Name: isolation and derivation of mouse embryonic germinal cells
Uploaded: 2009-10-22T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation and Derivation of Mouse Embryonic Germinal Cells at JoVE.com

Dr Lucy Senter, Dr. Brigit Willeford ve MSU ALAC akredite fare tesisi, eğitim ve hayvan bakımı ile ilgili yardım için Mike Basett; Dr. Dwayne Wise Dr Neal Birinci ve yazının düzenleme için Kourtney Wilkinson: Yazarlar, paha biçilmez bir yardım kabul etmek istiyorum Cesar Monroy Hannah Swoope ve Bobbie Huddleston MSU video üretimi ile yardım için mikroskopi ve görüntü yakalama ile yaptığı yardım için. Bu araştırma, Mississippi State Üniversitesi Kurumsal Araştırma ve Biyolojik Bilimler Bölümü Ofisi tarafından finanse edildi.

Bölüm 1: Hamile Fare Laparotomi <ol><li> Servikal dislokasyon kullanarak, 10,5-11,5 DPC, hamile bir C57BL6J kadın fare euthanize. </li><li> Karın antimikrobiyal sabun ile temizleyin ve sonra, tıraş. </li><li> Tıraştan sonra karın, bir tuzlu su çözeltisi ile yıkayın. </li><li> Sonra steril bir gazlı bez ile karın kurulayın. </li><li> Yeni bir steril alan fare ile kaplayın. </li><li> Forseps ve diseksiyon makas kullanarak ventral kesi olun. </li><li> Belirlenmesi ve karın boşluğuna kadar tüm rahim k...

<ol>
	<li>DeFelici, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Cell Biology: A laboratory Handbook. 1, 73-85 (1998).</li><li>Donovan, P. J., De Miguel, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Turning+Germ+Cells+into+Stem+Cells.">Turning Germ Cells into Stem Cells.</a> Current Opinion in Genetics and Development. 13, 463-471 (2003).</li><li>Labosky, P. A., Hogan, B. L. M., Sharp, P. T., Mason, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Part+12:+Mouse+Primordial+Germ+Cells:+isolation+and+in+vitro+culture.">Part 12: Mouse Primordial Germ Cells: isolation and in vitro culture.</a> Molecular embryology: methods and protocols. 97, (1999).</li><li>Mc Laren, A., Southee, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Entry+of+Mouse+Embryonic+Germ+Cells+into+Meiosis.">Entry of Mouse Embryonic Germ Cells into Meiosis.</a> Developmental Biology. 187, 107-113 (1997).</li><li>Yoshimizu, T., Obinata, M., Matsui, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stage-specific+tissue+and+cell+interactions+play+key+roles+in+mouse+germ+cell+specification.">Stage-specific tissue and cell interactions play key roles in mouse germ cell specification.</a> Development. 128, 481-490 (2001).</li><li>Zhang, J., Hhvorostov, I., Teitell, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+MEFs+to+Matrigel+I:+Passaging+hESCs+in+the+Presence+of+MEFs.">From MEFs to Matrigel I: Passaging hESCs in the Presence of MEFs.</a> J Vis Exp. , (2008).</li></ol>

Forseps No 14 ve 15, neşter 35 mm, diseksiyon makas, cerrahi alanlar, antimikrobiyal sabun, tuzlu solüsyon% 0.9, gazlı bez, buz köpüğü konteyner, jilet, bistüri 35 mm, ince forseps 4 ve 5 sayılı, ince alay iğne ile kağıt yaprak sapı, filtre ve cam pipetler çekti.<br /<br /&gt; Ekipman: diseksiyon stereomikroskopta, ışık kaynağı Schott Fostec, inverted mikroskop, 10 mikropipet ve 200ul, santrifüj, biyo güvenlik Dolabı.

isolation and derivation of mouse embryonic germinal cells

Embriyonik germinal hücrelerin yeteneği (EG), kanser ve kısırlık hakkındaki hipotezi adresi için mükemmel bir model, erken gelişim aşamalarında, ilkel germinal hücreleri (PGCs) içine ve daha sonra gamet içine ayırt etmek için. Bu protokol, 10,5-11,5 gün coitum (DPC) fare embriyoları, gelişmekte olan gonadlar ilkel germinal hücreleri izole etmek için nasıl gösterir. Fare embriyoları gonadal sırtlar Geliştirme (C57BL6J) sonra daha önce mitotik nakavt medya huzurunda mitomisin C ile inaktive edilmiş ve Lösemi İnhibitörü ile desteklenmiş bir fare embriyo fibroblast besleyici tabaka (MEF-CF1) kaplama kollajenaz ile mekanik parçalanması, ayrışmış edildi Faktörü (LIF), temel Fibroblast Büyüme Faktörü (bFGF) ve Kök Hücre Faktörü (SCF). PCG kimlik, kültür koşulları, izolasyon, ve kurulması için optimize edilmiş, bu yöntemleri kullanarak, en fazla 40 gün için EG hücreleri uzun vadeli kültürleri izin verir. Embriyonik germinal hücre hatları, pluripotent devletin yaygın olarak kullanılan belirteçlerin embriyonik fenotip ve ifade gösterdi. İzolasyon ve kültür germinal hücrelerin türetme gelişimini anlamak ve in vitro genetik ve epigenetik düzeyde oksidatif strese maruz kaldıktan sonra birikimli hasar izlemek için bir fırsat sunmak için bir araç sağlar.

Watch this Scientific Journal Video about Isolation and Derivation of Mouse Embryonic Germinal Cells at JoVE.com

Isolation and Derivation of Mouse Embryonic Germinal Cells

Ilkel germinal hücrelerin ayırt etmek için erken geliştirme aşamasında, embriyonik germinal hücreler, kanser ve kısırlık hakkındaki hipotezi adresine yeteneği mükemmel bir model. Bu protokol, 10,5-11,5 gün coitum fare embriyoları, gelişmekte olan gonadlar ilkel germinal hücreleri izole etmek için nasıl gösterir.

Fare Embriyonik Germinal Hücreleri İzolasyon ve türetilmesi

The ability of embryonic germinal cells (EG) to differentiate into primordial germinal cells (PGCs) and later into gametes during early developmental ...

Research

JoVE Journal

Biology

Derivation of Hematopoietic Stem Cells from Murine Embryonic Stem Cells

Murin Embriyonik Kök Hücre Hematopoetik Kök Hücre türetilmesi

A stem cell is defined as a cell with the capacity to both self-renew and generate multiple differentiated progeny.  Embryonic stem cells (ESC) are ...

Derivation of Human Embryonic Stem Cells by Immunosurgery

Immunosurgery İnsan Embriyonik Kök Hücreleri türetilmesi

The ability of human embryonic stem cells to self-renew and differentiate into all cell types of 
the body suggests that they hold great promise for both ...

Derivation of Mouse Trophoblast Stem Cells from Blastocysts

Blastosist Fare trofoblast Kök Hücre türetilmesi

Specification of the trophectoderm is one of the earliest differentiation events of mammalian development. The trophoblast lineage derived from the ...

Adult and Embryonic Skeletal Muscle Microexplant Culture and Isolation of Skeletal Muscle Stem Cells

Yetişkin ve Embriyonik İskelet, Kas Microexplant Kültür ve İskelet Kası Kök Hücre İzolasyonu

Cultured embryonic and adult skeletal muscle cells have a number of different uses. The micro-dissected explants technique described in this chapter is a ...

Isolation and Culture of Avian Embryonic Valvular Progenitor Cells

Kuş Embriyonik Kapak Progenitör Hücreler izolasyonu ve Kültür

Proper formation and function of embryonic heart valves is critical for developmental progression. The early embryonic heart is a U-shaped tube of ...

Isolation and Culture of Cells from the Nephrogenic Zone of the Embryonic Mouse Kidney

Embriyonik Fare Böbrek Nefrojenik Zone Hücreleri İzolasyon ve Kültür

Embryonic development of the kidney has been extensively studied both as a model for epithelial-mesenchymal interaction in organogenesis and  to gain ...

Efficient Derivation of Human Cardiac Precursors and Cardiomyocytes from Pluripotent Human Embryonic Stem Cells with Small Molecule Induction

Küçük Molekül İndüksiyon Pluripotent İnsan Embriyonik Kök Hücreleri İnsan Kardiyak Öncüleri ve kardiyomiyositlerde Verimli türetilmesi

To date, the lack of a suitable human cardiac cell source has been the major setback in regenerating the human myocardium, either by cell-based ...

Preparation of Mouse Embryonic Fibroblast Cells Suitable for Culturing Human Embryonic and Induced Pluripotent Stem Cells

Kültürleme İnsan Embriyonik ve Bağlı Pluripotent Kök Hücrelerinin için uygundur Fare embriyonik fibroblast hücreleri hazırlanması

In general, human embryonic stem cells (hESCs) and human induced pluripotent stem cells (hiPSCs)1 can be cultured under variable conditions. However, it ...

Isolation of Embryonic Ventricular Endothelial Cells

Embriyonik Ventriküler Endotel Hücre İzolasyonu

Cell culture has greatly enhanced our ability to assess individual populations of cells under myriad culture conditions. While immortalized cell lines ...

Isolation and Culture of Mouse Primary Pancreatic Acinar Cells

Fare Primer Pankreas Asiner Hücreleri İzolasyon ve Kültür

This protocol permits rapid isolation (in less than 1 hr) of murine pancreatic acini, making it possible to maintain them in culture for more than one ...