Name: in vivo imaging of deep cortical layers using a microprism
Uploaded: 2009-08-27T16:00:00
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우리는 YFP 마우스를 제공 앤소니 J. Koleske, 박사 학위를 주셔서 감사합니다.

1 부 : Microprism의 광학 현미경 설정 <ol><li> 우리가 사용하는 마이크로는 Optosigma 공사 (그림 1)에서 구입한 BK7 유리로 만든 1 mm, 오른쪽 - 각도 프리즘입니다. 마이크로가 가능한 집게를 사용하여 처리됩니다. </li><li> 2,000 NM - microprism의 hypotenuse 400에서 이상 97%의 반사율을 제공하기 위해 향상된 은으로 코팅됩니다. 이것은 레이저 여기 광과 형광 방출 모두의 내부 반사를 제공합니다. </li><li> 마이크?...

<ol>
	<li>Pologruto, T. A., Sabatini, B. L., Svoboda, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ScanImage:+flexible+software+for+operating+laser+scanning+microscopes.">ScanImage: flexible software for operating laser scanning microscopes.</a> Biomed Eng Online. 2, 13-13 (2003).</li><li>Feng, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+neuronal+subsets+in+transgenic+mice+expressing+multiple+spectral+variants+of+GFP.">Imaging neuronal subsets in transgenic mice expressing multiple spectral variants of GFP.</a> Neuron. 28 (1), 41-41 (2000).</li><li>Kleinfeld, D., Mitra, P. P., Helmchen, F., Denk, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluctuations+and+stimulus-induced+changes+in+blood+flow+observed+in+individual+capillaries+in+layers+2+through+4+of+rat+neocortex.">Fluctuations and stimulus-induced changes in blood flow observed in individual capillaries in layers 2 through 4 of rat neocortex.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 95 (26), 15741-15741 (1998).</li></ol>

이미징 실험에서 microprism를 사용하면 비교적 간단하고 네크로 텍스의 생체내 연구에 많은 장점을 제공합니다. 이 기술을 사용하는 대표적인 예는 레이어 V 피질 뉴런에 노란색 형광 단백질을 표현하는 유전자 변형 생쥐에서 찍힌 사진을 포함합니다. 마이크로 사용하여 하나는 레이어 V 대형 피라미드 세포 기관의 집합, 대뇌 피질의 표면 아래 약 1mm를 볼 수 있습니다. 또한 플로팅 (그림 2)에 divergi...

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<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>With enhanced silver reflective coating-(R77)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>OptoSigma Corp. (Santa Ana, CA)</td>
<td>055-0010</td>
<td>With enhanced silver reflective coating-(R77)</td>
</tr>
<tr>
<td>Fluorescein-dextran</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>FD70</td>
<td>70 kDa </td>
</tr>
<tr>
<td>0.28 NA, 4x air objective</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Olympus</td>
<td>XLFLUOR 4x/340</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>0.60 NA, 40x air objective</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Olympus</td>
<td>LUCPLFLN</td>
<td>With 0-2 mm coverglass correction</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>

in vivo imaging of deep cortical layers using a microprism

우리는 microprism 모양의 깊은 두뇌 이미징 프로브를 사용하여 대뇌 피질의 조직의 생체내 이미징에 대한 프로토콜을 제시한다. 마이크로의 크기는 1 mm이며, 여기 및 방출 빛의 내부 반사를 허용하도록 hypotenuse에 반사 코팅 있습니다. 관점 microprism 프로브가 동시에 이미지를 여러 피질 층은 일반적으로 전용 슬라이스 준비 모습. 이미지가 크고 회수 필드 -보기 (~ 900 μm의). 또한, 우리는 아닌 생존 수술에 대한 자세한 내용 및 현미경 설정을 제공합니다. 대표 결과는 표면 피질 층을 통해 확장하고 플로팅에 걸쳐 자신의 혀끝의 dendrites를 보여주는 뜻이 - 1 YFP - H 마우스에서 레이어 V 피라미드의 뉴런의 이미지가 포함되어 있습니다. 해상도 계층 V의 뉴런의 소마 근처 이미지 돌기의 쪽이하기에 충분했다. 형광 염료의 꼬리 - 정맥 주입은 피질의 혈관의 복잡한 네트워크를 보여줍니다. 모세 혈관을 통해 흐르는 적혈구 (RBCs)의 라인 스캔은 RBC 속도 및 유량 속도를 얻을 수를 보여줍니다. 이 소설 microprism 프로브 깊은 세포 구조와 생체내에서 대뇌 피질의 기능을 시각화의 우아한 아직 강력한 새로운 방법입니다.

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In vivo Imaging of Deep Cortical Layers using a Microprism

마우스를 네크로 텍스에 삽입 마우스 오른쪽 단추로 각도 마이크로 일반적으로 통에 발견 관점 여러 피질 레이어의 깊은 화상을 허용합니다. 원 - mm 마이크로는 다양한 현장의 전망 (~ 900 μm의)와 돌기 쪽이를 해결하기 위해 충분한 공간 해상도를 제공합니다. 우리는 계층 V의 연결 이미지와 마이크로를 사용하여 neocortical 혈관 영상을 보여줍니다.

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Biology

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