Name: in vivo imaging of deep cortical layers using a microprism
Uploaded: 2009-08-27T16:00:00
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我々は、YFPマウスを提供するためのアンソニーJ. Koleske、博士に感謝する。

パート1：マイクロプリズムの光学と顕微鏡のセットアップ<ol><li>我々が使用するmicroprismsはOptosigmaコーポレーション（図1）から購入したBK7ガラス製の1mm、直角プリズムです。 Microprismsは、可能な限り鉗子を使用して処理されます。 </li><li> 2000nmの - マイクロプリズムの斜辺が400から97％以上の反射率を提供するために強化された銀で被覆されている。これはレーザーの励起光と放射される蛍?...

<ol>
	<li>Pologruto, T. A., Sabatini, B. L., Svoboda, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ScanImage:+flexible+software+for+operating+laser+scanning+microscopes.">ScanImage: flexible software for operating laser scanning microscopes.</a> Biomed Eng Online. 2, 13-13 (2003).</li><li>Feng, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+neuronal+subsets+in+transgenic+mice+expressing+multiple+spectral+variants+of+GFP.">Imaging neuronal subsets in transgenic mice expressing multiple spectral variants of GFP.</a> Neuron. 28 (1), 41-41 (2000).</li><li>Kleinfeld, D., Mitra, P. P., Helmchen, F., Denk, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluctuations+and+stimulus-induced+changes+in+blood+flow+observed+in+individual+capillaries+in+layers+2+through+4+of+rat+neocortex.">Fluctuations and stimulus-induced changes in blood flow observed in individual capillaries in layers 2 through 4 of rat neocortex.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 95 (26), 15741-15741 (1998).</li></ol>

イメージングの実験ではマイクロプリズムを使用しては比較的簡単ですし、新皮質上でin vivo試験のための多くの利点を提供しています。このテクニックを使用する代表的な例としては、V層の皮質ニューロンにおける黄色蛍光タンパク質を発現するトランスジェニックマウスから撮影した画像が含まれています。 microprismsを使用して、一つはV層、皮質表面の下に約1 mmの大錐体細胞体のコレク...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>With enhanced silver reflective coating-(R77)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>OptoSigma Corp. (Santa Ana, CA)</td>
<td>055-0010</td>
<td>With enhanced silver reflective coating-(R77)</td>
</tr>
<tr>
<td>Fluorescein-dextran</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>FD70</td>
<td>70 kDa </td>
</tr>
<tr>
<td>0.28 NA, 4x air objective</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Olympus</td>
<td>XLFLUOR 4x/340</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>0.60 NA, 40x air objective</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Olympus</td>
<td>LUCPLFLN</td>
<td>With 0-2 mm coverglass correction</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>

in vivo imaging of deep cortical layers using a microprism

我々はマイクロプリズムの形状で深脳イメージングプローブを用いて皮質組織のin vivoイメージングのためのプロトコルを提示する。 Microprismsのサイズは1 mmのものであり、励起および発光光の内部反射を可能にするために斜辺上に反射コーティングを持っている。マイクロプリズムは通常、スライス標本に見られるような視点で同時に複数の皮質層の画像を調査。画像は、大視野（〜900μmの）で収集されます。さらに、我々は非生存外科手術と顕微鏡のセットアップに関する詳細を提供します。代表的な結果は、表面的な皮質層を貫通して延びると房に延び、その尖頭の樹状突起を示す汝- 1 YFP - HマウスからV層錐体ニューロンの画像が含まれています。分解能はV層のニューロンの細胞体の近くに画像の樹状突起棘に十分であった。蛍光色素の尾静脈注射は、皮質の血管の複雑なネットワークを明らかにする。毛細血管を流れる赤血球（RBC）のラインスキャンは、赤血球速度とフラックスレートが得られることを明らかにする。この小説マイクロプリズムのプローブは、深い細胞構造とin vivoでの皮質機能の可視化のエレガント、かつ強力な新しい方法です。

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In vivo Imaging of Deep Cortical Layers using a Microprism

マウスの新皮質に挿入直角microprismsは通常、スライスに見られる視点を持つ複数の皮質層の深いイメージングが可能になります。一ミリmicroprismsは、広い視野（〜900μm）と樹状突起棘を解決するために十分な空間解像度を提供します。我々はV層神経イメージングとmicroprismsを使用して新皮質の血管イメージングを示す。

マイクロプリズムを使ってDeep皮質層のin vivoイメージング

We present a protocol for in vivo imaging of cortical tissue using a deep-brain imaging probe in the shape of a microprism.  Microprisms are 1-mm in size ...

Research

JoVE Journal

Biology

In vivo Imaging of Deep Cortical Layers using a Microprism

Preparing E18 Cortical Rat Neurons for Compartmentalization in a Microfluidic Device

マイクロ流体デバイスでコンパートメントのためのE18脳ラットのニューロンの準備

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Preparation of Dissociated Mouse Cortical Neuron Cultures

解離マウス皮質ニューロンの培養の準備

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Calcium Imaging of Cortical Neurons using Fura-2 AM

AMフラ-2を用いて皮質ニューロンのカルシウムイメージング

Calcium imaging is a common technique that is useful for measuring calcium signals in cultured cells. Calcium imaging techniques take advantage of calcium ...

In vivo Bioluminescent Imaging of Mammary Tumors Using IVIS Spectrum

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イメージングタンパク質間相互作用 in vivoで</em

Protein-protein interactions are a hallmark of all essential cellular processes. However, many of these interactions are transient, or energetically weak, ...

Single-molecule Imaging of Gene Regulation In vivo Using Cotranslational Activation by Cleavage (CoTrAC)

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遺伝子調節の1分子蛍光イメージング<emインビボ&gt;</em&gt;開裂により同時翻訳アクティベーションの使用（CoTrAC）

We describe a fluorescence microscopy method, Co-Translational Activation by Cleavage (CoTrAC) to image the production of protein molecules in live cells ...

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成体マウス頭蓋冠骨髄中の造血幹細胞および前駆細胞のin vivo 4次元トラッキングで

Through a delicate balance between quiescence and proliferation, self renewal and production of differentiated progeny, hematopoietic stem cells (HSCs) ...

Quantitation of Protein Expression and Co-localization Using Multiplexed Immuno-histochemical Staining and Multispectral Imaging

多重化された免疫組織化学染色およびマルチスペクトルイメージングを用いたタンパク質発現と共局在の定量

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High-resolution Time-lapse Imaging and Automated Analysis of Microtubule Dynamics in Living Human Umbilical Vein Endothelial Cells

リビングヒト臍帯静脈内皮細胞における高解像度タイムラプスイメージングと微小管ダイナミクスの自動解析

The physiological process by which new vasculature forms from existing vasculature requires specific signaling events that trigger morphological changes ...

Measuring the Stiffness of Ex Vivo Mouse Aortas Using Atomic Force Microscopy

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