Name: isolation and derivation of mouse embryonic germinal cells
Uploaded: 2009-10-22T14:00:00
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; 박사 루시 센터, 닥터 Brigit Willeford 및 MSU ALAC 공인 마우스 시설에서 교육 및 동물 관리와 지원을위한 마이크 Basett, 박사 드웨인 와이즈 박사 닐 첫번째 원고 편집을위한 Kourtney 윌킨슨 : 저자의 귀중한 도움을 인정하고 싶습니다 세자르 Monroy, 한나 스우프 및 MSU에서 동영상 제작과 함께 자신의 도움 바비 허들 스턴, 현미경 및 이미지 캡처와 함께 자신의 도움을. 이 연구는 미시시피 주립 대학에서 기관 연구 및 생물 과학학과 사무실에서 후원했다.

1 부 : 임산부 마우스 개복술 <ol><li> 자궁 경부 전위를 사용하여, 10.5-11.5 DPC에서 임신 여성 C57BL6J 마우스를 안락사. </li><li> 다음 항균 비누로 복부를 청소하고, 그것을 면도. </li><li> 면도 후, 생리 식염수로 복부를 씻으십시오. </li><li> 그리고, 멸균 거즈로 복부를 건조. </li><li> 새로운 멸균 분야로 마우스를 커버. </li><li> 포셉 및 해부 가위를 사용하여 복부 절개를합니다. </li><li> 식별 및 복강에서 ?...

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	<li>DeFelici, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Cell Biology: A laboratory Handbook. 1, 73-85 (1998).</li><li>Donovan, P. J., De Miguel, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Turning+Germ+Cells+into+Stem+Cells.">Turning Germ Cells into Stem Cells.</a> Current Opinion in Genetics and Development. 13, 463-471 (2003).</li><li>Labosky, P. A., Hogan, B. L. M., Sharp, P. T., Mason, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Part+12:+Mouse+Primordial+Germ+Cells:+isolation+and+in+vitro+culture.">Part 12: Mouse Primordial Germ Cells: isolation and in vitro culture.</a> Molecular embryology: methods and protocols. 97, (1999).</li><li>Mc Laren, A., Southee, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Entry+of+Mouse+Embryonic+Germ+Cells+into+Meiosis.">Entry of Mouse Embryonic Germ Cells into Meiosis.</a> Developmental Biology. 187, 107-113 (1997).</li><li>Yoshimizu, T., Obinata, M., Matsui, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stage-specific+tissue+and+cell+interactions+play+key+roles+in+mouse+germ+cell+specification.">Stage-specific tissue and cell interactions play key roles in mouse germ cell specification.</a> Development. 128, 481-490 (2001).</li><li>Zhang, J., Hhvorostov, I., Teitell, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+MEFs+to+Matrigel+I:+Passaging+hESCs+in+the+Presence+of+MEFs.">From MEFs to Matrigel I: Passaging hESCs in the Presence of MEFs.</a> J Vis Exp. , (2008).</li></ol>

포셉 제 14, 15, 메스 35mm, 해부 가위, 외과 분야, 항균 비누, 생리 식염수 0.9 %, 거즈, 얼음 폼 컨테이너, 면도날, 메스 35mm, 괜찮아요 포셉 제 4, 5, 괜찮아요 올린 바늘로 핸들, 종이 시트를 필터링하고, 유리 pipettes를 추출.<br /<br /&gt; 장비 : 해부 stereomicroscope, 광원 쇼트 Fostec, 거꾸로 현미경, micropipette 10 200ul, 원심 분리기, 바이오 안전 내각.

isolation and derivation of mouse embryonic germinal cells

배아 새싹 세포의 기능 (예) 암, 불임에 관한 우리의 가설을 해결하기 위해 완벽한 모델​​입니다 초기 발달 단계 동안 원시 종자 세포 (PGCs)로 나중에 gametes로 구별합니다. 이 프로토콜은 10.5-11.5 일 게시물 coitum (DPC) 마우스 배아의 개발 생식선에서 원시 종자 세포를 분리하는 방법을 보여줍니다. 마우스 배아에서 gonadal 능선을 개발 (C57BL6J) 다음 이전 mitotically 녹아웃 미디어의 존재에있는 mitomycin C와 inactivated과 백혈병 억제제로 보충되었다 마우스 배아 fibroblast 공급기 층 (MEF - CF1)에 도금 collagenase와 기계 파괴에 의해 dissociated되었습니다 팩터 (난생), 기본 Fibroblast의 성장 인자 (bFGF), 그리고 줄기 세포 계수 (SCF). 문화 조건 PCG 식별, 격리 및 설립을위한 이러한 최적화 방법을 사용하면 40 개 이상의 일간 EG 세포의 장기적인 문화를 수 있습니다. 태아의 새싹 세포 라인은 pluripotent 국가의 일반적인 사용 마커의 배아 표현형과 표현을 보여주었다. 분리 및 문화에 새싹 세포의 유도는 체외에서 개발을 이해하고 산화 스트레스에 노출 후 유전 및 epigenetic 수준에서 누적 손상을 모니터링하는 기회를 제공하는 도구를 제공합니다.

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Isolation and Derivation of Mouse Embryonic Germinal Cells

초기 개발 단계 동안 원시 종자 세포로 차별화하는 배아 새싹 세포의 능력은 암, 불임에 관한 우리의 가설을 해결하기 위해 완벽한 모델​​입니다. 이 프로토콜은 10.5-11.5 일 게시 coitum 마우스 배아의 개발 생식선에서 원시 종자 세포를 분리하는 방법을 보여줍니다.

절연 및 마우스 배아 새싹 세포의 유도

The ability of embryonic germinal cells (EG) to differentiate into primordial germinal cells (PGCs) and later into gametes during early developmental ...

Research

JoVE Journal

Biology

Derivation of Hematopoietic Stem Cells from Murine Embryonic Stem Cells

Murine 배아 줄기 세포로부터 조혈 줄기 세포의 유도

A stem cell is defined as a cell with the capacity to both self-renew and generate multiple differentiated progeny.  Embryonic stem cells (ESC) are ...

연구

생물학

Derivation of Human Embryonic Stem Cells by Immunosurgery

Immunosurgery에 의해 인간 배아 줄기 세포의 유도

The ability of human embryonic stem cells to self-renew and differentiate into all cell types of 
the body suggests that they hold great promise for both ...

Derivation of Mouse Trophoblast Stem Cells from Blastocysts

Blastocysts에서 마우스 Trophoblast의 줄기 세포의 유도

Specification of the trophectoderm is one of the earliest differentiation events of mammalian development. The trophoblast lineage derived from the ...

Adult and Embryonic Skeletal Muscle Microexplant Culture and Isolation of Skeletal Muscle Stem Cells

성인 및 배아 골격근의 Microexplant 문화 및 골격 근육 줄기 세포의 분리

Cultured embryonic and adult skeletal muscle cells have a number of different uses. The micro-dissected explants technique described in this chapter is a ...

Isolation and Culture of Avian Embryonic Valvular Progenitor Cells

조류 배아 판막병 전구 세포의 분리 및 문화

Proper formation and function of embryonic heart valves is critical for developmental progression. The early embryonic heart is a U-shaped tube of ...

Isolation and Culture of Cells from the Nephrogenic Zone of the Embryonic Mouse Kidney

배아 마우스 신장의 Nephrogenic 지대의 세포의 분리 및 문화

Embryonic development of the kidney has been extensively studied both as a model for epithelial-mesenchymal interaction in organogenesis and  to gain ...

Efficient Derivation of Human Cardiac Precursors and Cardiomyocytes from Pluripotent Human Embryonic Stem Cells with Small Molecule Induction

작은 분자와 유도 Pluripotent 인간 배아 줄기 세포로부터 인간 심장 엽 성의 전구 물질과 Cardiomyocytes의 효율 유도

To date, the lack of a suitable human cardiac cell source has been the major setback in regenerating the human myocardium, either by cell-based ...

Preparation of Mouse Embryonic Fibroblast Cells Suitable for Culturing Human Embryonic and Induced Pluripotent Stem Cells

Culturing 인간의 배아와 유도 Pluripotent 줄기 세포에 적합 마우스 배아 Fibroblast 세포의 준비

In general, human embryonic stem cells (hESCs) and human induced pluripotent stem cells (hiPSCs)1 can be cultured under variable conditions. However, it ...

Isolation of Embryonic Ventricular Endothelial Cells

배아 심실 내피 세포의 분리

Cell culture has greatly enhanced our ability to assess individual populations of cells under myriad culture conditions. While immortalized cell lines ...

Isolation and Culture of Mouse Primary Pancreatic Acinar Cells

마우스 기본 췌장 포상 세포의 분리 및 문화

This protocol permits rapid isolation (in less than 1 hr) of murine pancreatic acini, making it possible to maintain them in culture for more than one ...