Name: osmotic avoidance in caenorhabditis elegans: synaptic function of two genes, orthologues of human nrxn1 and nlgn1, as candidates for autism
Uploaded: 2009-12-11T16:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Osmotic Avoidance in Caenorhabditis elegans: Synaptic Function of Two Genes, Orthologues of Human NRXN1 and NLGN1, as Candidates for Autism at JoVE.com

ברצוננו תודה ד&quot;ר אנטוניו מירנדה-Vizuete לעזרה יקר שלו. כמו כן, אנו רוצים להביע את הכרת התודה שלנו סלמה Boulayoune ואיזבל Caballero לקבלת סיוע טכני רב ערך. עבודה זו מומנה על ידי מענק מטעם Junta de אנדלוסיה (BIO-272). מחקר זה בוצע בהסכמה עם החוקים השולטים כיום ניסויים גנטיים באירופה.

1: assay הימנעות אוסמוטי. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כ 16-24 שעות לפני assay, לאסוף חיות L4 בשלב הזחל של גנוטיפ לכל צלחת NGM טרי המכיל OP50 E. coli andincubate אותו 20 ° C. למחרת להתחיל את הניסוי עם צעירים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מומלץ לבצע את assay &quot;עיוורת&quot;. ה?...

<ol>
	<li>Sudhof, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Nature. 455 (7215), 903-903 (2008).</li><li>Fabrichny, I. P., Leone, P., Sulzenbacher, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Neuron. 56 (6), 979-979 (2007).</li><li>Garber, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Science. 317 (5835), 190-190 (2007).</li><li>Wang, K., Zhang, H., Ma, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Nature. 459 (7246), 528-528 (2009).</li><li>Ward, S., Thomson, N., White, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Journal of comparative neurology. 160 (3), 313-313 (1975).</li><li>Bargmann, C. I., Thomas, J. H., Horvitz, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cold+Spring+Harbor+symposia+on+quantitative+biology.">Cold Spring Harbor symposia on quantitative biology.</a> 55, 529-529 (1990).</li><li>White, J. G., Southgate, E., Thomsom, J. N., Brenner, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Philos. Trans. R. Soc. Lond. B Biol. Sci. 314, 1-1 (1986).</li><li>Culotti, J. G., Russell, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Genetics. 90 (2), 243-243 (1978).</li><li>Fire, A., Xu, S., Montgomery, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Nature. 391 (6669), 806-806 (1998).</li><li>Timmons, L., Fire, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Nature. 395 (6705), 854-854 (1998).</li><li>Simmer, F., Tijsterman, M., Parrish, S., Koushika, S. P., Nonet, M. L., Fire, A., Ahringer, J., Plasterk, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Curr Biol. 12, 1317-1317 (2002).</li><li>Missler, M., Zhang, W., Rohlmann, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Nature. 423 (6943), 939-939 (2003).</li><li>Varoqueaux, F., Aramuni, G., Rawson, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Neuron. 51 (6), 741-741 (2006).</li><li>Graf, E. R., Zhang, X., Jin, S. X., Scheiffele, P., Fan, J., Choih, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Cell. 119 (7), 1013-1013 (2004).</li><li>Scheiffele, P., Fan, J., Choih, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Cell. 101 (6), 657-657 (2000).</li><li>Jamain, S., Quach, H., Betancur, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Nature genetics. 34 (1), 27-27 (2003).</li><li>Szatmari, P., Paterson, A. D., Zwaigenbaum , L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Nature genetics. 39 (3), 319-319 (2007).</li></ol>

Neurexins ו neuroligins לבצע תפקידים חיוניים הילוכים הסינפטי 11 והבחנה של קשרים סינפטיים 12. מולקולות הן זוהו גנים מועמדים לאוטיזם 13,14. בסרט זה אנו מציגים שיטה פשוטה המאפשרת לנו לחקור את ההשפעה של גנים המשפיעים על תגובת הימ?...

1. לוח ג elegans זנים. <table border="1" cellspacing="0" cellpadding="0" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> זן </td><td> גן </td><td> אלל </td><td> מקור </td></tr><tr><td> בריסטול N2 </td><td> - </td><td> - </td><td> aCGC </td></tr><tr><td> VC228 </td><td> NLG-1 </td><td> ok259 </td><td> CGC </td></tr><tr><td> FX00474 </td><td> NLG-1 </td><td> tm474 </td><td> bNBP יפן </td></tr><tr><td> VC1416 </td><td> nrx-1 </td><td> ok1649 </td><td> CGC </td></tr><tr><td> FX1961 </td><td> nrx-1 </td><td> tm1961 </td><td> NBP-יפן </td></tr><tr><td> NL2099 </td><td> rrf-3 </td><td> pk1436 </td><td> CGC </td></tr><tr><td> CRR21 </td><td> nrx-1; NLG-1 </td><td> ok1649; ok259 </td><td> זו עבודה </td></tr><tr><td> CRR22 </td><td> nrx-1; NLG-1 </td><td> tm1961; ok259 </td><td> זו עבודה </td></tr></tbody></table> א Caenorhabditis גנטית מרכז, מאוניברסיטת מינסוטה, ארה&quot;ב. ב הפרויקט הלאומי Bioresource עבור הניסויי בבעלי חיים &quot;נמטודות סי אלגנס&quot;. טוקיו נשים הרפואי האוניברסיטאי, יפן.

osmotic avoidance in caenorhabditis elegans: synaptic function of two genes, orthologues of human nrxn1 and nlgn1, as candidates for autism

Neurexins ו neuroligins הם מולקולות הדבקה תא נוכח סינפסות מעוררות ו מעכבות, והם נדרשים לתפקוד נוירון לתקן רשת 1. חלבונים אלו נמצאים על ממברנות presynaptic ו postsynaptic 2. מחקרים בעכברים מעידים כי neurexins ו neurologins יש תפקיד חיוני בשידור סינפטי 1. דיווחים אחרונים הראו כי קשרים עצביים שינו במהלך הפיתוח של מערכת העצבים האנושית, להוות בסיס האטיולוגיה של מקרים רבים של ספקטרום האוטיזם 3. Caenorhabditis elegans יכולה לשמש ככלי ניסיוני כדי להקל על לימוד של תפקוד של רכיבים סינפטיים, בגלל פשטותה ניסויים במעבדה, וכן בהתחשב בכך שמערכת העצבים שלו החיווט הסינפטי התאפיינה באופן מלא. ב-C. Elegans nrx-1 ו-1 NLG גנים orthologous כדי NRXN1 ו NLGN1 הגנים האנושיים המקודדים אלפא neurexin-1 ו-1 neuroligin חלבונים, בהתאמה. בבני אדם נמטודות, ארגון neurexins ו neuroligins דומה מבחינה לתחומים פונקציונליים. ראש נמטודות מכיל את amphid, איבר חושי של נמטודות, אשר מתווכת לתגובות לגירויים שונים, כולל כוח אוסמוטי. Amphid עשוי 12 נוירונים דו קוטבית חושית עם דנדריטים ריסי אחד האקסון מסוף presynaptic 4. שניים מהם נוירונים, בשם ASHR ו ASHL חשובים במיוחד התפקוד החושי האוסמוטי, גילוי מסיסים במים דוחי עם כוח אוסמוטי גבוה 5. דנדריטים של שני נוירונים להאריך לקצה הפה האקסונים להאריך לזירה עצב, שם הם יוצרים קשרים סינפטיים עם נוירונים אחרים לקבוע את התגובה ההתנהגותית 6. כדי להעריך את ההשלכות של neurexin ו neuroligin ב והימנעות גבוה כוח אוסמוטי, אנו מראים את התגובה שונים של C. elegans מוטנטים פגום nrx-1 ו-1 NLG גנים, באמצעות שיטה המבוססת על טבעת פרוקטוז 4M 7. פנוטיפים התנהגותיים אושרו באמצעות שיבוטים RNAi ספציפיות 8. ב ג elegans, dsRNA הנדרש להפעלת RNAi יכול להיות מנוהל על ידי האכלה 9. מסירת dsRNA דרך מזון גורם הפרעה RNAi של הגן של עניין ובכך מאפשר זיהוי של רכיבים גנטיים מסלולים הרשת.

Watch this Scientific Journal Video about Osmotic Avoidance in Caenorhabditis elegans: Synaptic Function of Two Genes, Orthologues of Human NRXN1 and NLGN1, as Candidates for Autism at JoVE.com

Osmotic Avoidance in Caenorhabditis elegans: Synaptic Function of Two Genes, Orthologues of Human NRXN1 and NLGN1, as Candidates for Autism

Neurexins ו neuroligins הם קרום תא עצב הידבקות חלבונים אשר מבצעים תפקידים חיוניים בידול הילוכים הסינפטי ו. Neuroligin מוטנטים לקוי של<em&gt; ג elegans</em&gt; פגומים באיתור כוח אוסמוטי, אך כאשר הם גם מכילים מוטציה בגן המקודד neurexin, הם לשחזר את הפנוטיפ סוג בר.

הימנעות אוסמוטי ב Caenorhabditis elegans: Synaptic פונקציה של שני גנים, Orthologues של האדם NRXN1 ו NLGN1, כמו מועמדים אוטיזם

Neurexins and neuroligins are cell adhesion molecules present in excitatory and inhibitory synapses, and they are required for correct neuron network ...

Research

JoVE Journal

Biology

Osmotic Avoidance in Caenorhabditis elegans: Synaptic Function of Two Genes, Orthologues of Human NRXN1 and NLGN1, as Candidates for Autism

Isolation and In vitro Activation of Caenorhabditis elegans Sperm

Isolation and In vitro Activation of Caenorhabditis elegans Sperm

בידוד במבחנה הפעלת Caenorhabditis elegans זרע

Males and hermaphrodites are the two naturally found sexual forms in the nematode C. elegans. The amoeboid sperm are produced by both males and ...

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

זמן לשגות מיקרוסקופית של העובר בשלב מוקדם Caenorhabditis elegans

Caenorhabditis elegans has often been used as a model system in studies of early developmental processes.  The transparency of the 
embryos, the genetic ...

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

בסיסי<em&gt; Caenorhabditis elegans</em&gt; שיטות: סנכרון תצפית

Research into the molecular and developmental biology of the nematode Caenorhabditis elegans was begun in the early seventies by Sydney Brenner and it has ...

Biochemical and High Throughput Microscopic Assessment of Fat Mass in Caenorhabditis Elegans

Biochemical and High Throughput Microscopic Assessment of Fat Mass in Caenorhabditis Elegans

הערכה ביוכימית ותפוקה גבוהה מיקרוסקופית של מסת שומן ב<em&gt; Elegans Caenorhabditis</em

The nematode C. elegans has emerged as an important  model for the study of conserved genetic pathways regulating fat metabolism as  it relates to human ...

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

הפקה וניתוח בפרוסטגלנדין<em&gt; Elegans Caenorhabditis</em

Caenorhabditis elegans is emerging as a powerful animal model to study the biology of lipids1-9. Prostaglandins are an important class of eicosanoids, ...

Using Caenorhabditis elegans as a Model System to Study Protein Homeostasis in a Multicellular Organism

Using Caenorhabditis elegans as a Model System to Study Protein Homeostasis in a Multicellular Organism

The folding and assembly of proteins is essential for protein function, the long-term health of the cell, and longevity of the organism. Historically, the ...

Dietary Supplementation of Polyunsaturated Fatty Acids in Caenorhabditis elegans

Dietary Supplementation of Polyunsaturated Fatty Acids in Caenorhabditis elegans

תוספת תזונתית של חומצות שומן רב בלתי רוויות ב<em&gt; Elegans Caenorhabditis</em

Fatty acids are essential for numerous cellular functions. They serve as efficient energy storage molecules, make up the hydrophobic core of membranes, ...

Sample Preparation and Imaging of Exosomes by Transmission Electron Microscopy

הכנת הדוגמא והדימות של Exosomes על ידי במיקרוסקופ אלקטרונים הילוכים

Exosomes are nano-sized extracellular vesicles secreted by body fluids and are known to represent the characteristics of cells that secrete them. The ...

Measurement of Oxygen Consumption Rates in Intact Caenorhabditis elegans

Measurement of Oxygen Consumption Rates in Intact Caenorhabditis elegans

מדידה של קצב הצריכה של חמצן בשלם Caenorhabditis elegans

Optimal mitochondrial function is critical for healthy cellular activity, particularly in cells that have high energy demands like those in the nervous ...

Modeling Age-Associated Neurodegenerative Diseases in Caenorhabditis elegans

Modeling Age-Associated Neurodegenerative Diseases in Caenorhabditis elegans

דוגמנות גיל הקשורים מחלות ניווניות בתוך האלאים

Battling human neurodegenerative pathologies and managing their pervasive socioeconomic impact is becoming a global priority. Notwithstanding their ...