stimulus-induced changes in blood flow observed in individual capillaries in layers 2 through 4 of rat neocortex.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 95 (26), 15741-15741 (1998).</li></ol>

एक इमेजिंग प्रयोग में एक microprism का उपयोग अपेक्षाकृत सरल है और neocortex पर vivo अध्ययन में लिए कई लाभ प्रदान करता है है. प्रतिनिधि इस तकनीक का उपयोग कर उदाहरण परत वी cortical न्यूरॉन्स में पीले फ्लोरोसेंट प्रोटीन व्यक्?...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>With enhanced silver reflective coating-(R77)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>OptoSigma Corp. (Santa Ana, CA)</td>
<td>055-0010</td>
<td>With enhanced silver reflective coating-(R77)</td>
</tr>
<tr>
<td>Fluorescein-dextran</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>FD70</td>
<td>70 kDa </td>
</tr>
<tr>
<td>0.28 NA, 4x air objective</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Olympus</td>
<td>XLFLUOR 4x/340</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>0.60 NA, 40x air objective</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Olympus</td>
<td>LUCPLFLN</td>
<td>With 0-2 mm coverglass correction</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>

in vivo imaging of deep cortical layers using a microprism

हम microprism के आकार में एक गहरी मस्तिष्क इमेजिंग जांच का उपयोग cortical ऊतक के vivo इमेजिंग में के लिए एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं. Microprisms आकार में 1 मिमी हैं और उत्तेजना और उत्सर्जन प्रकाश के आंतरिक प्रतिबिंब की अनुमति कर्ण पर एक चिंतनशील कोटिंग है. microprism जांच एक परिप्रेक्ष्य के साथ एक साथ कई cortical परतों छवियों को आमतौर पर केवल टुकड़ा तैयारी में देखा. छवियाँ के साथ एक बड़े एकत्र कर रहे हैं क्षेत्र देखने के (~ 900 सुक्ष्ममापी). इसके अलावा, हम गैर अस्तित्व शल्य प्रक्रिया पर विवरण और माइक्रोस्कोप सेटअप प्रदान करते हैं. प्रतिनिधि परिणाम तेरा-1 YFP - एच उनके शिखर dendrites सतही cortical परत के माध्यम से विस्तार और tufts में विस्तार दिखा चूहों से परत वी पिरामिड न्यूरॉन्स की छवियाँ शामिल हैं. संकल्प छवि परत वी न्यूरॉन्स के सोम के पास वृक्ष के समान spines के लिए पर्याप्त था. फ्लोरोसेंट डाई के इंजेक्शन पूंछ नस प्रांतस्था में रक्त वाहिकाओं के जटिल नेटवर्क से पता चलता है. लाल रक्त कोशिकाओं (RBCs) की capillaries के माध्यम से बह रेखा स्कैनिंग आरबीसी वेग और प्रवाह दरों को प्राप्त किया जा सकता है पता चलता है. इस उपन्यास microprism जांच एक सुरुचिपूर्ण, अभी तक शक्तिशाली गहरी सेलुलर संरचनाओं और vivo में cortical समारोह visualizing की नई विधि है.

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In vivo Imaging of Deep Cortical Layers using a Microprism

राइट - कोण माउस neocortex में डाला microprisms कई cortical परतों की एक आम तौर पर टुकड़ा में पाया दृष्टिकोण के साथ गहरी इमेजिंग के लिए अनुमति देता है. एक मिलीमीटर microprisms एक विस्तृत क्षेत्र के दृश्य (~ 900 सुक्ष्ममापी) और स्थानिक वृक्ष के समान spines को हल करने के लिए पर्याप्त संकल्प प्रदान करते हैं. हम परत वी neuronal इमेजिंग और neocortical संवहनी microprisms का उपयोग इमेजिंग प्रदर्शित करता है.

दीप cortical एक Microprism का उपयोग कर की परतें vivo इमेजिंग में

We present a protocol for in vivo imaging of cortical tissue using a deep-brain imaging probe in the shape of a microprism.  Microprisms are 1-mm in size ...

Research

JoVE Journal

Biology

In vivo Imaging of Deep Cortical Layers using a Microprism

Preparing E18 Cortical Rat Neurons for Compartmentalization in a Microfluidic Device

एक microfluidic डिवाइस में E18 Compartmentalization के लिए cortical चूहा न्यूरॉन्स की तैयारी

In this video, we demonstrate the preparation of E18 cortical rat neurons. E18 cortical rat neurons are obtained from E18 fetal rat cortex previously ...

Preparation of Dissociated Mouse Cortical Neuron Cultures

Dissociated माउस cortical न्यूरॉन संस्कृति की तैयारी

This video will guide you through the process for generating cortical neuronal cultures from late embryo and early postnatal mouse brain. These cultures ...

Calcium Imaging of Cortical Neurons using Fura-2 AM

AM Fura - 2 का उपयोग cortical न्यूरॉन्स की कैल्शियम इमेजिंग

Calcium imaging is a common technique that is useful for measuring calcium signals in cultured cells. Calcium imaging techniques take advantage of calcium ...

In vivo Bioluminescent Imaging of Mammary Tumors Using IVIS Spectrum

In vivo Bioluminescent Imaging of Mammary Tumors Using IVIS Spectrum

स्तन IVIS स्पेक्ट्रम का उपयोग ट्यूमर के vivo bioluminescent इमेजिंग में

4T1 mouse mammary tumor cells can be implanted sub-cutaneously in nu/nu mice to form palpable tumors in 15 to 20 days. This xenograft tumor model system ...

Imaging Protein-protein Interactions in vivo

Imaging Protein-protein Interactions in vivo

इमेजिंग प्रोटीन - प्रोटीन सहभागिता Vivo में</em

Protein-protein interactions are a hallmark of all essential cellular processes. However, many of these interactions are transient, or energetically weak, ...

Single-molecule Imaging of Gene Regulation In vivo Using Cotranslational Activation by Cleavage (CoTrAC)

Single-molecule Imaging of Gene Regulation In vivo Using Cotranslational Activation by Cleavage CoTrAC

जीन विनियमन के एकल अणु इमेजिंग<em&gt; Vivo में</em&gt; विखंडन द्वारा Cotranslational सक्रियकरण (CoTrAC) का उपयोग

We describe a fluorescence microscopy method, Co-Translational Activation by Cleavage (CoTrAC) to image the production of protein molecules in live cells ...

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

वयस्क माउस Calvarial अस्थि मज्जा में hematopoietic स्टेम और पूर्वपुस्र्ष कोशिकाओं के Vivo 4 आयामी ट्रैकिंग में

Through a delicate balance between quiescence and proliferation, self renewal and production of differentiated progeny, hematopoietic stem cells (HSCs) ...

Quantitation of Protein Expression and Co-localization Using Multiplexed Immuno-histochemical Staining and Multispectral Imaging

प्रोटीन अभिव्यक्ति और सह स्थानीयकरण मल्टिप्लेक्स इम्यूनो-histochemical धुंधला और multispectral इमेजिंग का उपयोग के quantitation

Immunohistochemistry is a commonly used clinical and research lab detection technique for investigating protein expression and localization within ...

High-resolution Time-lapse Imaging and Automated Analysis of Microtubule Dynamics in Living Human Umbilical Vein Endothelial Cells

उच्च संकल्प समय चूक इमेजिंग और जीवित मानव नाल की शिरा endothelial कोशिकाओं में microtubule गतिशीलता की स्वचालित विश्लेषण

The physiological process by which new vasculature forms from existing vasculature requires specific signaling events that trigger morphological changes ...

Measuring the Stiffness of Ex Vivo Mouse Aortas Using Atomic Force Microscopy

Measuring the Stiffness of Ex Vivo Mouse Aortas Using Atomic Force Microscopy

मापने की कठोरता<em&gt; पूर्व विवो</em&gt; माउस Aortas परमाणु शक्ति माइक्रोस्कोपी का उपयोग

Arterial stiffening is a significant risk factor and biomarker for cardiovascular disease and a hallmark of aging. Atomic force microscopy (AFM) is a ...