Name: osmotic avoidance in caenorhabditis elegans: synaptic function of two genes, orthologues of human nrxn1 and nlgn1, as candidates for autism
Uploaded: 2009-12-11T16:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Osmotic Avoidance in Caenorhabditis elegans: Synaptic Function of Two Genes, Orthologues of Human NRXN1 and NLGN1, as Candidates for Autism at JoVE.com

Biz onun değerli yardım için teşekkür Dr. Antonio Miranda Vizuete istiyorum. Ayrıca değerli teknik yardım için Salma Boulayoune ve Isabel Caballero minnettarlığımızı ifade etmek istiyorum. Bu çalışma Junta de Andalucia (BIO-272) bir hibe ile finanse edilmiştir. Bu araştırma, Avrupa&#39;da genetik deneyler düzenleyen mevcut yasa ile anlaşma yapılmıştır.

1: Osmotik kaçınma tahlil. <ol><li> OP50 E. içeren taze bir NGM plaka tahlil Hakkında 16-24 saat önce, her genotipin L4 larva aşamasında hayvan almak coli, 20 ° C&#39;de bu andincubate Ertesi gün genç yetişkinler denemeyi başlatmak. </li><li> Bu tahlil, &quot;körü körüne&quot; yürütmek için tavsiye edilir. Test edilecek her suşu ile plakaları deney tamamlandığında maskesiz olurdu relabelled plakaları kullanılarak tahlil yapılması, ikinci bir deneyci tarafından relabelled ...

<ol>
	<li>Sudhof, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Nature. 455 (7215), 903-903 (2008).</li><li>Fabrichny, I. P., Leone, P., Sulzenbacher, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Neuron. 56 (6), 979-979 (2007).</li><li>Garber, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Science. 317 (5835), 190-190 (2007).</li><li>Wang, K., Zhang, H., Ma, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Nature. 459 (7246), 528-528 (2009).</li><li>Ward, S., Thomson, N., White, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Journal of comparative neurology. 160 (3), 313-313 (1975).</li><li>Bargmann, C. I., Thomas, J. H., Horvitz, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cold+Spring+Harbor+symposia+on+quantitative+biology.">Cold Spring Harbor symposia on quantitative biology.</a> 55, 529-529 (1990).</li><li>White, J. G., Southgate, E., Thomsom, J. N., Brenner, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Philos. Trans. R. Soc. Lond. B Biol. Sci. 314, 1-1 (1986).</li><li>Culotti, J. G., Russell, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Genetics. 90 (2), 243-243 (1978).</li><li>Fire, A., Xu, S., Montgomery, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Nature. 391 (6669), 806-806 (1998).</li><li>Timmons, L., Fire, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Nature. 395 (6705), 854-854 (1998).</li><li>Simmer, F., Tijsterman, M., Parrish, S., Koushika, S. P., Nonet, M. L., Fire, A., Ahringer, J., Plasterk, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Curr Biol. 12, 1317-1317 (2002).</li><li>Missler, M., Zhang, W., Rohlmann, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Nature. 423 (6943), 939-939 (2003).</li><li>Varoqueaux, F., Aramuni, G., Rawson, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Neuron. 51 (6), 741-741 (2006).</li><li>Graf, E. R., Zhang, X., Jin, S. X., Scheiffele, P., Fan, J., Choih, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Cell. 119 (7), 1013-1013 (2004).</li><li>Scheiffele, P., Fan, J., Choih, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Cell. 101 (6), 657-657 (2000).</li><li>Jamain, S., Quach, H., Betancur, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Nature genetics. 34 (1), 27-27 (2003).</li><li>Szatmari, P., Paterson, A. D., Zwaigenbaum , L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Nature genetics. 39 (3), 319-319 (2007).</li></ol>

Neurexins ve neuroligins sinaptik iletim 11 ve sinaptik bağlantıları 12 farklılaşma önemli rolleri yerine. Her iki molekülleri için aday genler, otizm 13,14 olarak tespit edilmiştir. Bu video C. osmotik kaçınma yanıtını etkileyen genlerin etkisini araştırmak için bize sağlayan basit bir yöntem elegans. Neuroligin eksik mutantlar osmotik gücü tespit kusurlu ama neurexin eksikliği mutantlar 4M fruktoz çözümü kaçınar...

Tablo 1. C. elegans suşları. <table border="1" cellspacing="0" cellpadding="0"><tbody><tr><td> Gerginlik </td><td> Gen </td><td> Allel </td><td> Kaynak </td></tr><tr><td> Bristol N2 </td><td> - </td><td> - </td><td> aCGC </td></tr><tr><td> VC228 </td><td> NLG-1 </td><td> ok259 </td><td> CGC </td></tr><tr><td> FX00474 </td><td> NLG-1 </td><td> tm474 </td><td> bNBP-JAPONYA </td></tr><tr><td> VC1416 </td><td> nrx-1 </td><td> ok1649 </td><td> CGC </td></tr><tr><td> FX1961 </td><td> nrx-1 </td><td> tm1961 </td><td> NBP-JAPONYA </td></tr><tr><td> NL2099 </td><td> rrf-3 </td><td> pk1436 </td><td> CGC </td></tr><tr><td> CRR21 </td><td> nrx-1; NLG-1 </td><td> ok1649; ok259 </td><td> Bu çalışma </td></tr><tr><td> CRR22 </td><td> nrx-1; NLG-1 </td><td> tm1961; ok259 </td><td> Bu çalışma </td></tr></tbody></table> a. Caenorhabditis Genetik Merkezi, Minnesota Üniversitesi, ABD. b. Deney Hayvanları &quot;nematodu C. elegans&quot; Ulusal Bioresource Projesi. Tokyo Kadın Tıp Üniversitesi, Japonya.

osmotic avoidance in caenorhabditis elegans: synaptic function of two genes, orthologues of human nrxn1 and nlgn1, as candidates for autism

Neurexins ve neuroligins hücre adezyon moleküllerinin eksitatör ve inhibitör sinaps mevcut ve doğru nöron ağ fonksiyonu 1 için gereklidir. Bu proteinler, presinaptik ve postsinaptik membranlar 2 bulunur . Farelerde yapılan çalışmalar, neurexins ve neurologins sinaptik iletim 1 önemli bir role sahip olduğunu göstermektedir. Son raporlar, insan sinir sisteminin gelişimi sırasında değişmiş nöron bağlantıları otizm spektrum bozuklukları (3) çok sayıda vaka etyolojisi temel teşkil edebilir göstermiştir . Caenorhabditis elegans nedeniyle laboratuar deneyleri için sadeliği, deneysel bir araç olarak çalışma sinaptik bileşenlerinin işleyişini kolaylaştırmak için kullanılır, ve, sinir sistemi ve sinaptik kablolama tam olarak karakterize edilmiştir vermiştir olabilir. C elegans nrx-1 ve NLG-1 genleri sırasıyla alfa-neurexin-1 ve neuroligin-1 protein, kodlamak NRXN1 ve NLGN1 genlerin insan için orthologous. Neuroligins neurexins ve organizasyon, insan ve nematod, fonksiyonel alanlar bakımından benzer. Nematod başkanı amphid, osmotik gücü dahil olmak üzere farklı uyaranlara verilen yanıtlar aracılık nematod, bir duyu organı içerir. Amphid siliyalı dendrit ve tek bir presinaptik terminal akson 4 ile 12 duyusal bipolar nöronların yapılır. ASHR ve ashl adlı bu nöronlar, iki yüksek osmotik gücü 5 suda çözünür kovucular tespit osmotik duyusal fonksiyon özellikle önemlidir. Bu iki nöron dendritler ağız ucu uzatmak ve davranışsal yanıt 6 belirleyen diğer nöronlarla sinaptik bağlantıları aksonlar sinir halkası kadar uzanır. Yüksek osmotik gücü kaçınma neurexin ve neuroligin etkilerini değerlendirmek için, 7 4M fruktoz halka dayalı bir yöntem kullanarak, nrx-1 ve NLG 1 genlerin arızalı C. elegans mutantlar farklı tepki gösterir. Davranışsal fenotipleri belirli RNAi klonlar 8 kullanarak teyit edildi. C. elegans, RNAi tetiklemek için gerekli dsRNA 9 beslenme uygulanabilir. Gıda yoluyla dsRNA teslim ilgi böylece genetik bileşenleri ve ağ yollar kimlik sağlayan gen RNAi parazite neden olur.

Watch this Scientific Journal Video about Osmotic Avoidance in Caenorhabditis elegans: Synaptic Function of Two Genes, Orthologues of Human NRXN1 and NLGN1, as Candidates for Autism at JoVE.com

Osmotic Avoidance in Caenorhabditis elegans: Synaptic Function of Two Genes, Orthologues of Human NRXN1 and NLGN1, as Candidates for Autism

Neurexins ve neuroligins sinaptik farklılaşma ve iletiminde önemli rolleri yerine membran nöron yapışma proteinleri. Neuroligin, eksik mutantlar<em&gt; C. elegans</em&gt; Osmotik gücü tespit kusurlu, ama onlar da neurexin kodlayan gendeki bir mutasyon içerdiğinde, onlar vahşi tip fenotip kurtarabilirsiniz.

Osmotik Kaçınma IN Caenorhabditis elegans: İki Genler Synaptic Fonksiyonu, İnsan Orthologues NRXN1 Ve NLGN1</emOtizm> olarak Adaylar

Neurexins and neuroligins are cell adhesion molecules present in excitatory and inhibitory synapses, and they are required for correct neuron network ...

Research

JoVE Journal

Biology

Osmotic Avoidance in Caenorhabditis elegans: Synaptic Function of Two Genes, Orthologues of Human NRXN1 and NLGN1, as Candidates for Autism

Isolation and In vitro Activation of Caenorhabditis elegans Sperm

Isolation and In vitro Activation of Caenorhabditis elegans Sperm

İzolasyon ve In vitro Etkinleştirme Caenorhabditis elegans Sperm

Males and hermaphrodites are the two naturally found sexual forms in the nematode C. elegans. The amoeboid sperm are produced by both males and ...

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Erken Embriyo Oluşumu Zaman atlamalı Mikroskopi Caenorhabditis elegans

Caenorhabditis elegans has often been used as a model system in studies of early developmental processes.  The transparency of the 
embryos, the genetic ...

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

Temel<em&gt; Caenorhabditis elegans</em&gt; Yöntem: Senkronizasyon ve Gözlem

Research into the molecular and developmental biology of the nematode Caenorhabditis elegans was begun in the early seventies by Sydney Brenner and it has ...

Biochemical and High Throughput Microscopic Assessment of Fat Mass in Caenorhabditis Elegans

Biochemical and High Throughput Microscopic Assessment of Fat Mass in Caenorhabditis Elegans

Fat Kütle Biyokimyasal ve Yüksek Verimli Mikroskobik Değerlendirme<em&gt; Caenorhabditis Elegans</em

The nematode C. elegans has emerged as an important  model for the study of conserved genetic pathways regulating fat metabolism as  it relates to human ...

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandin Ekstraksiyon ve Analiz<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

Caenorhabditis elegans is emerging as a powerful animal model to study the biology of lipids1-9. Prostaglandins are an important class of eicosanoids, ...

Using Caenorhabditis elegans as a Model System to Study Protein Homeostasis in a Multicellular Organism

Using Caenorhabditis elegans as a Model System to Study Protein Homeostasis in a Multicellular Organism

The folding and assembly of proteins is essential for protein function, the long-term health of the cell, and longevity of the organism. Historically, the ...

Dietary Supplementation of Polyunsaturated Fatty Acids in Caenorhabditis elegans

Dietary Supplementation of Polyunsaturated Fatty Acids in Caenorhabditis elegans

Çoklu doymamış yağ asitlerinin Diyet takviyesi<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

Fatty acids are essential for numerous cellular functions. They serve as efficient energy storage molecules, make up the hydrophobic core of membranes, ...

Sample Preparation and Imaging of Exosomes by Transmission Electron Microscopy

Numune hazırlama ve transmisyon elektron mikroskobu tarafından Exosomes görüntüleme

Exosomes are nano-sized extracellular vesicles secreted by body fluids and are known to represent the characteristics of cells that secrete them. The ...

Measurement of Oxygen Consumption Rates in Intact Caenorhabditis elegans

Measurement of Oxygen Consumption Rates in Intact Caenorhabditis elegans

Oksijen tüketimi oranlarında sağlam Caenorhabditis elegans ölçümü

Optimal mitochondrial function is critical for healthy cellular activity, particularly in cells that have high energy demands like those in the nervous ...

Modeling Age-Associated Neurodegenerative Diseases in Caenorhabditis elegans

Modeling Age-Associated Neurodegenerative Diseases in Caenorhabditis elegans

Caenorhabditis elegans Yaş İlişkili Nörodejeneratif Hastalıkların Modellendirilmesi

Battling human neurodegenerative pathologies and managing their pervasive socioeconomic impact is becoming a global priority. Notwithstanding their ...

Osmotik Kaçınma IN Caenorhabditis elegans: İki Genler Synaptic Fonksiyonu, İnsan Orthologues NRXN1 Ve NLGN1 olarak Adaylar