Name: derivation of hematopoietic stem cells from murine embryonic stem cells
Uploaded: 2007-02-25T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Derivation of Hematopoietic Stem Cells from Murine Embryonic Stem Cells at JoVE.com

<p class="jove_step"> Дифференциация эмбриональных стволовых клеток </p><ol><li> Сбор возле сливающийся колбу эмбриональных стволовых клеток (ЭСК) с помощью лечения ESC трипсина. </li><li> Ресуспендируют клетки в 5 мл Дифференциация средств массовой информации и передачи не-желатин покрытием T25. Инкубировать при 37 ° С ?...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>C57Bl/6 Rag-2/gamma-c deficient mice</td>
<td>Animal</td>
<td>Taconic Farm</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Plate shaker</td>
<td>Tool</td>
<td>VWR</td>
<td>33998-360</td>
<td>Orbital Shaker by Ikaworks</td>
</tr>
<tr>
<td>Multi-channel pipettor</td>
<td>Tool</td>
<td>VWR</td>
<td>15000-174</td>
<td>ePet by BioHit</td>
</tr>
<tr>
<td>ES trypsin</td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>15090-046</td>
<td>0.25% Trypsin in PBS</td>
</tr>
<tr>
<td>Standard trypsin</td>
<td>Reagent</td>
<td>Invtrogen</td>
<td>25300-062</td>
<td>0.05% Trypsin-EDTA</td>
</tr>
<tr>
<td>PBS</td>
<td>Buffer</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>20012-027</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Enzyme-free dissociation buffer</td>
<td>Buffer</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>13151-014</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dissociation enzyme mix</td>
<td>Buffer</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>17104-019</td>
<td>500 mg Collagenase IV</td>
</tr>
<tr>
<td>Hyaluronidase</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>H2126</td>
<td>freeze in 500 uL aliquots and avoid repeated freezing and thawing.</td>
</tr>
<tr>
<td>DNAse</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>D4527</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>DMEM</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>10-017CV</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Protamine sulfate</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>P3369</td>
<td>8 ug/mL</td>
</tr>
<tr>
<td>EB differentiation media</td>
<td>medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Please view recipe on attached Protocol.doc</td>
</tr>
<tr>
<td>10% IMDM</td>
<td>medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Please view recipe on attached Protocol.doc</td>
</tr>
<tr>
<td>10% IMDM+cytokines</td>
<td>medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Please view recipe on attached Protocol.doc</td>
</tr>
<tr>
<td>20% anti-MEM</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Please view recipe on attached Protocol.doc</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

derivation of hematopoietic stem cells from murine embryonic stem cells

<p class="jove_content">Стволовых клеток определяется как клетка с возможностью как самостоятельного обновления и создавать несколько дифференцированных потомства. Эмбриональные стволовые клетки (ЭСК) получают из бластоцист из раннего эмбриона и плюрипотентные в differentiative способности. Их огромный потенциал differentiative сделало их центром внимания для большого исследования сосредоточены на выведении как уговорить их для создания клинически полезным типов клеток. Успешный вывод гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) из мышиных ЭСК было недавно достигнуто, и могут быть визуализированы в этом видео протокол. HSC, пожалуй, наиболее клинически эксплуатируемые популяции клеток, которые используются для лечения множества злокачественных опухолей кроветворной и расстройств. Тем не менее, многие пациенты, которые могли бы извлечь выгоду из HSC терапии не имеют доступа к подходящих доноров. ESC может обеспечить альтернативный источник HSC для этих пациентов. Следующий протокол устанавливает исходных линий, от которых ESC-HSC можно изучать и в усилиях по изоляции HSC из человеческих ЭСК. В этом протоколе, ESC, дифференцируются как эмбриоидных тел (ЭТ) в течение 6 дней в коммерчески доступных сыворотки предварительно отобранных для оптимального гемопоэтических дифференциации. ЭТ затем диссоциирован и инфицированных ретровирусных HoxB4. Зараженные EB-клеток, полученных из высевали на OP9 стромы, стромы костного мозга клеточной линии происходит от черепа М-CSF-/ - мышей, и ко-культивировали в присутствии органов кроветворения содействия цитокинов в течение десяти дней. Во время этого совместного культуры, инфицированных клеток значительно расширить, в результате чего поколения гетерогенных пул 100s из миллионов клеток. Эти клетки затем можно использовать, чтобы спасти и восстановить смертельно облученных мышей.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Derivation of Hematopoietic Stem Cells from Murine Embryonic Stem Cells at JoVE.com

Derivation of Hematopoietic Stem Cells from Murine Embryonic Stem Cells

<p class="jove_content">Этот протокол детали вывода трансплантации гемопоэтических стволовых клеток из мышиных эмбриональных стволовых клеток (ЭСК) и их последующей закачки в смертельно облученных мышей получателя. Короче говоря, ЭСК дифференцируются эмбриоидных органов, которые затем инфицированных ретровирусных HoxB4 и со-культивировали с OP9 стромальные клетки и гемопоэтические цитокины.</p>

Вывод гемопоэтических стволовых клеток мышей эмбриональных стволовых клеток

A stem cell is defined as a cell with the capacity to both self-renew and generate multiple differentiated progeny.  Embryonic stem cells (ESC) are ...

Research

JoVE Journal

Biology

Isolation and Transplantation of Hematopoietic Stem Cells (HSCs)

Isolation and Transplantation of Hematopoietic Stem Cells HSCs

Выделение и трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (ГСК)

Derivation of Human Embryonic Stem Cells by Immunosurgery

Вывод человеческих эмбриональных стволовых клеток на применение специфических иммунных сывороток в хирургии

The ability of human embryonic stem cells to self-renew and differentiate into all cell types of 
the body suggests that they hold great promise for both ...

Isolation and Analysis of Hematopoietic Stem Cells from the Placenta

Выделение и анализ гемопоэтических стволовых клеток из плаценты

Hematopoietic stem cells (HSCs) have the ability to self-renew and generate all cell types of the blood lineages throughout the lifetime of an individual. ...

Chromatin Immunoprecipitation from Human Embryonic Stem Cells

Хроматин Иммунопреципитация из человеческих эмбриональных стволовых клеток

The functional and structural complexity of the myriad of cells in metazoan organisms arises from a small number of stem cells. Stem cells are ...

Isolation of Early Hematopoietic Stem Cells from Murine Yolk Sac and AGM

Изоляция раннего гемопоэтических стволовых клеток мышей желточного мешка и AGM

In the mouse embryo, early hematopoiesis occurs simultaneously in multiple organs, which includes the yolk sac and aorta-gonad-mesonephros region. These ...

Isolation and Derivation of Mouse Embryonic Germinal Cells

Выделение и Вывод мышиных эмбриональных зародышевых клеток

The ability of embryonic germinal cells (EG) to differentiate into primordial germinal cells (PGCs) and later into gametes during early developmental ...

Derivation of Mouse Trophoblast Stem Cells from Blastocysts

Вывод Мышь трофобласта стволовых клеток из бластоцист

Specification of the trophectoderm is one of the earliest differentiation events of mammalian development. The trophoblast lineage derived from the ...

Efficient Derivation of Human Cardiac Precursors and Cardiomyocytes from Pluripotent Human Embryonic Stem Cells with Small Molecule Induction

Эффективное Вывод прав Сердечная Прекурсоры и кардиомиоциты из плюрипотентных эмбриональных стволовых клеток человека с малыми Индукционная Молекула

To date, the lack of a suitable human cardiac cell source has been the major setback in regenerating the human myocardium, either by cell-based ...

Phenotypic Analysis and Isolation of Murine Hematopoietic Stem Cells and Lineage-committed Progenitors

Фенотипический анализ и выделение мышей гемопоэтических стволовых клеток и Lineage, совершенных прародителей

The bone marrow is the principal site where HSCs and more mature blood cells lineage progenitors reside and differentiate in an adult organism. HSCs ...

Induction and Analysis of Epithelial to Mesenchymal Transition

Индукционные и анализ эпителиальных к мезенхимальных перехода

Epithelial  to mesenchymal transition (EMT) is essential for proper morphogenesis during  development. Misregulation of this  process has been implicated ...